转化生长因子βⅡ型受体在肝癌中的基因表达及临床意义

中华实验外科杂志 1999年第6期第16卷 简　报

作者：刘超　王捷　区庆嘉

单位：510120　广州，中山医科大学孙逸仙纪念医院普外科

　　TGF-βⅡ受体型(transforming growth factor-β type Ⅱ receptor, TGF-βRⅡ)是跨膜的丝氨酸/苏氨酸激酶，转化生长因子-β₁(transforming growth factor-β₁，TGF-β₁)抑制细胞增殖的作用是通过其传导的^［1］。我们研究TGF-β RⅡ在肝细胞癌的基因表达，探讨肝癌细胞生长的负性调节有何变化，现将结果报道如下。

　　一、材料和方法

　　1. 材料　标本来自于我院外科行肝癌切除的30例患者。手术切下肿瘤后，迅速取小块肝癌组织和癌旁肝组织，放入液氮中保存，病理检查均证实为肝细胞癌。

　　2. 逆转录聚合酶链反应　参照分子克隆实验指南(第2版)。扩增TGF-β rⅡmRNA的引物序列为，PrimerⅠ: 5′-TCACTGACAACAACGGTGCAG T-3′(113-134)；PrimerⅡ: 5′-ATA GACCTCAGCAAAGCGACCT-3′(756-777)。扩增片段长为665 bp。

　　二、结果

　　肝癌组织和癌旁肝组织中TGF-β RⅡmRNA阳性表达分别为11/30(36.7%)和23/30(76.7%)；肝癌组织中TGF-β rⅡmRNA表达低于癌旁肝组织(P＜0.01)。TGF-β RⅡmRNA的扩增片段见图1。

图1　TGF-β RⅡmRNA在肝细胞癌中的表达

　　1～6： 癌旁肝组织；7～11： 肝癌组织；M： DNA标准片段，分子量自下而上依次为377，515，695，994，1543 bp

　　在TGF-β RⅡmRNA表达阳性的11例肝癌组织中，按Edmondson氏分级，肝癌细胞分化Ⅰ到Ⅱ级8例(72.7%)，Ⅲ到Ⅳ级3例(27.3%)；合并门静脉癌栓4例(36.4%)。而在TGF-β RⅡmRNA表达阴性的19例肝癌组织，肝癌细胞分化Ⅰ到Ⅱ级仅2例(10.5%)，Ⅲ到Ⅳ级多达17例(89.5%)；合并门静脉癌栓15例(78.9%)。也就是说，肝癌组织TGF-β RⅡmRNA表达与肝癌细胞分化程度成反相关(P＜0.01)；肝癌组织TGF-β RⅡmRNA表达越低，门静脉转移和癌栓形成可能性越大(P=0.0465)。

　　三、讨论

　　肝细胞的正常增殖有赖于正性调节因子和负性调节因子之间的动态平衡。例如，在肝切除、肝再生的早期，肝组织中肝再生刺激因子(HSS)、肝细胞生长因子(HGF)、转化生长因子α(TGF-α)等正性调节因子表达增加，促进肝细胞的再生；而在肝再生的晚期，肝组织中的负性调节因子TGF-β₁表达水平达高峰，结果肝细胞再生终止并分化成熟。在肝癌组织中，研究发现正性调节因子TGF-α、表皮生长因子(EGF)等表达有增加，可能与肝细胞生长失控和癌变有关；但负性调节因子TGF-β₁在肝癌中的表达有不同的报道^［2，3］。

　　本实验发现，肝癌组织中TGF-β RⅡmRNA表达降低，导致TGF-β₁对肝细胞生长调节的信号通路发生障碍，结果肝细胞生长的负性调节被削弱，生长平衡被破坏，肝细胞生长失控，推测与其癌变有关。在人原发性肝癌的研究中，Bedossa用免疫组化技术在蛋白水平发现肝癌细胞膜表面TGF-β RⅡ丢失^［4］。本实验采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术，进一步在mRNA水平证实，肝癌组织TGF-β RⅡ基因表达降低。

　　TGF-β₁对大多数的上皮细胞增殖均有抑制作用，在其他上皮细胞来源的肿瘤中均存在着细胞表面丢失TGF-β RⅡ和失去对TGF-β₁抑制作用敏感性的现象。因此，上皮来源的肿瘤丢失细胞膜表面的TGF-β受体可能是其逃避负性生长调节和癌变的一个共性。

　　本实验还发现肝癌组织TGF-β RⅡmRNA表达越低，肝癌细胞分化程度越差，出现门静脉转移和形成门脉癌栓的可能性越大。所以，肝癌细胞表达TGF-β RⅡ与否是肝癌的又一生物学特性。

　　参考文献

　　1　Chen RH, Ebner R, Derynck R. Inactivation of the typeⅡ receptor reveals two receptor pathways for the diverse TGF-β activities. Science, 1993,260:1335-1338.

　　2　Shirai Y, Kawata S, Tamura S, et al. Plasma transforming growth factor-β₁ in patients with hepatocellular carcinoma. Cancer, 1994,73:2275-2279.

　　3　Nagy P, Thorgerirsson SS. Expression of TGF-β₁ and IGF-Ⅱ receptor in HBV associated tumors and surrounding tissue in human liver carcinogenesis. Proc. Am. Soc. Cancer Res, 1994,35:126.

　　4　Bedossa P, Eric P, Terris B, et al. Transforming growth factor-beta 1 (TGF-β₁) and TGF-β₁ receptors in normal, cirrhotic, and neoplastic human livers. Hepatology, 1995,21:760-766.

(收稿： 1999-02-12)