试管婴儿的操作步骤及程序有以下几方面：
(1)体外授精前处理及排卵监测：为了适时从卵巢采集排卵前成熟或近成熟的卵母细胞，精确地监测排卵前卵泡成熟的进程极为重要。利用自然月经周期采卵往往只能取到一个卵细胞。为了增加成功的机会，增加发育卵泡以获得多个卵子，现多采用有刺激周期方法(也称促超排卵)，一次可取得3个以上的卵母细胞。①自然月经周期中进行排卵前监测：世界上首例试管婴儿成功就是用自然周期监测排卵期排卵的。通过基础体温测定、内分泌测定(血雌二醇值、尿中黄体生成素值)和B超的监测，配合临床观察(宫颈粘液变化等)确定取卵时日。② B超监测：应与内分泌测定密切配合。③促超排卵：目前促超排卵主要有4种方案：克罗米芬—人绝经后促性腺激素(HMG)—绒毛膜促性腺激素(HCG)；HMG—HCG；促卵泡激素(FSH)—HCG；促性腺激素释放激素(GnRH)—HMG—HCG。常规使用克罗米芬—HMG—HCG方案。
(2)采卵：在确定的时间采卵。采卵的途径有：①剖腹直视下穿刺卵泡取卵。②经腹腔镜取卵。③B超引导下经腹壁、尿道膀胱或阴道穿刺取卵。目前多采用经腹腔镜或B超指引下经阴道取卵，后者尤为方便。
(3)卵子培养：吸出卵泡液后，立即寻找卵子。取出卵细胞后，置入装有人工培养液的培养皿内，并放入一定量的卵泡液，有助于卵细胞的生长发育。培养时间取决于所取卵泡的成熟度，成熟者一般培养2～6小时。
(4)体外授精：收集精液后应用洗涤法使精液体外获能，然后放入装有卵细胞的培养液内，培养15～24小时，在解剖显微镜下检查，如看到有两个原核存在于卵母细胞原浆中表示已授精，再继续培养36～42小时。当镜下观察到受精卵已分裂至4～8个细胞时，可考虑作胚胎移植。
(5)胚胎移植：阴道及宫颈用生理盐水清洁再用培养液擦洗，将金属或塑料导管置入颈管内。另一助手在显微镜下用1.3mm的聚四氟乙烯管从培养液内吸出胚胎细胞加吸0.03～0.05ml 培养液或0.03～0.05ml受试者血清，将此管插入宫颈管导管内放至距宫底0.5cm处，送胚胎入宫腔。胚胎移植后需卧床24小时，限制活动3～4天，接受黄体酮治疗。移植后2周作β-GCG测定，如无妊娠情况，停用黄体酮。移植成功的妊娠属高危妊娠予以监护。
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