Fas配体在膀胱癌中的表达及意义

中华泌尿外科杂志 2000年第3期第21卷 论著

作者：高宁　齐琳　齐范　曾庆富　蒋海鹰

单位：高宁　齐琳　齐范（长沙，湖南医科大学附属湘雅医院泌尿外科　410008）；曾庆富　蒋海鹰（湖南医科大学病理教研室）

　　关键词： 膀胱肿瘤；癌；Fas 配体；预后

　　摘　要：目的　探讨肿瘤免疫逃避与膀胱癌发生、侵袭及复发的关系。方法　采用SABC免疫组化法检测14例膀胱腺癌(AC)，34例移行细胞癌(TCC)及10例慢性单纯性膀胱炎(SCC)石蜡切片中Fas配体(FasL)的表达情况。结果　SCC中FasL无表达；AC8例表达、TCC20例明显表达，且与组织类型无关；FasL的表达与临床分期及复发密切相关(P＜0.05) ，而与TCC的病理分级关系不密切(P＞0.1)。结论　FasL的异常表达参与了膀胱TCC的发展与复发，并影响其预后；FasL的表达异常与膀胱癌组织类型及病理分级关系不密切，其所致的肿瘤免疫逃避作用可能是恶性肿瘤发展的基本原因之一。

Expression of Fas ligand in bladder neoplasms

GAO Ning（Department of Urology, Xiang Ya Hospital, Hunan Medical University,

　　changsha 410008,China）

　　qI Lin（Department of Urology, Xiang Ya Hospital, Hunan Medical University,

　　changsha 410008,China）

　　qI Fan（Department of Urology, Xiang Ya Hospital, Hunan Medical University,

　　changsha 410008,China）

　　Abstract：Objective　To clarify the relationship between tumor escape and the progression of bladder carcinomas.Methods　Fas ligand expression was studied by means of immunohistochemical method in 10 cases of cystitis, 14 bladder adeno-carcinomas and in 34 bladder transitional cell carcinomas.Results　None of the cystitis samples had FasL expression. The expression of FasL in AC and tCC were both signi-ficantly increased (P＜0.05) and correlated with TCC stage(P＜0.05) and recurrence (P＜0.02), but not related to the tumor grade(P＞0.1).Conclusions　FasL might play an important role in the progression of bladder neoplasm. Tumor escape induced by FasL might be one of the basic reasons in progression of neoplasm.

　　Key words：Bladder neoplasms　Carcinoma　Fas ligand　Prognosis▲

　　Fas配体(FasL)是一种细胞凋亡因子，Fas为FasL的受体（即死亡受体）。FasL与细胞表面的Fas结合，可引起Fas表达阳性的细胞凋亡，参与了肿瘤的发生、发展^［1-3］。有人认为FasL在肿瘤免疫逃避中的作用更大^［1，4］。为了解FasL与膀胱癌发生、发展及复发的关系，我们应用免疫组织化学方法，研究了慢性单纯性膀胱炎(SCC)、膀胱腺癌(AC)、膀胱移行细胞癌(TCC)组织中FasL的表达情况。

　　材料和方法

　　一、一般资料

　　58例标本均选自我院1991～1998年确诊病例。SCC　10例，男7例，女3例；年龄44～68岁，平均53岁。AC　14例，男11例，女3例；年龄33～69岁，平均57岁。TCC34例，其中原发性移行细胞癌(PTCC)18例，男14例，女4例；年龄33～69岁，平均55岁。WHO分级:G₁7例、G₂ 5例、G₃ 6例；UICC分类:T₁ 7例、T₂～T₄11例。复发性移行细胞癌(RTCC)16例，男14例，女2例；年龄40～77岁，平均58岁。WHO分级:G₁4例、G₂ 7例、G₃ 5例；UICC分类:T₁ 6例、T₂～T₄10例。标本均由10%福尔马林液固定，常规石蜡包埋存档。

　　二、试剂与方法

　　采用SABC免疫组织化学染色方法，FasL SABC免疫组织化学染色试剂盒购自武汉博士德公司，其中一抗:多克隆兔抗FasL蛋白抗体为美国Sants cruz公司产品。显微镜下观察并照相。胞膜和(或)胞浆染成棕黄色的细胞超过切片中细胞总数的10%为阳性。统计学处理采用χ²检验及四格表的确切概率法。

　　结　　果

　　SCC10例均无FasL表达。AC14例中8例FasL阳性表达(57%，图1)；34例TCC中20例阳性表达(59%，图2)。FasL表达在TCC或AC与慢性炎症之间差异有显著性(P均＜0.02)，而在AC与TCC之间差异无显著性（P＞0.1）。在34例TCC标本中:11例G₁者中5例FasL阳性表达(46%)，12例G₂者中9例阳性表达(75%)，11例G₃者中6例阳性表达(55%)；各级TCC中FasL的表达差异无显著性(P＞0.05)。13例T₁者中4例FasL阳性表达(39%)，21例T₂～T₄者中16例阳性表达(76%)，T₂～T₄ tCC FasL的表达明显高于T₁ TCC，差异有显著性(P＜0.05)。在16例RTCC者中13例FasL阳性表达(81%)，18例TCC者中5例阳性表达(39%)，两组间差异有显著性(P＜0.02)。

