第三节 消毒与灭菌
清洁、消毒、灭菌是预防和控制医院感染的一个重要环节。它包括医院病室内外环境的清洁、消毒、诊疗用具、器械、药物的消毒、灭菌，以及接触传染病患者的消毒隔离和终末消毒等措施。
一、概念
（一）消毒
是指杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使之达到无害化的处理。根据有无已知的传染源可分预防性消毒和疫源性消毒；根据消毒的时间可分为随时消毒和终末消毒。
（二）灭菌
是指杀灭或清除传播媒介上的所有微生物（包括芽胞），使之达到无菌程度。经过灭菌的物品称“无菌物品”。用于需进入人体内部，包括进入血液、组织、体腔的医用器材，如手术器械、注射用具、一切置入体腔的引流管等，要求绝对无菌。
消毒与灭菌是两 个不同的要领。灭菌可包括消毒，而消毒却不能代替灭菌。消毒多用于卫生防疫方面，灭菌则主要用于医疗护理。
二、消毒、灭菌的原则
（一）明确消毒的主要对象
应具体分析引起感染的途径、涉及的媒介物及病原微生物的种类，有针对性地使用消毒剂。
（二）采取适当的消毒方法
根据消毒对象选择简便、有效、不损坏物品、来源丰富、价格适中的消毒方法。
医院诊疗器械按污染后可造成的危害程度和在人体接触部位不同分为三类：
1．高度危险的器材 穿过皮肤、粘膜而进入无菌的组织或器官内部，或与破损的皮肤粘膜密切接触的器材，如手术器械、注射器、心脏起搏器等。必须选用高效消毒法（灭菌）。
2．中度危险的器材仅与皮肤、粘膜密切接触，而不进入无菌组织内，如内窥镜、体温计、氧气管、呼吸机及所属器械、麻醉器械等。应选用中效消毒法，杀灭除芽胞以外的各种微生物。
3．低度危险器材和物品 不进入人体组织，不接触粘膜，仅直接或间接地与健康无损的皮肤接触，如果没有足够数量的病原微生物污染，一般并无危害，如口罩、衣被、药杯等，应选用低效消毒法或只作一般卫生处理。只要求去除一般细菌繁殖体和亲脂病毒。
（三）控制影响消毒效果的因素
许多因素会影响消毒剂的作用，而且各种消毒剂对这些因素的敏感性差异很大。
1．微生物的种类 不同类型的病原微生物对消毒剂抵抗力不同，因此，进行消毒时必须区别对待。
（1）细菌繁殖体 易被消毒剂消灭，一般革蓝氏阳性细菌对消毒剂较敏感，革蓝氏阴性杆菌则常有较强的抵抗力。繁殖体对热敏感，消毒方法以热力消毒为主。
（2）细菌芽胞 芽胞对消毒因子耐力最强，杀灭细菌芽胞最可靠的方法是热力灭菌，电离辐射和环氧乙烷熏蒸法。在化学消毒剂中，戊二醛、过氧乙酸能杀灭芽胞，但可靠性不如热力灭菌法。
（3）病毒 对消毒因子的耐力因种类不同而有很大差异，亲水病毒的耐力较亲脂病毒强。
（4）真菌 对干燥、日光、紫外线以及多数化学药物耐力较强，但不耐热（60℃1小时杀灭）。
2．微生物的数量污染的微生物数量越多需要消毒的时间就越长，剂量越大。
3．有机物的存在①有机物在微生物的表面形成保护层妨碍消毒剂与微生物的接触或延迟消毒剂的作用，以致于微生物逐渐产生对药物的适应性。②有机物和消毒剂作用，形成溶解度比原来更低或杀菌作用比原来更弱的化合物。③一部分消毒剂与有机物发生了作用，则对微生物的作用浓度降低。④有机物可中和一部分消毒剂。消毒剂中重金属类、表面活化剂等受有机物影响较大，对戊二醛影响较小。
4．温度随着温度的升高，杀菌作用增强，但温度的变化对各种消毒剂影响不同。如甲醛、戊二醛、环氧乙烷的湿度升高1倍时，杀菌效果可增加10倍。而酚类和酒精受温度影响小。
5．PH值从两方面影响杀菌作用。①对消毒剂的作用：改变其溶解度和分子结构。②pH过高或过低对微生物的生长均有影响。在酸性条件下，细菌表面负电荷减少，阴离子型消毒剂杀菌效果好。在碱性条件下，细菌表面负电荷增多，有利于阳离子型消毒剂发挥作用。
