p16蛋白表达与胃癌浸润转移的关系

癌症 2000年第3期第19卷 论著摘要

作者：贺修胜　苏琦　钱仲斐　罗招阳

单位：贺修胜（衡阳医学院肿瘤研究所,湖南衡阳421001）；苏琦（衡阳医学院肿瘤研究所,湖南衡阳421001）；钱仲斐（湖南医科大学病理教研室，湖南长沙410078）；罗招阳（衡阳医学院肿瘤研究所,湖南衡阳421001）

关键词：p16蛋白表达；胃肿瘤；浸润；转移

　　分类号：R735.2　文献标识码：A

　　文章编号：1000－467X(2000)03－0274－01■

　　p16基因是近年来克隆出来的一个新的抑癌基因，定位于9p21，由2个内含子和3个外显子组成，全长8.5kb。3个外显子共同编码分子量为15.84kd、148个氨基酸组成的单链多肽－P16蛋白，参与正常细胞生长调控^[1]。研究资料表明在人类多种肿瘤细胞系及原发肿瘤中存在p16基因的异常及p16蛋白表达的缺失。本文就p16蛋白表达与胃癌浸润、转移等生物学行为的关系进行了分析，报告如下。

　　1　材料和方法

　　1．1　标本来源

　　标本来源本院病理学教研室存档的石蜡包埋组织块及手术切除标本,均经病理确诊。122例胃癌中男81例,女41例，年龄15～79岁,平均56岁;浸润浅肌层50例,浸润深肌层及全层72例，明确已有淋巴结转移的69例,无淋巴结转移53例,任取30例淋巴结转移癌和其相对应的原发癌配对比较。

　　1．2　主要试剂

　　兔抗人p16蛋白多克隆抗体,链菌素生物素－过氧化物酶免疫组化试剂盒(S－P)购自美国Maxaim公司(由福建迈新公司提供)。

　　1．3　实验设计,工作流程,判断标准,结果判定

　　见参考文献^[4]。

　　1.4　统计学方法

　　采用χ²检验，确定P＜0.05为差异有显著性意义。

　　2　结果

　　2.1　30例原发及淋巴结转移性胃癌配对标本中p16蛋白阳性表达(见图1)

图1　p16蛋白在淋巴结转移性胃癌组织中的阳性表达（箭头所示）×400

　　原发胃癌组为46.67％(14/30),淋巴结转移性胃癌组为16.67％(5/30),淋巴结转移性胃癌组p16蛋白阳性表达率低于原发胃癌组，两组间差异有显著性意义(P＜0.05)(见表1)。

表1　p16蛋白表达与原发及淋巴结转移性胃癌的关系

　　2.2　p16蛋白在不同性别胃癌中阳性表达

　　女53.66％(22／41)，男44.44％(36／81),女性高于男性(P＞0.05)。

　　2.3　p16蛋白在不同年龄组胃癌中阳性表达

　　≤40岁的中青年组45.45％(10/22)，41～59岁中老年组49.27％(34/69)，≥60岁老年组45.16％(14/31)，中老年组＞中青年组＞老年组(P＞0.05)。

　　2.4　p16蛋白在不同浸润深度胃癌组中阳性表达（见图2）

图2　p16蛋白在浸润肌层胃癌组织中的阳性表达（箭头所示）×400

　　浸润浅肌层48.00％(24/50),浸润深肌层及累及全层47.22％(34/72)，前者高于后者(P＞0.05)。

　　2.5　胃癌Borrmann分型与p16蛋白的表达

　　Ⅰ型为46.67％(7/15),Ⅱ型为48.84％(21/43),Ⅲ型为46.81％(22/47),Ⅳ型为47.06％(8/17),Ⅱ型＞Ⅳ型＞Ⅲ型＞Ⅰ型(P＞0.05)。

　　3　讨论

　　p16基因是一个直接参与细胞生长殖的负调控基因。若此基因失活或达异常或表达产物结构改变,将使其能丧失,致使细胞过度生长增殖,导肿瘤的发生发展^[1]。最近有人把外源p16基因转染到有p16基因缺失的肿细胞内,使瘤细胞重新恢复了p16基表达,生长明显受到抑制^[2]。还有人对16基因CpG岛甲基化并表达沉没的瘤细胞系,施用5-氮-2′-脱氧胞嘧啶苷（5-aza-2′-deoxycytidine）治疗,使肿细胞重新恢复了p16蛋白的表达,并现出生长抑制^[3]。显然p16基因及其达产物p16蛋白在肿瘤的发生发展程中起着非常重要的作用。

　　作者曾报道胃癌p16蛋白阳性表达率低于癌前病变和正常胃粘膜,而且在胃癌各组织学类型中的表达率也各不相同^[4]。本文就不同性别、不同年龄组段、不同浸润深度、Borrmann分型、原发及淋巴结转移胃癌与p16蛋白表达的关系做进一步研究分析，结果显示：(1)p16蛋白阳性表达率,在不同性别、不同年龄组段、不同浸润深度及Borrmann分型各胃癌组中的差异均无显著性意义(P＞0.05)，提示胃癌组织中p16蛋白缺失可能与性别、年龄、浸润深度及Borrmann大体分型无明显关系。Reed在研究恶性黑色素瘤时,证实p16蛋白的缺失与恶性黑色素瘤浸润深度无关^[5],与本文胃癌研究结果一致；(2)在30例原发及淋巴结转移性胃癌配对标本中,p16蛋白阳性表达率转移癌为16.67％(5／30）、原发癌为46.67％(14／30）,转移癌明显低于原发癌,差异有显著性意义(P＜0.05)，与文献报道结果相似^[5]。提示p16蛋白的缺失可能与胃癌转移有关。并在1病例中发现原发癌为p16蛋白阳性表达,而转移到胃小弯侧相邻的两个淋巴结,一个为阳性表达,另一个则为阴性表达,究竟是在同一原发癌中有多个克隆或多个亚克隆性癌细胞的存在,还是由于一个淋巴结内转移癌发生了基因突变形成了新的亚克隆,而另一个淋巴结转移癌则没有发生类似改变,仍不清楚,有待进一步探讨。

　　基金项目：本课题受湖南省教委基金(编号97B095)资助

　　通讯作者：贺修胜:Tel：86－734－8280070Fax：86－734－8280907E－mail：yxybgs@hy.hn.cn

　　参考文献：

　　［1］Serrano M,Hannon GJ,Beach D. A new regulatory motif in cell－cycle control causing specific inhibition of cyclin D/CDK4[J]. Nature,1993， 366：704～ 707.

　　［2］Mobley SR,Liu TJ,Hudson JM,et al.In vitro growth suppression by adenoviral transduction of p21 and p16 in squamous cell carcinoma of the head and neck： a research model for combination gene therapy [J]. Arch Otolaryngol head Neck Surg,

　　1998, 124： 88～ 92.

　　［3］Lo KW,Cheung ST， Leung SP, et al. Hypermethylation of the p16 gene in nasopharyngeal carcinoma [J]. CancerRes,1996， 56： 2721～ 2725.

　　［4］贺修胜，苏琦，龙治峰.胃癌及癌前病变中p16蛋白表达的研究[J].衡阳医学院学报，1998，26：378～381.

　　［5］Reed JA， Loganzo F Jr,Shea CR,et al.Loss of expression of the p16/cyclindependent kinase inhibitor 2 tumor suppressor gene in melanocytic lesions correlates with invasive stage of tumor progression [J]. Cancer Res,1995， 55： 2713～ 2718.

收稿日期：1999－07－28

修稿日期：1999－08－30