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肺癌患者支气管肺泡灌洗液中脱落细胞p21、p185表达的研究

肺癌患者支气管肺泡灌洗液中脱落细胞p21、p185表达的研究

肿瘤 1999年第1期第19卷 短篇报道

作者:黄 怡 赵立军 刘忠令 倪灿荣 刘 昀

单位:上海第二军医大学长海医院呼吸内科(上海 200433)

  本研究采用疑诊肺癌病支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中脱落细胞为对象,通过免疫组化技术,研究各种类型肺癌中脱落细胞的p21、p185的表达情况,现报告如下:

  材料和方法

  一、研究对象

  对34例疑诊为肺癌的病作纤支镜BAL检查,最后确诊为肺癌26例,男17例,女9例,年龄35~76岁,平均59.1岁。其中NSCLC 25例(腺癌13例、鳞癌12例),SCLC 1例,非肺癌8例。25例NSCLC分期均采用1989年国际抗癌联盟(UICC)分期标准。

  二、方法

  所有病均作纤支镜检查,在相应部位作BAL、刷检和/或活检。BALF离心后收集细胞成份涂片3~4张,分别作HE染色和p21[Pan-ras(oncor USA 1:50)]、p185[Dako丹麦(1:100)]免疫组化染色(ABC法)。每次染色均设阴性空白对照和阳性对照。统计学处理采用χ2检验。

  结  果 一、纤支镜检查不同取材方法的诊断阳性率见表1。

表1 纤支镜检查不同取材方法的诊断阳性率

  检 测 方 法 阳性例数/总数 阳性率
刷检 16/26 61.5% 
活检 14/25 56.0% 
BALF脱落细胞    
 HE染色 9/26 34.6% 
 p21、p185免疫组化染色 8/26 30.8%

  *P<0.05,与刷检比较  除刷检阳性率高于BAL癌基因检测外(P<0.05),余相互之间阳性率相差不显著。有1例周围型肺癌,未作活检,刷检阴性,BALF脱落细胞找到可疑恶性细胞,而p21、p185染色阳性,后经手术病理证实为腺癌。余25例刷检或活检阳性者中有7例p21、p185染色阳性。

  二、BALF脱落细胞p21、p185检出情况见表2。

表2 BALF脱落细胞p21、p185检出情况

疾病分类 总例数 p21 p185
阳性例数 阳性率 阳性例数 阳性率
NSCLC 25 7 28.0% 3 12.0%
  腺癌 13 4 30.8% 3 23.1%
  鳞癌 12 3 25.0% 0 0
SLCL  1 0 0 0 0
非肿瘤  8 0 0 0 0

  三、BALF脱落细胞p21、p185免疫组化结果与NSCLC中TNM分期及临床分期的关系 TNM分期中No-1与N2-3比较,p21、p185阳性差异具有显著性意义(P<0.05)。临床分期Ⅲb和Ⅳ期p21表达阳性率(55.6%)高于Ⅰ-Ⅲa期(12.5%),具有显著性意义(P<0.05),其他均未见显著性差异。

  讨  论

  Pinkham等[1]对支气管冲洗液中ras、myc、fos的表达进行了研究,认为冲洗液中癌基因的表达,可能成为诊断肺癌的标记物。Mills等[2-4]用PCR技术对BALF中k-ras突变进行了研究,认为该检查对NSCLC,尤其是腺癌具有诊断价值,其敏感性高于常规细胞学和病理学检测。

  本研究对疑诊为肺癌的患者分别作纤支镜刷检、活检及BAL脱落细胞HE染色和ras、c-erb B2癌基因免疫组化染色,结果发现其阳性率分别为61.5%、56.0%、34.6%和30.8%,除刷检阳性率高于BLA癌基因检测外,余检查相互之间阳性率相差不显著。虽然BAL癌基因检测阳性率低于刷检及活检,但有1例周围型肺癌,因纤支镜无法直视,未作活检、刷检阴性,BLAF脱落细胞HE染色找到可疑恶性细胞,而p21、p185染色阳性,后经手术证实为腺癌,提示对BALF脱落细胞作癌基因检测可提高对纤支镜不能直视的周围型肺癌的诊断阳性率。

  本研究发现p21、p185在NSCLC患者BALF脱落细胞中的表达阳性率分别为28.0%和12.0%,在SCLC和非肿瘤患者中未见表达。p21阳性的NSCLC倾向于淋巴结转移,Ⅲb期和Ⅳ期NSCLC中p21表达阳性率(55.6%),高于Ⅰ-Ⅲa期(12.5%)(P<0.05),p21表达与NSCLC的临床分期有关。提示对BALF中脱落细胞ras、c-erb B2表达的检测,有助于肺癌的鉴别诊断,非手术临床分期的判断和评估肺癌患者的预后。第一作者简介 黄 怡,女,博士,主治医师、讲师。

  参 考 文 献

  1 Pinkham JM,Strange RC,Pantin C.Examination of bronchoalveolar wash fluid for ras,myc and fos oncoproteins and glutathione S-transferase isoenzymes:an attempt to improve the accuracy of lung cancer diagnosis.Clin Chim Acta,1994,277(1~2):211

  2 Mills NE,Fishman CL,Scholes J,et al.Detection of K-ras oncogene mutation in bronchoalveolar lavage fluid for lung cancer diagnosis.J Natl Cancer Inst,1995,87(14):1056

  3 Lehman TA.Scott F,Seddon M,et al.Detection of K-ras oncogene mutations by polymerase chain reaction~based ligase chain reaction.Anal Biochem,1996,239(2):153

  4 Jacobson DR,Fishman CL,Mills NE.Molecular genetic tumor markers in the early diagnosis and screening for non-small-cell lung cancer.Ann Oncol,1995,6(s3):3

(收稿1998-01-07 修回:1998-04-09)


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