6．处理剂量与监测保证消毒、灭菌处理的剂量，加强效果监测，防止再污染。
三、消毒、灭菌的方法
（一）物理消毒灭菌法
利用物理因子杀灭微生物的方法。包括热力消毒灭菌、辐射消毒、空气净化、超声波消毒和微波消毒等。
1．热力消毒灭菌 高温能使微生物的蛋白质和酶变性或凝固（结构改变导致功能丧失），新陈代谢受到障碍而死亡，从而达到消毒与灭菌的目的。在消毒中，热可分为湿热与干热两大类。
[干热消毒灭菌]
干热是指相对湿度在20％以下的高热。干热消毒灭菌是由空气导热，传热效果较慢。一般繁殖体在干热80－100℃中经1小时可以杀死，芽胞需160－170℃经2小时方可杀死。
（1）燃烧法是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法，因对物品的破坏性大，故应用范围有限。
烧灼法：一些耐高温的器械（金属、搪瓷类），在急用或无条件用其他方法消毒时可采用此法。将器械放在火焰上烧灼1－2分钟。若为搪瓷容器，可倒少量95％乙醇，慢慢转动容器，使乙醇分布均匀，点火燃烧至熄灭约1－2分钟。采集作细菌培养的标本时，在留取标本前后（即启盖后，闭盖前）都应将试管（瓶）口和盖子置于火焰上烧灼，来回旋转2－3次。
燃烧时要注意安全，须远离易燃易爆物品，如氧气、汽油、乙醚等。燃烧过程不得添加乙醇，以免引起火焰上窜而致灼伤或火灾。锐利刀剪为保护刀锋，不宜用燃烧灭菌法。
焚烧：某些特殊感染，如破伤风、气性坏疽、绿脓杆菌感染的敷料，以及其它已污染且无保留价值的物品，如污纸、垃圾等，应放入焚烧炉内焚烧，使之炭化。
（2）干烤法
电热烤箱：利用烤箱的热空气消毒灭菌。烤箱通电加热后的空气在一定空间不断对流，产生均一效应的热空气直接穿透物体。一般繁殖体在干热80－100℃中经1小时可以杀死，芽胞、病毒需160－170℃经2小时方可杀死。热空气消毒灭菌法适用于玻璃器皿、瓷器以及明胶海棉、液体石腊、各种粉剂、软膏等。灭菌后待箱内温度降至50－40℃以下才能开启柜门，以防炸裂。
微波消毒：微波是一种高频电磁波，其杀菌的作用原理，一为热效应，所及之处产生分子内部剧烈运动，使物体里外湿度迅速升高；一为综合效应，诸如化学效应、电磁共振效应和场致力效应。目前已广泛应用于食品、药品的消毒，用微波灭菌手术器械包、微生物实验室用品等亦有报告。若物品先经1％过氧乙酸或0.5％新洁尔灭湿化处理后，可起协同杀菌作用，照射2分钟，可使杀芽胞率由98.81％增加到99.98％－99.99％。
微波对人体有一定危害性，其热效应可损伤睾丸、眼睛晶状体等，长时间照射还可致神经功能紊乱。使用时可设置不透微波的金属屏障或戴特制防护眼境等。
[湿热消毒灭菌]
湿热消毒灭菌是由空气和水蒸气导热，传热快，穿透力强，湿热灭菌法比干热灭菌法所需温度低、时间短。
（1）煮沸法 将水煮沸至100℃，保持5－10分钟可杀灭繁殖体，保持1－3小时可杀灭芽胞。在水中加入碳酸氢钠至1％－2％浓度时，沸点可达105℃，能增强杀菌作用，还可去污防锈。在高原地区气压低、沸点低的情况下，要延长消毒时间（海拔每增高300m，需延长消毒时间2分钟）。此法适用于不怕潮湿耐高温的搪瓷、金属、玻璃、橡胶类物品。
煮沸前物品涮洗干净，打开轴节或盖子，将其全部浸入水中。大小相同的碗、盆等均不能重叠，以确保物品各面与水接触。锐利、细小、易损物品用纱布包裹，以免撞击或散落。玻璃、搪瓷类放入冷水或温水中煮；金属、橡胶类则待水沸后放入。消毒时间均从水沸后开始计时。若中途再加入物品，则重新计时，消毒后及时取出物品，保持其无菌状态。
经煮沸灭菌的物品。“无菌”有效期不超过6小时。
