乳腺癌患者白介素6及其受体的测定和临床意义

中华肿瘤杂志 1998年第4期第0卷 临床研究

作者：匡玉庭　张志德　张学光　刘俊恒　顾永平

单位：215006 苏州，苏州医学院附属第一医院普外科(匡玉庭、张志德)；苏州医学院免疫中心(张学光、刘俊恒)，病理教研室(顾永平)

　　关键词： 乳腺肿瘤；白细胞介素6/分析；受体，白细胞介素6/分析；酶联免疫吸附测定；免疫组织化学

　　【摘要】　目的　研究白介素6(IL-6)及其受体与乳腺癌的发生、发展关系。方法　应用ELISA检测法及ABC免疫组化法测定45例乳腺癌、10例良性乳腺病IL-6及其受体水平，并以17例健康妇女为对照。结果　乳腺癌外周血清IL-6、可溶性受体(sIL-6Rα、sgp130)水平明显高于良性病组及正常对照组，且随病情进展而升高，与腋窝淋巴结转移呈正相关。标本中癌组织IL-6及其膜性受体(IL-6Rα、gp130)阳性表达率均为68.9%，与临床特征无关，良性组织及正常组织中三者阳性率均为100%。结论　提示IL-6、sIL-6Rα和sgp130可能是反映乳腺癌生物学行为及预后的重要指标。

　　Interleukin-6 and its soluble receptors in human breast cancer　　Kuang Yuting, Zhang Zhide, Zhang xueguang, et al. Surgery Department, The First Affiliated Hospital, Suzhou Medical College, Suzhou 215006

　　【Abstract】　Objective　To study interleukin-6(IL-6) and its receptors in human breast cancer.Methods　Using ELISA method and ABC immunohistochemistry, IL-6 and its receptors were examined in 45 cases of breast cancer, 10 cases of benign breast diseases and 17 cases of healthy women.Results　High levels of serum IL-6 and its soluble receptors were frequently observed in breast cancer patients. The levels correlated with the stage and axillary lymph node involvement. The positive staining of IL-6、IL-6Rα、gp130 were 68.9% in neoplasm tissue.Conclusion　IL-6 and its soluble receptors may be important paramenters reflecting the biological behaviour and prognosis of breast cancer.

　　【Subject words】　Breast neoplasms　　Interleukin-6/analysis　　Receptors, interleukin-6/analysisEnzyme-linked immunsorbent assay　　Immunohistochemistry

　　应用双抗体夹心ELISA检测试剂盒和ABC免疫组化法测定了乳腺癌、良性乳腺病患者外周血清及局部组织中白介素6(IL-6)及其受体水平，并以健康妇女为对照探讨其临床意义，现将结果报告如下。

材料与方法

　　1.检测对象：乳腺癌45例，良性乳腺病10例(其中乳腺纤维腺癌2例、慢乳病伴纤维化5例、导管内乳头状瘤3例)，体检者17例，均为女性。平均年龄分别为52.8±12.7岁，36.5±8.9岁和30.7±9.0岁。所有患者术前从肘前抽静脉血2 ml，分离血清，-70℃冷冻待测。排除放疗、化疗、内分泌治疗和感染、免疫性疾病。术后均送病理检查，常规石蜡切片，厚4 μm。健康妇女均排除乳房良恶性疾病及感染和免疫性疾病。

　　2.主要试剂：IL-6、sIL-6Rα ELISA检测试剂盒由法国Immunotech公司赠送；sgp130 ELISA检测试剂盒为苏州医学院免疫研究中心1996年底自行研制；ABC免疫组化检测试剂中，一抗均由苏州医学院免疫研究中心提供，二抗购自Dako公司；ABC购自Sigma公司；DAB为瑞士进口分装，工作时临时配制。

　　3.方法：IL-6、sIL-6Rα、sgp130检测按说明书进行，但需将IL-6、sIL-6Rα、sgp130酶促反应时间分别改为180分钟和120分钟，以标准浓度的对数为横轴，以吸光度值(A，曾称光密度OD值)的对数为纵轴，得IL-6、sIL-6Rα及sgp130标准曲线，根据标准曲线及标本A值得各参数含量。ABC免疫组化法阳性细胞呈深褐色，以切片中阳性细胞≥30%为阳性，＜30%为阴性。选择10例良性乳腺病边缘正常组织切片为阳性对照。统计学处理为t检验和χ²检验。

结果

　　1.各组病例血清IL-6、sIL-6Rα和sgp130检测结果：表1显示乳腺癌患者外周血IL-6和sIL-6Rα水平明显高于良性病组和健康组女性(P＜0.01)，sgp130水平明显高于良性病组(P＜0.05)和正常对照组(P＜0.01)。

表1　各组病例血清IL-6、sIL-6Rα和sgp130水平(±s)

　　^*与正常对照组比较，P＜0.01　　^△与良性病组比较，P＜0.01　^△△与良性病组比较，P＜0.05　　2.IL-6、IL-6Rα和gp130在癌组织、良性病变组织及正常组织中分布特征：IL-6、IL-6Rα和gp130免疫组化阳性物质主要分布在细胞膜，胞核阴性，偶见胞浆着色。在癌组织中，IL-6阳性偶见间质组织。45例癌组织各参数阳性率均为68.9%，且与病期、肿块大小、腋窝淋巴结、月经状况等无相关。良性病例及正常组织均为阳性。

