P-糖蛋白与ER、PR在乳腺癌中的表达及意义
癌症 1999年第2期第18卷 基础研究
作者：蒋光愉 钟雪云 廖剑辉 李红
单位：蒋光愉 李红 广州暨南大学医学院第一附属医院病理科(广州，510632)；钟雪云 廖剑辉 广州暨南大学医学院病理解剖教研室
关键词：乳腺肿瘤；耐药基因P-gP；雌激素受体；孕激素受体
【摘要】目的：探讨耐药基因P-糖蛋白(P-gP)在乳腺癌的表达，以及与组织学类型、淋巴结转移、ER和PR之间的相互关系，为乳腺癌的优化化疗，预测预后提供有用的指标。方法：应用免疫组化检测37例乳腺癌和10例非癌病变的P-gP、ER、PR。结果：ER、PR的阳性率分别为43.24％和40.54％，P-gP的表达率为70％，27例P-gP阳性病例中有50％左右ER和PR同时表达。结论：乳腺癌是耐药基因P-gP高表达肿瘤，P-gP与组织学类型、淋巴结转移之间无相互关系，与ER、PR有关，提示乳腺癌的化疗若辅于性激素治疗，疗效可能更好。
中图号：R737.9 文献标识码：A 文章编号：1000－467X(1999)02－0169－03
Expression and its singnificance of MDR,estrogen receptor
and progesterone receptor in breast cancer
JIANG Guang-yu1 ZHONG Xue-yun2 LIAO Jian-hui2,et al.
1.Dept.of Clinical Pathol.,First Affiliated Hospital
2.Dept.of Pathol.,Jinan University medical College,Guangzhou 510632,China
【Abstract】Puepose： To reveal the correspondence between the expression of multidrug resistance(MDR)gene and estrogen receptor(ER)and progesterone receptor(PR)in breast cancer.Materials and Methods：： The immunohistochemical way LSAB was employed to estimated the MDR,expressed as P-glycoprotein(P-gP),ER and PR of surgically dissected tissue in 37 cases of breast cancer and 10 cases of benign breast disorders.Results：： P-gP positive was obtained in 27 cases(70.27％)Er positive as in 16 cases(43.24％) and PR positive was found in 15 cases(40.54％) of 37 breast cancers.Out of 27 P-gP positive cases,13(48.15)were ER positive and 14(51.85％) PR positive.Conclusions：： Breast cancer reveals high expression of MDR gene with a phenomenos of parallel to the expression of ER and PR simultaneously.The result of the study offers a positive evidence for the current strategy of the management of breast cancer,i.e.,the combination of chemotherapy and endocrine therapy in most occasion.
Key words： Multidrug resistanc(MDR)gene;Estrogen receptor(ER);Progesterogen receptor(PR);Breast cancer
多药耐药(Multidrug Resistance, MDR)是恶性肿瘤化疗失败的主要原因之一[1～3]。研究表明肿瘤产生内在抗药性的主要机制是细胞膜过度表达P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gP)[4]。而P-gP与乳腺癌的关系，P-gP与雌激素受体(Estrogenreceptor ER)和孕激素受体(progesterogenreceptor PR)的相关性尚未完全阐明。本文通过对37例乳腺癌进行了P-gP，ER和PR的检测，探讨其相互关系并分析其与乳腺癌组织学类型、淋巴结转移的相关性。
1 材料与方法
1.1 材料
收集我院1994年至1997年外科手术切除的乳腺癌标本37例，年龄为28～70岁，术前均未作化疗。在肿瘤组织和周围乳腺组织各取一块标本，另收集10例乳腺瘤样病变作为对照组。10％ Formalin固定，石蜡包埋，连续切片厚4μm，作HE染色。根据1983年全国乳腺癌专业会议制定的病理分类分为：浸润性非特殊型癌(30例)、浸润性特殊型癌(7例)[7]，前者包括浸润性导管癌(图1)、浸润性小叶癌、单纯癌、不典型髓样癌等，后者包括粘液腺癌2例，乳头状癌3例，派杰氏病1例、小管癌1例。本组中无淋巴结转移者25例，有淋巴结转移者12例。
图1 乳腺浸润性导管癌HE×20
1.2 免疫组化染色
1.2.1 试剂：P-gP鼠抗试剂购自国际免疫技术公司(法国)，工作浓度为1∶20。ER试剂购自DOKA公司，工作浓度为1∶50。PR试剂购自福建迈新生物试剂公司，为便用型。第二、三抗体均购自DOKA公司。
1.2.2 免疫组化法：采用LSAB法，染色步骤按常规免疫组化方法进行，DAB显色，苏木素复染，光镜检查。