（2）高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌器装置严密，输入蒸汽不外逸，温度随蒸汽压力增高而升高，当压力增至103－206kPa时，湿度可达121.3-132℃。高压蒸汽灭菌法就是利用高压和高热释放的潜热进行灭菌，为目前可靠而有效的灭菌方法。适用于耐高温、高压，不怕潮湿的物品，如敷料、手术器械、药品、细菌培养基等。
潜热是指当lg100℃的水蒸汽变成lg100℃水时，释放出2255.2J的热量。
高压蒸汽灭菌的关键问题是为热的传导提供良好条件，而其中最重要的是使冷空气从灭菌器中顺利排出。因为冷空气导热性差，阻碍蒸汽接触欲灭菌物品，并且还可减低蒸汽分压使之不能达到应有的温度。
图5－1 手提式高压蒸汽灭菌器
手提式高压蒸汽灭菌器（图5－1）：为金属圆筒，分为二层，隔层内盛水，有盖，可以旋紧，加热后产生蒸汽。锅外有压力表，当蒸汽压力升高时，温度也随之相应升高。该灭菌器体积小，可自发蒸汽，便于携带。
操作方法如下：在灭菌器中盛水3000ml；将拟灭菌的物品随同盛装的桶放入灭菌器内；将盖子上的排气软管插于铝桶内壁的的方管中；盖好盖子，拧紧元宝螺丝，勿使漏气；锅下加热，打开排气活门，放出冷空气（一般在水沸后排气10－15分钟左右），关闭放气活门，使压力逐渐上升至103kPa，温度达121.3℃,维持20分钟后，排气至“0”时，慢慢打开盖子。如果突然开盖，冷空气大量进入，蒸汽凝成水滴，使物品潮湿，且玻璃类易发生爆裂。
卧式高压蒸汽灭菌器（图5－2）；其结构原理同手提式高压蒸汽灭菌器，因其体积大，一次可灭菌大量物品。操作人员须经专业培训，合格后方能上岗。
图5－2 卧式高压蒸汽灭菌器
后再关闭放气开关，待夹层压力表达到灭菌所需压力时（约10分钟后），将蒸汽控制阀移至“消毒”位置，使蒸汽进入柜室，柜室内的冷空气及冷凝水可由柜室阻气器排出，待柜室的压力升到103－137kPa，温度达121.3～126.2℃时，转动压力调节阀，使压力与温度保持恒定。维持30分钟后，将蒸汽控制阀移至“排气”位置，排气毕，将蒸汽控制阀移至“干燥”位置；物品干燥后，将蒸气控制阀移至“关闭”位置，待压力指针到“0”位置和热空气排尽后，才能打开柜门，取出物品；关紧进气阀。
预真空式高压蒸汽灭菌器（图5－3）；在通入蒸汽前有一预处理阶段，即柜室内抽负压至2.6kPa（空气排除约98％），所以，预真空高压蒸汽灭菌器除有下排气式所具备的灭菌系统、蒸汽输送系统、控制系统、安全系统和仪表监测指示系统外，增加抽负压系统和空气过滤系统。机器运转由电脑控制。
图5－3 预真空高压蒸汽灭菌器
预真空式高压蒸汽灭菌器湿度可达132－135℃，具有灭菌周期快、效率高，完成整个灭菌周期只需25分钟，节省人力、时间和能源；冷空气排除较可靠与彻底；对物品的包装、排放要求较宽，而且真空状态下物品不易氧化损坏的特点。但设备费、维修费较高，对柜体密封性要求较高，漏气量每分钟不得使负压升高值超过0.13kPa。存在小装量效应，即欲灭菌物品放得过少，灭菌效果反而较差。小装量效应的发生主要由于物品体积愈小，在柜内残留空气愈多，对蒸汽接触物品的阻隔作用愈大所致，瓶装液体不用此法灭菌。
操作方法如下：打开蒸汽管道阀门，首先将柜室夹层和管道内的空气和积水排净，使夹套内达到预定压力和温度（104－167℃），将待灭菌物品装入柜室，关紧柜门。柜室内抽负压至2.6kPa，向柜室内输入蒸汽，将控制阀移至“消毒”的位置。随后机器按一定程序自动运行，诸如：“恒温”、“排气”、“干燥”、“关闭”等。待恢复常压后打开柜门取出物品。灭菌时使压力达206kPa，温度为132℃，维持4－5分钟。
高压蒸汽灭菌法的注意事项：
