养胃冲剂对大鼠萎缩性胃炎胃粘膜组织形态及胃肠激素的影响

中药新药与临床药理 1999年第5期第10卷 药效与毒理学研究

作者：崔儒涛　蔡淦　尹兆宝　杨秋泓　林江　孙克兴　孙文善

单位：崔儒涛　蔡淦　杨秋泓　林江（上海中医药大学附属曙光医院，上海200021）；尹兆宝（上海中医研究院老年医学研究所，上海200032）；孙克兴（上海中医药大学针灸系，上海200032）；孙文善（上海第二医科大学附属瑞金医院，上海200020）

　　关键词： 养胃冲剂；药理学；萎缩性胃炎；中药疗法；疾病动物模型

　　摘要：用甲硝基亚硝胍加酒精建立大鼠慢性萎缩性胃炎模型，观察养胃冲剂对其胃粘膜组织病理学、前列腺素E₂(PGE₂)、生长抑素(SS)、血浆胃动素(MOT)的影响。结果造模大鼠经治疗胃粘膜光镜下组织学明显改变，PGE₂、SS水平升高，与造模组对比，有显著性差异(P＜0.05)；血浆MOT浓度无显著性差异(P＞0.05)。说明养胃冲剂可调节胃肠道激素分泌，起到保护胃粘膜、修复损伤胃粘膜的治疗作用。

　　中图分类号：R285.5；R256.305　　文献标识码：A　　文章编号：1003-9783(1999)05-0273-03

The Influence of Yangwei Granule on the

　　Plasma in Rat Models with Chronic Atrophic Gastritis

　　CUI Rutao,CAI Gan,YIN Zhaobao,et al.

　　(Shuguang Hospital, Shanghai University of TCM,Shanghai 200021)

　　Abstract:Setting up rat model of chronic atrophic gastritis(C AG) by using Methylnitronitrosoguanidine(MNNG) and alcohol,to observe the effec t of Yangwei Granule(YWG)on gastric mucosa,prosta glandin E₂(PGE₂),somatostatin(SS) and plas ma Motilin(MOT).Results:YWG could alter the structure of gastr ic mucosa,increase t he level of PGE₂ and SS as compared with the control group ,the difference bei ng significant (P＜0.05),while that of M OT was not significant(P＞0.05).Conclusi on:YWG can protect the gastric mucosa and repair its damage by regulating the secretion of gastrointestinal hormone.

　　Key words:@Yangwei Granule/pharmac ol.;Gastritis,atrophic/TCD ther.;Animal disease model

　　养胃冲剂是杭州正大青春宝药业有限公司产品，主治慢性萎缩性胃炎，临床疗效显著^［1］。本实验旨在探讨养胃冲剂治疗慢性萎缩性胃炎的作用机理。

　　1　材料与方法

　　1.1　动物　清洁级Wistar大鼠，雄性，共50只，体重140～170g；由上海中医药大学实验动物中心提供。大鼠分笼饲养，每笼5只，喂以颗粒饲料，室温15～20℃，湿度70～80%。

　　1.2　药物与试剂　甲硝基亚硝胍(MNNG)，Fluka公司产品；养胃冲剂浸膏，杭州正大青春宝药业有限公司产品，每克浸膏含生药3.6g；前列腺素E₂(PGE₂)测定试剂盒，中国医学科学院基础医学研究所产品；生长抑素(SS)测定试剂盒，第二军医大学附属长海医院放免测定中心产品；胃动素(MOT)测定试剂盒，中国人民解放军总医院基础所生化室放射免疫室产品。

　　1.3　分组　大鼠随机分为3组，即正常对照组、造模组和治疗组，造模组和治疗组各20只，正常对照组10只。

　　1.4　造模与给药　每3d取MNNG2g，用蒸馏水2000mL配成1g/L的保存液，避光，4℃冷藏。每日用保存液配制浓度为100mg/L的稀释液置棕色瓶中，让造模组和治疗组动物自由饮用，同时用40%酒精灌胃2mL/次，每周二次，共10周^［2］，正常对照组给予自来水饮用，用蒸馏水灌胃2mL/次，每周二次，共10周。第11周开始，治疗组每日取养胃冲剂浸膏100g配成溶液400mL，取溶液4mL(含生药18g/kg)，灌胃，每日一次，造模组、正常对照组每日用自来水4mL灌胃，均共6周。第17周，将大鼠处死，采血3mL，取胃，沿大弯剪开。

　　1.5　组织病理学检测　取大鼠1/3腺胃，置入中性福尔马林保存，常规病理切片，光镜下观察胃粘膜组织结构变化，并进行图像分析。

　　每组随机抽取12例(正常对照组全取)，每例5个完整腺体/视野，在16倍物镜下，将典型视野经摄像机输入图像终端，选择测量如下参数：腺体外周形状因子(GSF)=腺管周长的平方/(4π·腺管面积)；腺体形状指数(TGF)=单个管周径/(单个腺管面积的平方)；核腺比值指数(ING)=腺管细胞核面积/腺管细胞面积；结构异型指数(ISA)=单位面积内腺体面积/间后面积。

　　1.6　PGE₂测定　取大鼠1/3腺胃，用钝刀片刮下胃粘膜放入试管中，于液氮中速冻，称重后加生理盐水-无水乙醇1mL，匀浆离心，上清液加乙酸乙酯提取，离心，提取液用压缩空气吹干，置-20℃冰箱内待测。用放免法(RIA)测定标本中PGE₂含量。