1.2.3 判断标准：P-gP抗体胞膜和胞浆出现棕黄色颗粒为染色阳性，分为阳性(＋)，阴性(－)。ER、PR阳性定位在细胞核内(图2)，阳性细胞＞20％为阳性病例。
图2 乳腺，ER阳性定位于细胞核内LSAB×20
1.3 统计学方法
所有数据用t检验
2 结果
2.1 P-gP在乳腺癌和非癌组织中的表达
癌组织经P-gP免疫染色，阳性细胞内见棕褐色细颗粒，定位于胞膜和胞浆，以胞浆为主(图3)，呈灶性或弥漫性分布。37例癌组织中阳性表达率高达7027％(27/37)；10例非癌对照组中，阳性颗粒在胞浆内，略靠基底部，为浅黄色(＋)，阳性表达率为40％(4/10)，两者之间在统计学上有非常显著性差异(P＜0.01)。
图3 乳腺浸润性导管癌，MDR阳性定位于细胞浆(＋＋＋)LSAB×20
2.2 P-gP表达与组织学类型的关系
乳腺癌组织中的不同组织学类型的P-gP表达在浸润性非特殊型癌中表达率为76.67％(23/30)，在浸润性特殊型癌中表达率为42.85％(3/7)，有2例粘液腺癌P-gP为阴性。
2.3 P-gP表达与淋巴结的关系
将37例乳腺癌分为有淋巴结转移和无淋巴结转移两组，均有50％以上的高表达，两组之间在统计学上无显著性意义(P＞0.05)，详见表1。
表1 P-gP表达与淋巴结转移的关系
| 组别 |
n |
P-gP表达 |
阳性率(％) |
P值 |
| ＋ |
－ |
| 无淋巴结转移 |
25 |
19 |
6 |
76.00 |
＞0.05 |
| 有淋巴结转移 |
12 |
7 |
5 |
58.33 |
2.4 P-gP表达与ER、PR的关系
37例乳腺癌中，ER阳性率为43.24％(16/37)；PR阳性率为40.54％(15/37)；ER、PR同时阳性病例为27.03％(10/37)，详见表2。
表2 P-gP与ER、PR阳性表达关系
| P-gPn |
n |
ER |
阳性率
％ |
PR |
阳性率
％ |
P值 |
| ＋ |
- |
＋ |
- |
| 阳性 |
27 |
13 |
14 |
48.15 |
14 |
13 |
51.85 |
＞0.05 |
| 阴性 |
10 |
3 |
7 |
30.00 |
1 |
9 |
10.00 |
＜0.05 |
由表中可见P-gP阳性的27例病例中ER、PR的阳性表达在50％左右，它们之间的关系在统计学上无显著性意义(P＞0.05)；P-gP阴性的10例病例中ER、PR的阳性率为30％和10％，在统计学上有显著性差异(P＜0.05)，即表明ER、PR阳性，P-gP阳性表达高，ER、PR阴性病例，P-gP阳性表达较低。3 讨论
药物耐受是影响肿瘤化疗的最大障碍，有些肿瘤一开始就对化疗药物产生耐药性，有些则是用化疗药后诱导产生，两者都有相同的生物学基础。P-gP作为能量依赖性药物排出泵在介导肿瘤MDR中起作用，已为许多研究所证实[1～3]。本组研究发现，P-gP在癌组织阳性率高达70.27％，说明乳腺癌是P-gP高表达的肿瘤，与文献报道相一致[1]。我们实验中还可看到P-gP的表达强度有差异，个别病例标本显示强阳性，但大部分标本显弱阳性，因此仅判断阳性和阴性即可。本研究结果表明，P-gP的表达与癌组织学类型的关系，从总体上说，非特殊型与特殊型有差异。但在特殊型除去粘液腺癌，则两者间无明显差异。有些文献资料表明，乳腺粘液癌ER、PR和MDR表达与其生物学行为不一致。P-gP表达与淋巴结转移无关。
乳腺癌的发生、发展与激素有密切关系，临床实践已证实受体含量越高，对激素的依赖性越高，内分泌治疗效果越好。目前已把ER、PR的检测作为观察乳腺癌的治疗和预后的重要指标之一，并已应用于临床，尤其研究P-gP与ER-PR之间的相互关系更为必要。本结果显示：37例病例ER、PR阳性率分别为43.24％和40.54％，较文献的66.7％阳性率低[4]，究其原因是判断阳性细胞的标准不同所致。10例P-gP阴性病例中，ER、PR的阳性表达分别为30％和10％，表明P-gP阴性者其激素受体的表达也低，对化疗相对敏感。值得注意的是，在27例P-gP阳性病例中，仍有50％左右的ER、PR呈阳性表达，它们之间虽然无统计学上的意义，但乳腺癌是一种MDR高表达的肿瘤。文献报道在40例乳腺癌的研究中，发现P-gP表达多见于那些对化疗极少起反应的肿瘤[5]，乳腺癌中P-gP阳性病例对化疗不太敏感[6]。因此我们认为，在同一病例中，即有ER、PR阳性表达，又有P-gP的阳性表达，其预后比ER、PR阴性而P-gP阳性要好，同时提示乳腺癌的化疗必须优化治疗方案，辅助内分泌激素治疗；或用一些钙通道阻断剂，或免疫抑制剂，以逆转MDR表型，抑制P-gP的膜原作用，增加癌细胞内抗癌药物的浓度，以提高化疗效果。
基金项目：广东省科委重点攻关课题与广东省卫生系统“五个一科教兴医工程”重点课题资助。
参考文献
1 Goldstein LJ,Galski H,Fojo AT,et al.Expression of multidrug. resistance gene in human cancers〔J〕. J Natl Cancer Inst, 1989,81:116.
2 Ling V. P-glycoprotein and resistance to anticancer drugs 〔J〕.Cancer,1992,60:2062.
3 杨纯正.肿瘤细胞耐药基因研究进展〔J〕.中国肿瘤，1996，5：(7)134.
4 孙晓东，钟雪云.肿瘤的多药耐药〔J〕.肿瘤防治研究，1997，24(4):255.
5 柳亚美,王文娜,付晓四，等.耐药基因及雌孕激素受体在乳腺癌中的表达及意义〔J〕.浙江肿瘤，1996，2(4)：223.
6 吴名耀，沈健，吴贤英.P-糖蛋白在食道癌中的表达及其临床意义〔J〕.临床与实验病理学杂志，1997，13(2)：20.
7 阚秀编著.乳腺癌临床病理学〔M〕.第一版，北京：北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社出版，1993：63.
收稿日期：1998－03－19；修回日期：1998－10－26
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