第一，无菌包不宜过大（小于50cm×30cm×30cm），不宜过紧，各包裹间要有间隙，使蒸汽能对流易渗透到包裹中央。消毒前，打开贮槽或盒的通气孔，有利于蒸汽流通。而且排气时使蒸汽能迅速排出，以保持物品干燥。消毒灭菌完毕，关闭贮槽或盒的通气孔，以保持物品的无菌状态。
第二，布类物品应放在金属类物品上，否则蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。阻碍蒸汽进入包裹中央，严重影响灭菌效果。
第三，定期检查灭菌效果。经高压蒸汽灭菌的无菌包、无菌容器有效期以1周为宜。
高压蒸汽灭菌效果的监测：有以下三种方法。
第一种是工艺监测，又称程序监测。根据安装在灭菌器上的量器（压力表、温度表、计时表）、图表、指示针、报警器等，指示灭菌设备工作正常与否。此法能迅速指出灭菌器的故障，但不能确定待灭菌物品是否达到灭菌要求。此法作为常规监测方法，每次灭菌均应进行.。
第二种是化学指示监测。利用化学指示剂在一定温度与作用时间条件下受热变色或变形的特点，以判断是否达到灭菌所需参数。常用的有：
自制测温管：将某些化学药物的晶体密封于小玻璃管内（长2cm,内径1～2mm）制成。常用试剂有苯甲酸（熔点121－123℃）等。灭菌时，当湿度上升至药物的熔点，管内的晶体即熔化，事后，虽冷却再凝固，其外形仍可与未熔化的晶体相区别，此法只能指示温度，不能指示热持续时间是否已达标，因此是最低标准。主要用于各物品包装的中心情况的监测。
3M压力灭菌指示胶带：此胶带上印有斜形白色指示线条图案，是一种贴在待灭菌的无菌包外的特制变色胶纸。其粘贴面可牢固地封闭敷料包、金属盒或玻璃物品，在121℃经20分钟，130℃经4分钟后，胶带100％变色（条纹图案即显现黑色斜条）。3M胶带既可用于物品包装表面情况的监测，又可用于对包装中心情况的监测，还可以代替别针，夹子或带子使用。
第三种是生物指示剂监测。利用耐热的非致病性细菌芽胞作指示菌，以测定热力灭菌的效果。菌种用嗜热脂肪杆菌，本菌芽胞对热的抗力较强，其热死亡时间与病原微生物中抗力最强的肉毒杆菌芽胞相似。生物指示剂有芽胞悬液、芽胞菌片以及菌片与培养基混装的指示管。检测时应使用标准试验包，每个包中心部位置生物指示剂2个，放在灭菌柜室的5个点，即上、中层的中央各一个点，下层的前、中、后各一个点。灭菌后，取出生物指示剂，接种于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，置55－60℃温箱中培养48小时至7天，观察最终结果。若培养后颜色未变，澄清透明，说明芽胞已被杀灭。达到了灭菌要求。若变为黄色混浊，说芽胞未被杀灭，灭菌失败。
图5－4 高压蒸汽灭菌指示带
图5－5 高压蒸汽灭菌化学指示卡
[干热灭菌与湿热灭菌的比较]
干热与湿热灭菌虽然都是利用热的作用杀菌，但由于本身的性质与传导介质不同，所以其灭菌的特点亦不一样（表5－1）。
表5－1 干热灭菌与湿热灭菌的比较
| |
干热 |
湿热 |
| 对物品影响
适用对象
作用温度
作用时间
杀菌能力 |
空气 烤焦
金属 玻璃与其他不畏焦化物品
高（160－400℃）
长（1－5小时）
较差 |
水和蒸汽 濡湿（皮革损坏）
棉织品 水液等不畏湿热 物品
低（60－134℃）
短（4－60分钟）
较强 |
湿热与干热各有特点，互相很难完全取代，但总的说来，湿热的消毒效果较干热好，所以使用也普遍。湿热较干热消毒效果好的原因有三；①蛋白质在含水多时易变性，含水量多，愈易凝固；②湿热穿透力强，传导快。③蒸汽具有潜热，当蒸汽与被灭菌的物品接触时，可凝结成水而放出潜热，使湿度迅速升高，加强灭菌效果。
