大肠癌术前放免治疗及化疗与肿瘤坏死的相关性研究

癌症 1999年第5期第18卷 临床研究

作者：卢献平　董功航　李宝金　陈声乐　吕斌　蒋宁一

单位：卢献平　吕斌　蒋宁一，中山医科大学孙逸仙纪念医院1.核医学科(广州，510120)；董功航　李宝金　陈声乐，中山医科大学孙逸仙纪念医院2.外科(广州，510120)

关键词：结直肠肿瘤；放射免疫治疗；丝裂霉素C；肿瘤组织坏死

　　【摘　要】　目的：研究大肠癌术前放射免疫治疗及化疗(或导向化疗)对大肠癌组织及细胞的影响。方法:63例大肠腺癌患者随机分成五组。A组16例，术前肿瘤局部注射¹³¹I-抗CEA单抗；B组10例，术前肿瘤局部注射¹³¹I；C组7例，术前静脉注射丝裂霉素C；D组13例，术前静脉注射抗CEA单克隆抗体-丝裂霉素C交连物；E组17例术前不注射上述各种药物。其后对所有患者行手术并切取标本进行病理组织学观察。结果：肿瘤组织病理退变(坏死)程度：A组肿瘤组织病理退变程度1级2例(12.5％),2级10例(62.5％),3级4例(25％)；B组分别为1级6例(60％),2级4例(40％)；C组分别为1级2例(28.6％),2级5例(71.4％)；D组1级2例(15.3％),2级7例(53.9％),3例4例(30.8％)；E组病理退变程度17例(100.0％)均为1级。结论：1.大肠癌术前放射免疫治疗、化疗（或导向化疗）及局部注射放射性核素¹³¹I均能导致肿瘤细胞退行性变。2.肿瘤术前治疗对大肠癌手术切除有利。

　　中图分类号：R735.3；R730.55；R730.53　　文献标识码：A　　文章编号：1000-467X(1999)05-0583-03

Correlativity of preoperative therapy with necrosis of tumor tissue in colorectal carcinoma

LU Xian-ping,DONG Gong-hang,LI Bao-jin,et al.

Department of Nuclear Medicine and Department of Surgery, Memorial Hospital,Sun Yat-sen University of Medical Sciences, Guangzhou 510120,P.R. China

　　【Abstract】 Objective：To study the influence of preoperative radioimmunotherapy and chemotherapy (or targeting chemotherapy) on neoplsatic cells of colorectal carcinoma (CRC).Methods：Sixty-three patients were divided into five groups.Group A (16 cases) had been injected with anti-CEA monoclonal antibody,C50-¹³¹I conjugates with mitomycin C,at tumor location for preoperative radioimmunotherapy.Group B (10 cases) had been injected with ¹³¹I at tumor location before operation.Group C (7 cases) had received preoperative i.v. mitomycin for chemotherapy. Group D (13 cases) had recived preoperative i.v. targeting chemotherapy with CEA-mitomycin. Group E (17 patients) had not received any preoperative anti-tumor medication. The tumors of all patients were resected. The resected specimens were assessed by histologic examination.Results：In group A,there were 2 cases in 1st grade,10 cases in 2nd grade and 4 cases in 3rd grade necrosis of tumor tissue.In group B,6 cases in 1st grade, 4 cases in 2nd grade and no cases in 3rd grade necrosis.In group C,2 cases in 1st grade,5 cases in 2nd grade necrosis.In group D, 2 in 1st grade,7 in 2nd and 4 in 3rd grade necrosis.But in group E,all resected tumor tissues of 17 patients were in 1st grade necrosis.Conclusion：① Preoperative radioimmunotherapy,chemotherapy (or tageting chemotherapy) and preoperative injection of radioisotope ¹³¹I could cause necrosis of tumor tissue.② It was considered to be useful using preoperative treatment to colorectal carcinoma.

　　Key words：Colorectal neoplasms;Radioimmunotherapy;Mitomycin C;Necrosis

　　大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，手术治疗仍是最可靠且有效的治疗方法。为了提高患者手术切除成功率，降低术后复发，有学者提倡肿瘤术前使用放疗、化疗及免疫治疗。为了研究大肠癌术前治疗对肿瘤的影响，对术前肿瘤局部注射¹³¹I-抗CEA单抗、局部注射¹³¹I、静脉注射化疗药物、注射单抗与化疗药物的偶连物以及术前不进行治疗的患者进行大肠癌手术切除，并切取肿瘤组织标本进行组织学检查，现将结果报道如下：