　　3.IL-6、sIL-6Rα和sgp130水平与临床分期关系：如表2所示，根据1988年国际抗癌联盟修正方案，45例乳腺癌0期3例，Ⅰ期12例，Ⅱ、Ⅲ期各15例。随着病情进展，IL-6、sIL-6Rα和sgp130水平逐渐升高，Ⅲ期各指标均显著高于Ⅲ期之前水平。其中IL-6升高最明显，与0、Ⅰ、Ⅱ期相比明显升高(P＜0.01)。其次是sgp130水平与0、Ⅰ期相比明显升高(P＜0.01)；与Ⅱ期相比，差异也有显著性(P＜0.05)；sIL-6Rα水平在Ⅱ期时已升高到相当高水平，显著高于0、Ⅰ期(P＜0.01)。Ⅲ期时虽有升高趋势，但与Ⅱ期相比，差异无显著性。

表2　45例乳腺癌外周血IL-6、sIL-6Rα和sgp130水平与临床分期关系(±s)

　　^*与0、Ⅰ期相比较，P＜0.01　　^△与Ⅱ期相比较，P＜0.01　^△△与Ⅱ期相比较，P＜0.05　　4.IL-6、sIL-6Rα和sgp130水平与腋窝淋巴结状况的关系：45例乳腺癌中，27例腋淋巴结阳性，18例阴性。表3所示腋淋巴结阳性组各指标水平均明显高于阴性组(P＜0.01)。

　　5.IL-6、sIL-6Rα和sgp130与其他临床特征关系：乳腺癌外周血IL-6、sIL-6Rα和sgp130水平与患者年龄、肿块大小和月经状况均无明显关系。

表3　IL-6、sIL-6Rα和sgp130水平与腋淋巴结状况关系(±s)

　　讨论

　　IL-6是一种多效应细胞因子，它与恶性肿瘤的增殖、自身免疫性疾病密切相关。近年来，国外一些学者研究了IL-6在一些恶性肿瘤中的意义，我院张学光等^［1］对IL-6在多发性骨髓瘤中的意义也进行了系统研究。IL-6在乳腺癌中的意义，国外多为实验性研究，且结论不一^［2，3］，偶有临床研究，但也不系统^［4］，国内还未见文献报道。我们发现乳腺癌患者血清IL-6水平明显高于良性病患者及健康女性，且随病情进展而逐渐升高，并与腋淋巴结状况密切相关，提示IL-6水平的变化特征可反映乳腺癌生物学行为和预后。

　　IL-6生物学功能是通过靶细胞膜上特异性受体，即IL-6R来发挥效应的。Oh等^［5］研究发现IL-6/sIL-6Rα复合物具有IL-6/IL-6Rα同样的生物学功能。国外在乳腺癌的实验、临床研究中发现，sIL-6Rα有不同程度升高。国内未见报道。我们发现，乳腺癌患者血清sIL-6Rα水平明显升高，且与病情进展、腋淋巴结状况呈正相关，提示sIL-6Rα与IL-6一样可能是反映乳腺癌一些生物学行为和预后的重要参数，且可扩大IL-6生物学效应。

　　sgp130生物学功能目前还不清楚，国际上也缺乏商品化检测试剂盒。我们采用我院免疫中心研究的sgp130试剂盒研究发现，乳腺癌患者血清sgp130水平明显高于良性病患者和健康女性，同IL-6、sIL-6Rα一样，也与病情进展、腋淋巴结状况呈正相关。其中6例腋淋巴结有融合者，sgp130＞600 μg/L。另1例sgp130为634 μg/L，术后3个月复查有骨转移。因缺乏足够的资料，目前还不能确定sgp130水平变化在乳腺癌患者中的意义，但从本组研究来看似乎是一个不良预后指标。

　　IL-6、sIL-6Rα和sgp130 3个指标并不是同步升高。0、Ⅰ期患者3个指标均升高占40%；Ⅱ、Ⅲ期分别为60%、80%。结果表明，病期越晚，3个指标同时升高的概率越高。

　　国内外学者研究发现，膜性受体广泛在于正常组织细胞膜，IL-6可溶性受体系由膜性受体水解而来^［6］。我们研究发现，正常组织及良性病变组织IL-6受体均呈阳性表达，乳腺癌组织中IL-6及其受体阳性率为68.9%(31/45)。这一现象是否因膜性受体水解增多而引起，有待进一步研究。

参考文献

　　1Zhang XG, Zhang Y, Zhu Xd, et al. Interleukin-6 is a potent myeloma cell growth factor in patients with aggressive multiple myeloma. Blood, 1989, 74:11-13.

　　2Purohit A, Wang DY, Ghil chik MW, et al. Regulation of aromatase and sulphatase in breast tumour cells. J Endocrinol, 1996, 150: 565-571.

　　3Blais Y, Sugimotck, Carriere MC, et al. Interleukin-6 inhibits the potent stimulatory action of androgens, glucocorticoids and interleukin-1 alpha on apolipoprotein D and GCDFP-15 expression in human breast cancer cells. Int J Cancer, 1995, 62: 732-737.

　　4Yamashita JI, Hideshima T, Shirakusa T, et al. Medroxyprogesterone acetate treatment reduces serum interleukin-6 levels in patients with metastatic breast carcinoma. Cancer, 1996, 78: 2346-2352.

　　5Oh JW, Revel M, Chebath J. A soluble interleukin 6 receptor isolated from conditioned medium of human breast cancer cells is encoded by a differentially spliced mRNA. Cytokine, 1996, 8: 401-409.

　　6Mullberg J, Dittrich E, Ros-John S, et al. The soluble interleukin-6 receptor is generated by shedding. Eur J Immunol, 1993, 23: 473-480.

(收稿：1997-10-07　　修回：1998-02-24)