2．国徽消毒灭菌 包括光照消毒和电离国徽。光消毒主要是利用紫外线照射，使菌体蛋白发生光解、变性，菌体内的氨基酸、核酸、酶遭到破坏而致细菌死亡。紫外线通过空气时，可使空气中的氧气电离产生臭氧，加强了杀菌作用。紫外线穿透性差，不能透过玻璃，尘埃，纸张和固体物质；透过空气能力较强，透过液体能力很弱。光照消毒对杆菌杀菌力强，对球菌较弱，对霉菌、酵母菌更弱。对生长期细菌敏感，对芽胞敏感性差。光照消毒因地区、季节、环境的影响，效果有所差异，当温度低于4℃，湿度超过50％时，杀菌能力减弱。因此，消毒时，必须提高温度，延长消毒时间，一般室温保持在10－25℃为宜。减少空气中的尘埃，直接照射物品，可提高消毒的效果。
（1）日光曝晒法日光由于其热、干燥和紫外线作用，具有一定的杀菌力，将物品放在直射日光下，曝晒6小时，定时翻动，使物体各面均受日光照射。此法多用于被褥、床垫、毛毯、书籍等物品的消毒。
（2）紫外线灯管消毒法 紫外线因其光谱位于紫色可见光之外，故称紫外线。紫外线灯管是一种人工制造的低压汞石英灯管，管内注入压强0.4～0.6kPa的氩气和水银数滴，管子两端用钨丝作成螺旋状电极。通电后，氩气先电离，然后冲击水银电离，发放紫外线。经5－7分钟后受紫外线照射的空气，才能使氧气产生臭氧。因此消毒时间应从灯亮5－7分钟后计时，紫外线杀菌能力与其波长有密切关系。最佳杀菌波长为2537nm（是细菌对紫外线吸收最快的波长）。
常用的紫外线灯管有15W、20W、30W、40W四种，可采用悬吊式，移动式灯架照射，或紫外线消毒箱内照射。紫外线灯配用抛光铝板作反向罩，可增强消毒效果。
用于物品消毒时，如选用30W紫外线灯管，有效照射距离为25－60cm，时间为25－30分钟（物品要摊开或挂起，扩大照射面）。
用空气消毒时，室内每10m2 安装30W紫外线灯管1支，有效距离不超过2m。照射时间为30－60分钟，照射前清扫尘埃，照射时关闭门窗，停止人员走动。
注意事项：①注意眼睛、皮肤的保护，照射时嘱病人勿直视紫外线光源，可戴墨镜，或有用纱布遮盖双眼。用被单遮盖肢体，以免引起眼炎或皮肤红斑。②紫外线灯管要保持清洁透亮。灯管要轻拿轻放。关灯后应间隔3－4分钟后才能再次开启。一次可连续使用4小时。③定期监测消毒效果。紫外线的杀菌力取决于紫外线输出量的大小，灯管的输出强度随使用时间的增加而减弱。故日常消毒多采用紫外线强度计或化学指示卡进行监测，新管（30W）不低于100μW／cm2；使用中的旧管在50-70μW／cm2 ，则需延长消毒时间；低于50μW／cm2者必须更换。定期进行空气细菌培养，以检查杀菌效果。
（3）臭氧灭菌灯（电子灭菌灯）消毒法 灭菌灯内装有1-4支臭氧发生管，在电场作用下，将空气中的氧气转换成高纯臭氧。臭氧主要依靠其强大的氧化作用而杀菌。使用灭菌灯时，关闭门窗，确保消毒效果。用于空气消毒时，人员须离开现场，消毒结束后20-30分钟方可进入。
（4）电离辐射灭菌法 应用放射性同位素r源或直线加速器发生的高能量电子束进行灭菌。适用于忌热物品的常温灭菌方法。又称“冷灭菌”。尤其对一次性应用的医疗器材、密封包装后需长期储存的器材、精密医疗器材和仪器，以及移植和埋植的组织和人工器官，节育用品等特别适用。
3．空气净化空气本身缺乏细菌维持生活所需的营养物，再加上日光对细菌的影响，故空气中细菌很少。但如果室内光照和通风较差，同时微生物不断地从室内人群的呼吸道、皮肤排出，以及室内物品表面的浮游菌。使室内空气中细菌比室外多。利用通风或空气过滤器可使室内空气中的细菌、尘埃大降低，达到净化目的。
（1）自然通风定时开放门窗，以通风换气，这样可降低室内空气含菌的密度，短时间内使大气中的新鲜空气替换室内的污浊空气。通风是目前最简便、行之有效的净化空气的方法。通风的时间可根据湿度和空气流通条件而定。夏季应经常开放门窗以通风换气；冬季可选择清晨和晚间开窗，每日通风换气两次，每次20－30分钟。