　　1.7　SS测定　取大鼠剩余1/3腺胃，用钝刀片刮下胃粘膜放入试管中，加1mL蒸馏水，100℃水浴10min后，加0.1mol/LHCl0.2mL，依次匀浆和离心，取上清液置-20℃冰箱内待测。用RIA法测定标本中SS含量。

　　1.8　MOT测定　采集3mL全血，加30mLEDTA抗凝剂、50mLKIH抑肽酶，分离血浆，置-20℃冰箱保存待测。用RIA法测定标本中MOT含量。

　　1.9　统计学处理　应用方差分析的方法。

　　2　结果

　　2.1　组织病理学

　　2.1.1　目检结果　正常组胃粘膜表面光滑，附有较多粘液，粘膜皱襞光整。造模组胃粘膜平滑，皱襞低平稀少，甚至消失，有的胃粘膜明显变薄。治疗组与正常组差别不大。

　　2.1.2　光镜　正常对照组胃粘膜上皮完整，腺体排列规则，粘膜固有层未见炎细胞或仅见少数淋巴细胞及嗜酸性细胞散在，无充血、水肿，粘膜肌层较薄。AB/PAS染色为AB(-)、PAS(+)(见附图A)。造模组胃粘膜上皮不完整，表面可见脱落的变性、坏死上皮细胞，粘膜腺体有不同程度的萎缩或消失，部分腺体呈囊状扩张，扩张的腺体在腺胃及胃窦均可见，其上皮呈柱状，有的排列呈假复层，腺腔内可见分泌物，粘膜固有层内见较多淋巴细胞、浆细胞，少数嗜酸性白细胞及嗜中性白细胞浸润，重者淋巴细胞呈灶性浸润似淋巴滤泡，粘膜肌层增厚，厚薄不匀，并向固有膜延伸，在腺体之间见较多平滑肌纤维(见附图B)。造模组18例中发现4例灶性肠上皮化生，化生上皮未见刷毛缘和潘氏细胞，AB/PAS染色：AB(+)，PAS(+)；3例出现轻-中度不典型增生，表现为腺体稍不规则，排列较紧密，病变深部可见囊性扩张，上皮细胞核增大，位于细胞的下1/2～下2/3呈假复层排列。治疗组胃粘膜上皮完整，腺体排列欠规整，粘膜固有层见少数淋巴细胞散在，粘膜肌层略增厚，但厚薄均匀(见附图C)。19例中见2例灶性肠化生，2例见轻度异型增生。

附图　养胃冲剂对胃粘膜组织结构的影响(光镜4×10)

　　2.1.3　图像分析

　　筛选GSF、ING、IGF、ISA四个形态定量参数，分别从胃粘膜层、腺体、腺细胞核三个方面考察胃粘膜萎缩及养胃冲剂的治疗作用，结果显示四个参数随胃粘膜萎缩的发生而递增，经养胃冲剂治疗后显著下降。

　　2.2　养胃冲剂对大鼠胃粘膜PGE₂、SS水平、血浆MOT的影响

表1　养胃冲剂对模型大鼠胃粘膜组织结构的影响

(±s)

　　注：与正常组比较，P均＞0.05；与模型组比较，^△P＜0.05。

表2　养胃冲剂对大鼠胃粘膜PGE₂、SS水平及血浆MOT的影响

(±s，×10^-6g.kg^-1)

　　注：与正常组比，^*P＜0.05，^**P＜0.01；与造模组比，^△P＜0.05，^△△P＜0.01。　　造模组大鼠胃粘膜PGE₂、SS水平比正常对照组高，有显著性差异(P＜0.01)；血浆胃动素水平升高；经养胃冲剂治疗，PGE₂、SS水平比造模组升高，有显著性差异(P＜0.05～0.01)，与正常组对比无显著性差异(P＞0.05)；MOT有一定下降，但与造模组、正常对照组动物对比无显著性差异(P＞0.05)。

　　3.　讨论

　　养胃冲剂由黄芪、党参、白芍、香附、陈皮、山药等中药组成，具有养胃健脾、理气和中的作用，临床上用于治疗慢性萎缩性胃炎取得较好疗效。

　　SS、PGE₂对胃粘膜具有细胞保护作用。正常胃粘膜上皮细胞能不断地合成和释放前列腺素，前列腺素对腺苷酸环化酶有刺激作用而形成cAMP,cAMP可激活蛋白酶而促进胃粘膜内糖蛋白和粘多糖的合成与释放，从而防御各种损害因子对胃粘膜的损伤^［3］。另外，前列腺素还可增加胃粘膜血流，加速损伤胃粘膜组织的修复^［4］。生长抑素可能通过保护谷胱甘肽还原酶活性以维持胃粘膜内非蛋白结合巯基含量，从而防止脂质过氧化作用，以实现其细胞保护作用^［5］。本实验证实，养胃冲剂能使萎缩性胃炎造模动物胃粘膜的SS、PGE₂水平明显提高，其作用机理可能是通过调节胃肠道激素水平起到保护胃粘膜、修复损伤胃粘膜的治疗作用。

　　参考文献：

　　［1］施玉湘，周汉高.养胃冲剂与猴菇菌片治疗慢性萎缩性胃炎的比较［J］.新药与临床，1996，9(15)：264.

　　［2］宋伯根，李义清，石红军，等.胃粘膜上皮异型增生表现类型及其癌变意义的实验研究［J］.中华消化杂志，1994，14(4)：216.

　　［3］Niemela S. Characteristics of reflux gatritis duodenogastric reflux : Cor relations among Bile acid pattern, mucus secretion, and mucosal damage scand［J ］. J Gastroentreoll, 1987,72:349.

　　［4］Kontarek S J, Tobert A. Cytoprotection of gastric mucosa by prostagl and in possible mediation by increased mucosal blood flow ［J］.Digestion, 1982, 25:165.

　　［5］Szaho S.Cytoprotection-organoprotection by somatotatin:

　　gastric and hepatic lesion［J］.Experientia,1984,38:284.

收稿日期：1998-05-11