　　1　临床资料与方法

　　1.1　一般资料

　　本组大肠癌患者63例，男36例，女27例。年龄25～85岁，平均年龄57.2岁。所有病例均经手术及病理证实，病理均为腺癌。

　　1.2　方法

　　1.2.1　分组及治疗方案：按治疗方案随机分成A、B、C、D、E组：A组16例，术前大肠癌肿瘤局部及周围注射¹³¹I-抗CEA单抗C50（含¹³¹I370MBq,C502mg）,注射前5-7天,每天口服Lugul's液10滴/次,3次/天,注射抗体前静滴地塞米松5mg；B组10例，术前大肠癌肿瘤局部及周围注射¹³¹I370MBq,注射前口服Lugul's液同A组；C组7例，术前静脉注射化疗药物丝裂霉素C(MMC)8mg；D组13例，术前静脉注射丝霉素C与抗CEA单抗偶联物(含MMC8mg，C5010mg,注射前静滴地塞米松5mg)；E组17例，术前不进行上述治疗。其中A、B、C、D4组均在注射药物后3天行手术治疗并切取病理标本。

　　肿瘤局部注射方法每一肿块均取其中心及四周共5个注射点，每点注射0.4～0.5ml药物,位置较低的直肠癌采用肛窥下直接注射,位置较高的直肠癌及结肠癌则在B超或纤维结肠镜引导下注射。

　　1.2.2　¹³¹I-C50的制备：按改良氯胺T法制备,取C50(无锡第二制药厂提供)2mg/0.5ml,加入Na¹³¹I(北京原子能研究所提供)370MBq/0.5ml后迅速喷注新鲜配制的氯胺T1mg/0.5ml,室温下反应2分钟,注入酪氨酸0.5mg/0.5ml终止反应。

　　1.2.3　C50-MMC的制备：取葡聚糖1.0g，加200ml蒸馏水后加高碘酸钠0.33g，室温避光反应过夜，透析后冻干；注射前二天取上述冻干品10mg加0.15mol/L磷酸缓冲液2ml，再加MMC(日本Kyowa公司提供)8mg，反应24小时后加已纯化的C5010mg，4℃下搅拌反应24小时；注射前再加硼氢化钠0.25mg,4℃下还原2小时，离心后过柱收集首峰。

　　1.2.4　病理检查：病理组织行HE染色。观察癌细胞变性、溶解、坏死的程度和数量，将癌细胞的形态变化分3级(参照大星章一标准)。1级：癌细胞变化不明显或有轻度细胞肿胀，散在性癌细胞核固缩、碎裂，范围小于切片的1/4；2级：癌细胞明显肿胀，空泡变性，出现较多核固缩、碎裂，范围占切片的1/4～1/2或许多癌腔内有较多的坏死物，可存在小片状坏死，范围在切片的1/4内；3级：大部分癌细胞高度变性，多数细胞出现核固缩、碎裂，有大片凝固坏死和多处小片状坏死，范围超过切片的1/4，或癌巢全部崩解和消失，仅残存小量癌细胞甚至无癌细胞存在。将病理退变1级视为无效；2级与3级为有效。

　　1.2.5　统计学处理：病理退变程度差异以治疗无效与治疗有效列表,四格表确切概率法检验。

　　2　结果

　　病理退变程度：A组16例中病理退变1级2例,2级10例,3级4例；B组10例中1级6例,2级4例；C组7例中1级2例，2级5例；D组13例中1级2例,2级7例,3级4例；E组17例均为1级,见表1。

表1　　　4组患者病理退变程度情况

　　a组与E组、C组与E组、D组与E组之间(P=0.000)P＜0.001；A组与B组(P="0.026)、"B组与D组(P="0.039)、"B组与E组(P="0.012)之"间P＜0.05；A组与C组(P="0.858)、"A组与D组(P="1.000)、"B组与C组(P="0.232)、"C组与D组(P="0.580)之"间P＞0.05.3　讨论

　　大肠癌治疗主要采用综合治疗，而手术治疗仍是首选方法。由于大肠癌早期诊断相对困难，许多患者明确诊断时已存在广泛肿瘤浸润或转移，使手术切除机会降低，导致大肠癌治疗效果不理想。为了提高手术切除率，提高手术疗效，医学工作者进行了长期探索。Furuta认为术前化疗、放疗加热疗有利于大肠癌的手术切除^〔1〕。