（2）空气过滤除菌 是医院空气净化措施中采取的现代化设备。即使空气通过孔隙小于0.2μ的高效过滤器，利用物理阻留、静电吸附等原理除去介质中的微生物。通过过滤除菌使病室、手术室或无菌药物控制室内的空气达到绝对净化的目的。
凡在送风系统上装备高效空气过滤器的房间，称生物洁净室。适用于无菌护理室、无菌手术室等。空气净化的进展，为重大手术的开展和治疗大面积烧伤病人防止感染，提供了更加有利的条件。
4．超声波消毒法 是利用频率在20－200kHz的声波作用下，使细菌细胞机械破裂和原生质迅速游离，达到消毒目的。如超声洗手器，用于手的消毒。超声洗涤机，用于注射器的清洁和初步的消毒处理。
（二）化学消毒灭菌法
利用化学药物渗透细菌的体内，使菌体蛋白凝固变性，干忧细菌酶的活性，抑制细菌代谢和生长或损害细胞膜的结构，改变其渗透性，破坏其生理功能等，从而起到消毒灭菌作用。所用的药物称化学消毒剂。有的药物杀灭微生物的能力较强，可以达到灭菌，又称为灭菌剂。
凡不适于物理消毒灭菌而耐潮湿的物品，如锐利的金属、刀、剪、缝针和光学仪器（胃镜、膀胱镜等）及皮肤、粘膜，病人的分泌物、排泄物、病室空气等均可采用此法。
1．化学消毒灭菌剂的使用原则
（1）根据物品的性能及病原体的特性，选择合适的消毒剂。
（2）严格掌握消毒剂的有效浓度、消毒时间和使用方法。
（3）需消毒的物品应洗净擦干，浸泡时打开轴节，将物品浸没于溶液里。
（4）消毒剂应定期更换，挥发剂应加盖并定期测定比重，及时调整浓度。
（5）浸泡过的物品，使用前需用无菌等渗盐水冲洗，以免消毒剂刺激人体组织。
2．常用化学消毒灭菌方法
（1）浸泡法 选用杀菌谱广、腐蚀性弱、水溶性消毒剂，将物品浸没于消毒剂内，在标准的浓度和时间内，达到消毒灭菌目的。
（2）擦拭法 选用易溶于水、穿透性强的消毒剂，擦拭物品表面，在标准的浓度和时间里达到消毒灭菌目的。
（3）薰蒸法 加热或加入氧化剂，使消毒剂呈气体，在标准的浓度和时间里达到消毒灭菌目的。
适用于室内物品及空气消毒或精密贵重仪器和不能蒸、煮、浸泡的物品（血压计、听诊器以及传染病人用过的票证等），均可用此法消毒。
①纯乳酸 常用于手术室和病室空气消毒。每100m2空间用乳酸12ml加等量水，放入治疗碗内，密闭门窗，加热熏蒸，待蒸发完毕，移去热源，继续封闭2小时，随后开窗通风换气。
②食醋 5－10ml/m3加热水1－2m3，闭门加热熏蒸到食醋蒸发完为止。因食醋含5％醋酸可改变细菌酸碱环境而有抑菌作用，对流感、流脑病室的空气可进行消毒。
此外，尚可应用甲醛或过氧乙酸等进行熏蒸灭菌（详见表5－2）。
（4）喷雾法借助普通喷雾器或气溶胶喷雾器，使消毒剂产生微粒气雾弥散在空间，进行空气和物品表面的消毒。如用1％漂白粉澄清液或0.2％过氧乙酸溶液作空气喷雾。对细菌芽胞污染的表面，每立方米喷雾2％过氧乙酸溶液8ml经30分钟（在18℃以上的室温下），可达99.9%杀灭率。
（5）环氧乙烷气体密闭消毒法将环氧乙烷气体置于密闭容器内，在标准的浓度、湿度和时间内达到消毒灭菌目的。
环氧乙烷是广谱气体杀菌剂，能杀灭细菌繁殖体及芽胞，以及真菌和病毒等。穿透力强，对大多数物品无损害，消毒后可迅速挥发，特别适用于不耐高热和温热的物品，如精密器械、电子仪器、光学仪器、心肺机、起博器、书籍文件等，均无损害和腐蚀等副作用。本品沸点为10.8℃,只能灌装于耐压金属罐或特制安瓿中。
操作方法：灭菌可用柜室法或丁基橡胶袋法。
①柜室法可在环氧乙烷灭菌柜内进行。将物品放入柜室内，关闭柜门，预温加热至40－60℃，抽真空至21kPa左右，通入环氧乙烷，用量1kg/m3，在最适相对温度（60－80％）情况下作用6－12小时。灭菌完毕后排气打开柜门，取出物品。
