冠心病患者PTCA手术前、后CD11b/CD18的表达及临床意义

心脏杂志 2000年第1期第12卷 论　著

作者：韩国华

单位：韩国华(解放军第273医院内一科，　新疆 库尔勒 841000)

关键词：冠状动脉疾病；白细胞粘附分子，CD11/CD18

　　摘　要:探讨不同类型CHD患者白细胞粘附分子的变化和PTCA对白细胞粘附分子表达的影响。选择行冠状动脉造影（CA）和PTCA术的患者27例，将其分为SAP组、UAP组及正常对照组。分别检测CA或PTCA术前、术后6 h,24 h,48 h的白细胞计数及CD11b/CD18在单核细胞和中性粒细胞（PMN）膜上的表达。结果: ①CHD患者血液中单核细胞、PMN的CD11b/CD18表达较健康对照组均显著增加（P＜0.01）,其中UAP组最为明显。②PTCA术后白细胞计数和单核细胞CD11b/CD18表达与术前无明显差异，而PMN膜CD11b/CD18表达在6 h开始升高（P＜0.01）,48 h升高尤为显著。而CA术前后各项检测指标均无差异。结论: CHD患者PMN、单核细胞膜上CD11b/CD18的表达明显增加，粘附性增强，其增加程度与心肌缺血状态有关；PTCA术后PMN膜CD11/CD18表达的上调，可能是冠脉再狭窄的原因之一。

　　中图分类号：R541.1　　　文献标识码：A　　　文章编号：1005-3271(2000)01-0028-03

The expressions of CD11b/CD18 on leucocytes of the CHD patients before and after PTCA and their clinical significance

HAN Guo-hua

　　(No.273 Hospital of the PLA, Kuerle Xinjiang 841000)

　　abstract　The present atudy was conducted to observe the changes in CD11b/CD18 expressions in different types of CHD patients and the effect of PTCA on CD11b/CD18 expression. Twenty-seven patients who had been given CA and PTCA were chosen and divided into three groups (SAP ,UAP and the control). Leucocyte counts and CD11b/CD18 expression on leucocytes of the three groups were determined befor and 6,24,48 hours after operation. The results were as follows:①The CD11b/CD18 expressions on monocytes and PMNs of the CHD patients were significantly higher than those of the control group (P＜0.01),with the in crease in those of the UAP group most prominent. ②The CD11b/CD18 expressions on the monocytes and leucocyte counts showed no differences in the CHD patients before and after PTCA,but CD11b/CD18 expressions on the PMN gradually increased with the passage of time from 6 h after PTCA,and was the highest 48 h after the operation. It was concluded that both the CD11b/CD18 expressions on PMN and monocyte and the monocytic adherence in the CHD patients obviously increased and that the increased level might be related to the ischemic extent of cardiac muscles. It could be deduced that the increased expression of CD11b/CD18 on PMN after PTCA might play a role in the further narrowing of the coronary artery.

　　Key words:coronary disease; angioplasty transluminal,percutaneous coronary; CD11b/CD18

　　经皮冠状动脉腔内成形术（PTCA）是目前治疗冠心病最有效的手段之一。但其术后高达30%的再狭窄率限制了其效果。PTCA术后冠脉再狭窄机制尚不清楚，但有研究表明PMN参与PTCA术后再狭窄。作者观察了稳定性心绞痛（SAP）、不稳定性心绞痛（UAP）患者PTCA术前后血液中白细胞粘附分子表达的变化，旨在探讨不同状态CHD患者白细胞粘附分子的变化和PTCA术对白细胞粘附分子的影响，为冠心病的防治提出新的思路。

　　1　对象与方法

　　1.1 　研究对象　 1999-01～1999-04在西京医院心内科住院进行冠状动脉造影(CA)及行PTCA的患者27例。按照1979年WHO制订的冠心病诊断标准，将其分为：稳定性心绞痛(SAP)组15例，男14例，女1例，平均年龄56±5岁;不稳定性心绞痛(UAP)组12例，男10例，女2例，平均年龄59±7岁。 正常对照组10例，男6例，女4例，年龄48±4岁。所有患者及正常人，近期无感冒、感染及应用免疫抑制剂或调节剂史。另选冠脉造影患者8例作CA前后对照。

　　1.2　标本采集　 患者术晨禁食，经常规术前准备，在局部麻醉下，股动脉穿刺，进行冠状动脉造影或PTCA术。术前及术后6 h,24 h,48 h分别取肘静脉血4次。每次取血1 ml，加抗凝剂后置专用试管备用。每人取术前血100 μl另作阴性对照。