　　单克隆抗体自问世以来就被应用于大肠癌的诊断和治疗。使用抗CEA单抗进行放免显像进行大肠癌诊断已有报道^〔2〕，抗CEA单抗C50与大肠癌肿瘤组织进行免疫组织化学染色，阳性率达90％以上^〔3〕，在放免显像中也发现C50具有良好定位大肠癌的能力^〔2〕，对肿瘤原发灶及转移灶均能定位。Takahashi^〔4〕对结肠癌患者行化疗药物与单抗交联导向治疗,认为MMC与单抗交联后能保持抗体活性，交联物的细胞毒性明显比单独使用MMC强；Blumenthel^〔5〕认为放免治疗与各种化疗比较，疗效更佳。本研究中，通过常规HE染色发现,术前治疗(包括局部注射¹³¹I-C50，¹³¹I以及静脉注射MMC或C50-MMC)的患者,均有病例出现明显的肿瘤细胞病理退变(包括病理退变2级及3级),主要包括：癌细胞变性、核固缩、核碎裂、核内出现空泡；癌组织坏死，癌巢崩解或消失。而术前未进行治疗的患者病理退变程度均为1级。通过统计学检验，有显著性差异，说明术前治疗对肿瘤组织坏死有促进作用。

　　在术前治疗的不同方法中，局部注射¹³¹I-C50对肿瘤细胞的影响最明显，有效率达87％，其次为静脉注射C50-MMC，有效率达84.7％,有4例达到3级；静脉注射MMC组有效率为71.4％，但无1例达到3级；局部注射¹³¹I有效率为40％，且退变无1例达3级。我们认为：5点法局部注射¹³¹I-C50后，¹³¹I-C50能在肿瘤组织中通过组织弥散，淋巴系统扩散，使¹³¹I-C50能比较均匀地分布于肿瘤组织中，同时由于C50能与癌胚抗原特异性结合，使¹³¹I-C50较多停留在肿瘤局部，而¹³¹I放出的β射线对肿瘤细胞有杀伤作用和/或单克隆抗体对大肠癌有免疫毒作用，使癌细胞损伤，导致肿瘤坏死；局部注射¹³¹I后，虽然¹³¹I也能放射β射线使癌细胞损伤，但由于¹³¹I可以通过组织弥散或淋巴系统吸收进入血液循环，使局部¹³¹I的量减少，对癌细胞的损伤明显减弱；静脉注射C50-MMC后通过血液循环复合物进入肿瘤组织，C50能与肿瘤组织特异性结合，使C50-MMC停留在肿瘤局部增多，通过MMC和C50对肿瘤细胞的细胞毒作用和免疫毒作用使肿瘤细胞损伤，导致肿瘤组织坏死；而静脉注射MMC通过血液循环进入肿瘤组织后，MMC也能较多地分布于肿瘤组织中，通过MMC对肿瘤细胞的细胞毒作用也能引起肿瘤细胞损伤，导致肿瘤组织坏死，但与静注C50-MMC比较，由于停留于肿瘤局部的量相对较少且没有C50发挥的免疫毒作用，因此效果也不如静脉注射C50-MMC明显。

　　我们认为：术前肿瘤局部注射¹³¹I-C50、静注C50-MMC或MMC均可导致大肠癌细胞损伤，促进癌组织坏死，对大肠癌手术治疗有利。但由于化疗药物副作用较明显，而局部注射¹³¹I标记的单抗所用放射性核素及单抗的量较少，对患者无明显副作用，且疗效明显，值得进一步深入研究，以寻找最佳的术前治疗剂量及时间，力求达到更佳效果。

　　〔参考文献〕

　　〔1〕　Furuta K,Konishi F,Kanazawa K,et al. Synergistic effects of hyperthermia in preoperative radiochemotherapy for rectal carcinoma〔J〕. Dis Colon Rectum,1997,40(11)：1303～1312.

　　〔2〕　卢献平,吕斌,颜登国,等.^99mTc-C50肠癌放免显像的初步临床应用〔J〕.中华核医学杂志，1995,15(4)：208～210

　　〔3〕　卢献平,吕斌,蒋宁一,等.影响^99mTc-抗CEA单克隆抗体肠癌放免显像的因素研究〔J〕.核技术，1996,19(5)：281～284.

　　〔4〕　Takahashi T,Yamaguchi T,Kitamura K,et al. Follow-up study of patients treated with monoclonal antibody-drug conjugate：report of 77 cases with colorectal cancer〔J〕. Jpn J Cancer Res, 1993，84(9)：976～981.

　　〔5〕　Blumenthal RD,Sharkey RM,Haywood L,et al. Targeted therapy of athymic mice bearing GW-39 human colonic cancer micrometastases with ¹³¹I-labelled monoclonal antibodies〔J〕. Cancer Res,1992,52：6036～6044.

收稿日期：1998-12-16；修回日期：1999-01-29