②丁基橡胶袋法在特制的袋内进行。将物品放入袋内，挤出空气，扎紧袋口。环氧乙烷给药可事先放安瓿于袋内，扎紧袋口后打碎，使其气体扩散；亦可将钢瓶放在40－50℃温水中气化后与袋底部胶管相通，使气体迅速进入，用药量为2.5g/L。将橡胶袋底部通气口关闭，放入20－30℃室温中放置8－24小时。
注意事项
①环氧乙烷应存放在阴凉、通风、无火源、无电开关处。用时轻取轻放，勿猛烈碰撞。②消毒时，应注意环境的相对湿度和温度。钢 瓶需加温时，热水不可超过70℃。③消毒容器不能漏气（检测有无漏气，可用浸有硫代硫酸钠指示剂的滤纸片贴于可疑部位。如有漏气，滤纸片由白色变粉红色）。袋内物品放置不宜过紧。④环氧乙烷有一定吸附作用，消毒后的物品，应放置在通风环境，待气体散发后再使用。⑤本品液体对皮肤、眼及粘膜刺激性强，如有接触，立即用水冲洗。⑥在环氧乙烷消毒的操作过程中，如有头昏头痛等中毒症状时，应立即离开现场，至通风良好处休息。
3．消毒剂的性质与消毒水平
（1）高水平消毒剂 杀菌谱广、消毒方法多样，如环氧乙烷、过氧乙酸、甲醛、戊二醛、含氯消毒剂（漂白粉、三合一、次氯酸钠、优氯净等）。高水平消毒剂性质不稳定，需现用现配。
（2）中等水平消毒剂 其特点是溶解度好、性质稳定、能长期贮存，但不能作灭菌剂。如碘伏、碘酒、乙醇、煤酚皂、高锰酸钾等。
（3）低水平消毒剂 性质稳定、能长期贮存，无异味，无刺激性，但杀菌谱窄，对芽胞只有抑制作用。如季胺盐类（新洁尔灭、杜米芬、消毒净）、洗必太等。
4．消毒剂浓度稀释配制计算法
消毒剂原液和加工剂型一般浓度较高，在实际应用中，必须根据消毒的对象和目的加稀释，配制成适宜浓度使用，才能收到良好的消毒灭菌效果。
稀释配制计算公式：C1·V1＝C2·V2
C1――稀释前溶液浓度
C2――稀释后溶液浓度
V1――稀释前溶液体积
V2――稀释后溶液体积
例：欲配0.1％新洁尔溶液3000ml，需用5％新洁尔灭溶液多少毫升？
代入公式：5％×X＝0.1％×3000
X＝60ml
答：需用5％新洁尔灭60ml。
5．常用化学消毒剂使用方法（5－2）
表5－2 常用化学消毒剂使用方法
| 消毒剂名称 |
消毒水平 |
作用原理 |
使用范围 |
注意点 |
| Alcohol |
中效 |
使菌体蛋白凝固变性，但对肝炎病毒及芽胞无效 |
1以70％－75％溶液作为消毒剂，多用于消毒皮肤 295％溶液可用于燃烧灭菌 |
1易挥发需加盖保存并定期调整其浓度 低于70％浓度则消毒作用差 2因有刺激性不宜用于粘膜及创面的消毒 |
| Tr.lodine |
高效 |
使细菌蛋白氧化变性能杀灭大部分细菌 真菌芽胞和原虫 |
1 2％溶液用于皮肤消毒擦后20S再用75％乙醇脱碘 2 2.5％溶液用于脐带断端的消毒，擦后20s，再用75％乙醇脱碘 |
1对皮肤有较强的刺激作用高浓度不能用。更不能用于粘膜消毒，如会阴肛门 阴囊 眼口鼻部手术消毒以免引起灼伤 2 皮肤过敏者禁用 |
| （新洁尔灭）
Bromo-geraminum |
低效 |
是阳离子表面活性剂能吸附带阴电的细菌破坏细菌的细胞膜，最终导致菌体自溶死亡，又可使菌体蛋白变性而沉淀 |
1 0.01％－0.05％溶液用于粘膜消毒 20.1%-0.2%溶液用于皮肤消毒
3 0.1%-0.2%溶液用于消毒金属器械，浸泡15－30min(加入0.5％亚硝酸钠以防锈)
|
1 对肥皂 碘高锰酸钾等阴离子表面活性剂有拮抗作用 2有吸附作用，会降低药效，所以溶液内不可投入纱布 棉花等 |
| （新洁尔灭）
Tin.Bromogeraminum |
中效 |
同上 |
用于皮肤粘膜消毒 |