　　由于白细胞在体外容易激活，使CD11b/CD18表达上调，因此样本的制备在4℃以下进行，并于采样后2 h内完成，以保证指标的可靠性。

　　1.3 　CD11b/CD18的检测　 采用流式细胞仪直接免疫荧光法探测。取肝素抗凝全血100 μl置于专用试管中，加入20 μl的抗CD11b单克隆抗体，阴性对照样本中加入20 μl的MSIgG1,室温避光反应15 min。每管中再加入20 μl全血白细胞样品制备试剂，上Q-prep样品制备仪破坏红细胞。最后上流式细胞仪测定。以每个细胞结合抗CD11b单抗的平均荧光密度强度级（MC）表示。结果以±s表示。两样本均数比较用t检验，多组样本均数比较用χ²分析。以P＜0.05为显著性差异界值。上述操作均于抽血后2 h内完成。

　　2　结果

　　2.1　 CHD患者的白细胞计数与CD11b/CD18表达　流式细胞仪测定显示，各组单核细胞、PMN与抗CD11b单抗的结合率均在97.5%以上，相互比较无显著性差异（P＞0.05）。两组冠心病患者单核细胞和中性粒细胞膜上CD11b/CD18的表达较对照组均明显增加，以UAP组更为显著，与SAP组和正常对照相比较，差异非常显著（P＜0.01）。各组间白细胞计数及细胞涂片分类无显著差异（表1）。

表 1　不同类型CHD患者术后白细胞计数与CD11b/CD18表达的比较　　(±s)

　　与对照组比较，^aP＜0.05;^bP＜0.01;与SAP组比较,^dP＜0.01

2.2　PTCA前、后白细胞计数与CD11b/CD18的表达　PTCA术后白细胞计数和单核细胞膜上CD11b/CD18的表达与术前比较无明显差异(P＞0.05)。而PMN膜上CD11b/CD18的表达随术后时间的推移逐渐升高，术后48 h升高尤为显著（表2）。

表 2　PTCA前、后白细胞计数与CD11b/CD18表达的比较　　　(±s，n=27）

　　与术前比较，^bP＜0.01　　8例进行冠脉造影患者，造影术后白细胞计数与单核细胞、PMN膜上CD11/CD18的表达与术前比较均无明显差异（表3）。

　　3　讨论

表 3　冠脉造影术前后白细胞计数与CD11/CD18表达的比较　　　(±s,n=8）

　　本文结果显示CHD患者循环血中单核细胞、中性粒细胞的CD11b/CD18表达均较正常对照组显著增加，其中UAP组增加尤为明显。而白细胞计数各组间无显著性差异，提示在白细胞数量改变之前，CHD患者的中性粒细胞和单核细胞就可能被激活，粘附性增加，并与CHD的严重程度有关。

　　CHD患者白细胞粘附激活的发生机制不十分清楚，可能与下列因素有关：①补体因素参与。已经证明高胆固醇血症和动脉粥样硬化脂质能够激活补体系统，促进白细胞和血小板在内皮细胞上聚集粘附，导致内皮细胞损伤，引起生长因子释放及单核细胞浸润，促进平滑肌细胞增生。②组织缺血缺氧。有报道低氧可刺激血小板激活因子（platelet activation factor,PAF）的合成，使CD11b/CD18表达上调而促使PMN和内皮细胞粘附增加^［1,2］。③血管内皮损伤，可使IL-1,TNF,PAF等细胞因子合成释放增加，ICAM-1、P选择素（GMP140）等表达上调，从而使PMN、血小板和血管内皮粘附增加。

　　PTCA术后，PMN膜上CD11/CD18的表达随时间推移逐渐升高，表明PTCA术后PMN活化。 PTCA已成为治疗CHD最有效的治疗方法。但有30%的再狭窄率，影响了其效果。 PTCA术后冠脉再狭窄的机制，近年研究表明，白细胞对平滑肌细胞的增殖具有重要作用。活化的中性粒细胞可促进血小板活化及平滑肌细胞增殖，并可产生大量氧自由基，抑制内皮细胞产生NO。而引起血管收缩、平滑肌细胞增殖，促进再狭窄的发生。同时，NO减少还可减弱对CD11b/CD18表达的抑制，反馈性地加强PMN与内皮细胞的相互作用^［3］。

　　PMN活化过程中，可粘附到血管内皮细胞，并认为PMN和内皮细胞表面粘附分子可能在再狭窄中有一定的作用。因PTCA术后再狭窄者，其PMN膜上CD11b/CD18的表达显著高于无再狭窄者。应用切割球囊行PTCA术，能降低再狭窄发生率，同时亦发现PMN膜上CD11b/CD18的表达显著降低。以上提示测定PTCA术后PMN膜上CD11b/CD18表达的程度是否可作为冠脉再狭窄的标志之一？值得进一步研究。

　　参考文献：

　　［1］　Arnould T. Increased PMN adherence on endotheliall cells after hypoxia:invoement of PAF,CD11b/CD18 andICAM-1［J］. Am J Physiol,1993,264:C1102.

　　［2］　Seigmeur MC. Vascular endothelial cells during hypoxia［J］. Clin hemorheol,1994,14:S1.

　　［3］　Kurose I,Kubes P,Wolf RE. Inhibition of nitric oxide production mechanisms of vascular albumin leakage［J］. Circ Res,1993,73:164.

(收稿 1999-01-13　修回 1999-10-21)