幽门螺杆菌感染与PCNA、TGF-betal表达的关系
山东医药 2000年第24期第40卷 临床研究
作者:周世庆 张伯新 赵东 徐向阳
单位:周世庆(济南市中心医院 山东济南 250013);张伯新(济南市中心医院 山东济南 250013);赵东(济南市中心医院 山东济南 250013);徐向阳(山东省胸科医院)
幽门螺杆菌(HP)感染是导致胃癌发生的重要原因之一,但HP并非胃癌的直接致癌物,而是通过对胃粘膜的损伤,促进病变发展的条件因素,使胃癌发生的危险性增高。我们通过研究HP感染与胃粘膜PCNA、TGF-betal表达的关系,探讨HP可能致癌机理。
1 资料与方法
1.1 临床资料 选自我院1999年2月~2000年6月门诊和住院患者110例的胃粘膜活检标本。其中慢性浅表性胃炎(CSG)20例,慢性萎缩性胃炎(CAG)30例,不典型增生(DYS)30例和胃癌(GCA)30例。每例取新鲜胃粘膜5块(胃窦及病灶部),其中一块立即行尿素酶试验,另外4块胃粘膜用中性福尔马林液固定,常规石蜡包埋,HE染色进行病理诊断。
1.2 方法 ①HP感染的判断:尿素酶试验及改良Giemsa法两者均阳性为HP感染阳性,两者均阴性为HP阴性。②免疫组化SABC法:抗PCNA单克隆抗体及抗TGF-betal抗体由武汉博德公司提供,用TBS替代第一抗体作为空白对照。
1.3 结果判定 PCNA为颗粒型阳性,定位于细胞核呈棕黄色,数3个以上高倍镜视野不小于500个细胞,计算阳性细胞,计算PCNA指数(PCNA LI)。TGF-betal阳性染色定位于细胞膜及细胞浆中,核不着色。其结果判断按Shimizu法,先在高倍镜下对细胞内反应作如下评分:①阳性着色程度:无着色为0,浅着色为1,深着色为2。②阳性着色范围:无着色为0,着色小于1/3为1,着色大于1/3为2,弥漫着色为3,两者相加大于3为阳性。
1.4 统计学方法 PCNA LI两样本均数的比较用t检验,HP感染率及TGF-betal的免疫组化检测采用卡方检验。
2 结果
各组之间以DYS的HP感染率为最高76.67%,CSG为45%,两者比较有显著性差异(P<0.05)。30例胃癌中,有明确的淋巴结转移的患者17例,其TGF-betal阳性率为95.68%,其余13例未发现转移的胃癌患者TGF-betal的阳性率为72.57%,两者比较P<0.05。同一类型胃粘膜HP阳性组PCNA、TGF-betal的表达均高于HP阴性组,P值均小于0.05,TGF-betal在胃癌组的表达均高于其它各组,见表1。
表1 HP感染与PCNA LI、TGF-betal
表达的关系(±s,%)
|
n |
HP(+)组 |
HP(-)组 |
n |
PCNA LI |
TGF-betal |
n |
PCNA LI |
TGF-betal |
CSG
CAG
DYS
GCA |
20
30
30
30 |
9
11
13
16 |
15.14±5.67
22.31±7.68
39.63±6.71
48.45±12.34 |
16.31
17.12
15.82
92.65 |
11
19
17
14 |
9.63±3.34
13.56±8.25
18.67±5.93
36.37±10.26 |
7.83
8.31
8.51
78.74 |
3 讨论
3.1 PCNA是一种分子量为36KD的酸性核蛋白,是DNA合成时聚合酶δ的辅酶,是细胞增殖周期中DNA合成的必要蛋白[1]。有资料表明[2]:HP可加速胃粘膜细胞的复制。其引起胃粘膜细胞增殖的可能机制是:HP产生大量尿素酶,分解尿素后产生的氨可直接刺激细胞增殖。HP也可刺激局部胃上皮细胞分泌许多细胞因子,如IL-1,IL-6,IL-8和TNF,都可以促进细胞增殖。本研究显示:PCNA IL在HP(+),组较(-)组明显增高(P<0.01),表明HP感染促进了细胞增殖,使胃粘膜处于高增殖状态,从而增加了细胞DNA的损伤[3]。这可能是HP感染引起胃癌发生的机制之一。同时本研究亦显示,不典型增生HP感染时较慢性浅表性胃炎的PCNA量也明显增高(P<0.01),同胃癌的增殖程度相接近(P>0.05),而无HP感染的DYS与GCA有明显差异(P<0.01)。故我们认为,对DYS伴有HP感染者应定期行胃镜活检,必要时行PCNA检查,应进行根除HP的抗菌治疗。
3.2 TGF-betal是参与细胞生长周期调控的重要因子之一,在肿瘤的增殖及凋亡过程中有重要作用。Yamamoto等[4]报道,TGF-betal能诱导GCA细胞的凋亡。TGF-betal通过TGF受体起作用,同时TGF-betal还能促进胃癌的淋巴结转移。本研究显示,HP(+)组TGF-betal的表达明显高于HP(-)组(P<0.05),而CSG、CAG及DYS之间无明显差异(P>0.05)。有无淋巴结转移的GCA患者其TGF-betal阳性率有明显差异。表明HP感染加速了胃癌患者细胞的凋亡,TGF-betal在胃炎及癌前病变中作用不明显。所以HP感染可以通过TGF-betal的高表达致肿瘤的增殖与凋亡失衡,促进肿瘤细胞的转移。
参考文献
1,Fairman NP.DNA Polymerase PCNA actions and interactions.J Pathol,1990,137:313~330.
2,BrenesF,Ruiz B,Correa P,Hunter F,et al.Helicobacter pylori causes hyper-preliferating of the gastric epithelium;pre and post eradication induces of proliferating cell nuclear antigen.AmJ Gastroenterol,1993,88:1870~1872.
3,Hall PA,Levison DA,Woods AL et al.Proliferating cell nuclear antigen(PCNA)immunolocalization in paraffin section.Cell proliferation with evidence of deregulated express in some neoplasms.J Pathol,1990,(4):285~294
4,YamamotoM,Maehara,et al.Transforming gronth facter betal induces apoptosis is in gastric cancer Cells through a P53-inpendent pathway.Cancer,1996,77(8suppl):1628~1633.
(收稿日期:2000-10-16)