双环醇可清除自由基抑制肝细胞凋亡

　　对双环醇药理学研究证明，该药具有显著的保肝作用和一定抗肝炎病毒活性。双环醇50mg/kg、100 mg/kg、200mg/kg对四氯化碳(CCl4)、D－氨基半乳糖、对乙酰氨基酚引起的小鼠肝损伤以及卡介苗＋脂多糖（LPS）诱导的小鼠免疫性肝炎均有明显降谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）作用，并能减轻肝组织病理损伤。双环醇体外给药对2.2.15细胞株分泌HBeAg和HBsAg有抑制作用，该药0.4g/kg和0.6g/kg 口服对鸭病毒性肝炎血清和肝脏的鸭肝病毒DHBV－DNA有显著抑制作用。对该药作用的机制进行多方面研究的结果表明，双环醇可清除自由基，保护细胞膜，亦可以保护肝细胞核DNA免受损伤和减少细胞凋亡的发生。双环醇具有抗肝炎病毒和抗肝细胞损伤两方面的作用，分析其作用机制可得出如下的几点结论：

　　双环醇能清除自由基和维持生物膜结构的完整性

　　实验的依据是双环醇对用CCl4－还原型辅酶Ⅱ诱发的小鼠肝微粒体（内质网）脂质过氧化以及用FMLP活化的中性白细胞中脂质过氧化产物丙二醛及过氧化氢的生成量均有明显抑制效果。双环醇对CCl4与小鼠肝微粒体蛋白质和脂质大分子的共价结合亦有抑制作用。用电子自旋共振（ESR）捕捉技术亦检测到双环醇对CCl4在肝微粒体中被肝药酶活化后而生成的三氯甲基自由基（·CCl3）以及被FMLP激活的中性粒细胞产生的氧自由基如超氧阴离子和羟自由基均有清除作用。已知肝细胞感染肝炎病毒后会产生许多炎性细胞因子，其中包括氧自由基、损伤线粒体、细胞核，引起细胞坏死和凋亡，双环醇的清除自由基作用恰好有利于阻断上述的病理生化过程。

　　双环醇对用刀豆蛋白（ConA）造成的小鼠肝细胞核DNA裂解及细胞凋亡有抑制作用

　　给小鼠静脉注射ConA可造成免疫性肝损伤，肝细胞出现凋亡。预先服用双环醇则明显抑制ConA所引起的肝细胞凋亡，表现在细胞核DNA梯状条带的出现及DNA小分子片段的增多均减少。将提取的小鼠肝细胞核DNA在体外与氧自由基产生系统共同温孵，用超微弱化学发光仪检测DNA分子损伤的情况。结果亦表明，双环醇可保护肝细胞核DNA免受损伤。这些结果直接支持双环醇可保护肝细胞核，减少细胞凋亡，这很可能是该药发挥肝细胞保护作用的机制之一。

　　双环醇对人肝癌细胞株HepG2有诱导凋亡的作用

　　文献报道感染病毒的细胞不易发生凋亡，2.2.15细胞株即是HepG2细胞转染人乙肝病毒（HBV－DNA），而双环醇对此细胞株复制HBeAg和HBsAg有抑制作用。从细胞形态和DNA电泳检测结果均支持双环醇对HepG2细胞有诱导凋亡作用。也许可以这样推测：双环醇通过诱导感染肝炎病毒的肝细胞出现凋亡，细胞凋亡了，肝炎病毒也随之被消灭。

　　结合上述的后两项结果，我们设想：双环醇可能通过调节某种信号机制，诱导感染病毒的肝细胞出现凋亡，达到抑制病毒的效果，而对正常肝细胞因某些因素引起的凋亡则有保护作用，从而在乙型肝炎患者起到肝细胞保护和抗病毒复制的效果。为准确回答上述设想，我们正在从更深层次对双环醇药理作用的机制进行研究。希望能给大家更为透彻的答案。

　　另外的药理试验证明，双环醇直接与小白鼠血清和肝脏匀浆共同温孵对ALT和AST活性没有影响，亦不影响服用双环醇的小鼠肝脏中ALT蛋白量，故可以认为双环醇不是ALT抑制剂。

　　综上所述，双环醇在动物具有明显肝细胞保护作用，兼有一定抗肝炎病毒活性。这些作用应是该药在临床对慢性乙型肝炎显示疗效的药理学基础。鉴于该药口服对乙型肝炎病人能明显改善肝功能，使升高的ALT和AST降低，并对HBeAg和HBV－DNA阴转亦有较好的疗效，停止服药后疗效较巩固，反跳率低，亦无明显不良反应。该药的上市将为肝炎的治疗提供一种新武器，为我国广大肝炎患者提供一种更加有效、安全和经济的治疗选择。

《中国医学论坛报》