图1　AC中FasL胞浆、胞膜染色阳性

图2　TCC中Fasl胞浆、胞膜染色阳性

　　讨　　论

　　随着肿瘤研究的深入进展，肿瘤的免疫逃避引起越来越广泛的关注，它与肿瘤细胞在体内的发生、发展有关^［1］。目前认为：肿瘤细胞不但抑制本身的细胞凋亡，而且能主动杀死靠近它们的免疫活性细胞，从而逃避了机体对肿瘤的清除并存活下来^［5］，肿瘤细胞通过其细胞表面的Fas及FasL来实现这一作用。Fas为I型跨膜蛋白，属肿瘤坏死因子受体(TNFR)及神经生长因子受体(NGFR)家族成员，Fas广泛存在于多种类型的细胞膜上；FasL为Ⅱ型跨膜糖蛋白，属TNF家族成员，FasL主要表达于活性T淋巴细胞^［4］、NK细胞及LAK细胞等免疫细胞的细胞膜上，此外在免疫豁免组织(脑、睾丸、眼)的细胞膜上也有FasL的天然表达^［6，7］。FasL是一种细胞凋亡因子，为Fas的配体，当其与细胞表面的Fas结合后可激活细胞内凋亡信号，引起Fas阳性细胞的凋亡^［2］。

　　活性T细胞及NK 细胞通过利用Fas/FasL系统介导的细胞凋亡作用，清除体内的病毒感染细胞、异体移植物、衰老的单核细胞、中性粒细胞以及部分激活的T、B细胞来发挥细胞免疫、维持免疫平衡及调节免疫反应等重要作用。在免疫豁免组织中，由于这些组织的细胞膜上FasL表达，可导致邻近的活性T淋巴细胞凋亡，使这些部位免受炎症侵害^［7］，从而起到免疫豁免作用。由此可见，通过Fas/FasL系统介导Fas阳性的细胞凋亡不仅可由活性T细胞引起，表达FasL的细胞同样可以引起Fas阳性的活性T细胞凋亡，以达到免疫下调作用。研究发现，许多恶性肿瘤细胞膜上Fas表达明显下调，而FasL表达增高^{［1，5，8，9］}，这与免疫豁免组织中表现一致，认为这些恶性肿瘤在机体内类似于免疫豁免组织，使机体对肿瘤的免疫作用下调，从而逃避了机体对肿瘤细胞的免疫清除。亦有学者认为在肿瘤的免疫逃避过程中起关键性作用的是FasL表达增高而不是Fas表达下调^［1，4］。

　　我们检测了FasL在膀胱炎以及膀胱癌不同组织类型、病理分级、临床分期以及复发性TCC中的表达情况。结果发现SCC中并无FasL表达，而在膀胱AC及TCC中FasL有明显的表达，且随着癌浸润深度增加，其表达增强，进一步证实膀胱癌的发展与Fas/FasL系统诱导的细胞凋亡有关。其机理可能是因为癌细胞膜上表达的FasL主动攻击与其邻近的CTL及NK细胞，导致这些免疫细胞凋亡而癌细胞逃避了CTL及NK细胞对其的免疫杀伤，从而使癌细胞存活，积聚，发展。在AC与TCC中FasL的表达差异无显著性，提示FasL在恶性肿瘤中的表达无组织特异性，说明Fas/FasL系统导致的免疫逃避作用是恶性肿瘤发展的基本原因之一。

　　FasL 在不同病理分级TCC细胞中的表达差异无显著性，提示FasL与膀胱TCC的细胞分化程度无明显关系，可能因为FasL基因不参与膀胱TCC的细胞转化过程，但是，一旦细胞发生恶变，则可通过恶变细胞中FasL的高表达引起膀胱癌的浸润和发展。有研究发现:肿瘤细胞上的FasL可释放到血清中，杀伤循环中的免疫活性细胞，引起机体的基础免疫下降，并且还能引起肝功能损害等，造成肿瘤患者的全身中毒反应及多器官功能衰竭，从而严重影响了患者的预后^［1，10］。本研究还发现RTCC中FasL的表达显著高于TCC，提示FasL的高表达在TCC复发中起重要作用，可能与上述的机体全身免疫下降以及肿瘤局部的免疫逃避有关。故临床上常应用卡介苗等免疫剂来增强机体全身和局部免疫，并取得了一定的效果。

　　本研究显示:(1)FasL在膀胱癌细胞中的表达增高，其异常表达参与了膀胱TCC的发展与复发，并影响其预后；(2)FasL的表达与膀胱癌组织类型及病理分级关系不密切，其所致的肿瘤免疫逃避作用可能是恶性肿瘤发展的基本方式之一。■

　　参考文献：

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收稿日期：1999-06-24