取苯扎溴铵（新洁尔灭）lg＋曙红0.4g+95%乙醇700ml＋蒸馏水至1000ml |
| Hibitane |
低效 |
具有广谱抑菌杀菌作用 |
1 0.02％溶液用于手的消毒浸泡3min 20.05％溶液用于创面消毒 3 0.1％溶液用于物体表面的消毒 |
同苯扎溴铵（新洁尔灭） |
| Formalin
（37％－40％）的甲醛溶液 |
高效 |
菌体蛋白变性酶活性消失。能杀灭细菌 真菌 芽胞和病毒 |
1空气消毒加热法 取福尔马林12.5ml/m3 加入等量水加热蒸发成气雾 待药蒸 发完毕断绝热源 继续封闭6h以上。 2熏柜消毒加热法 取福尔马林40－80ml/m3 柜内置电灯泡通电加热，密封熏蒸3－24h。
3 氧化法 取福尔马林10ml+高锰酸钾5g/m3密封熏蒸6 h 以上 |
熏蒸穿透力弱，衣服最好挂起消毒 |
| Ethylene Oxide |
高效 |
与菌体蛋白结合，使酶代谢受阻而导致死亡能杀灭细菌 真菌 病毒 立克次体和芽胞 |
1用于电子仪器和不耐高温物品 如皮革 皮毛 化纤织物一次性高分子医疗器材等的灭菌处理 2少量物品可装入塑料袋或丁基橡胶袋中消毒，大量物品则用环氧乙烷灭菌器加温密闭消毒。常用剂量为0.12%-0.8%,温度为20－37℃，时间为6－24h
3 投药量为0.4-0.8kg/m3 |
1此药易燃易爆 且有一定毒性 必须熟悉使用方法并严格遵守安全操作程序 2 放置阴凉通风无火源及电源开关处，严禁放入电冰箱
3 贮存湿度不可超过40℃，以防爆炸
4 灭菌后的物品 应清除环氧乙烷残留量后方可使用 |
| Peracetic
Acid (P.A.A.) |
高效 |
能产生新生态氧将菌体蛋白质氧化 使细菌死亡 能杀灭细菌 真菌 芽胞
病菌 |
1 0.2％溶液用于手的消毒浸泡1－2min 20.2％-0.5％溶液用于物体表面的擦拭或浸泡10min
3 0.5％溶液用于餐具消毒 浸泡30－60min
4 1％－2％溶液用于室内空气消毒 |
1浓溶液有刺激性及腐蚀性配制时要戴口罩和橡胶手套须谨慎防止溅到它处 2因腐蚀性强不宜用金属器皿盛装 3 存于阴处，防高温引起爆炸 4易氧化分解可降低浓度和杀菌力 故须现配现用 |
| Chloriole of
lime |
中高效 |
在水溶液中放出有效氯，破坏细菌酶的活性而致死亡。能杀灭各种致病菌病毒芽胞 |
1 0.5％漂白粉澄清液用于餐具消毒，浸泡30min 21％－2％澄清液用于肝炎患者的餐具消毒，浸泡1－2h
3 1％－3％澄清液喷洒（100－300ml/m3）消毒30min后通风或擦拭病室物品及厕所
4 干粪5份加漂白粉1份搅拦，放置2h，尿液100ml加入漂白粉1g放置1h |
1配制的澄清液性质不稳定 密封保存时间不可超过1周 2有腐蚀及退色作用 不宜用于金属制品 有色衣物及油漆家具布类消毒后应立即清洗 以防被腐蚀 |
| Gluaraldchyde |
高效 |
与菌体蛋白质反应，使之灭活能杀灭细菌真菌病毒和芽胞 |
1 2％溶液用于各种内窥镜消毒，浸泡1h 22%溶液用于不耐热手术器械 导管注射器 口镜口腔科器械，透析器械消毒，浸泡10h |
1消毒后的物品于使用前用无菌生理盐水冲洗 2 内窥镜连续使用需间隔消毒10min,每天使用前后各消毒30min消毒后用冷开水冲洗 3 每周过滤1次每2－3周更换消毒剂1次 |
| （达尔美净化剂）
PVP－I |
中高效 |
是碘与表面活性剂的不定型结合物能杀灭细菌芽胞。还有清洁作用 |
1 3％溶液用于体温计消毒浸泡30min 20.5%-1%碘伏液用于手术前皮肤消毒和手消毒 |
1体温计消毒前将唾液揩净 浸泡30 min后，用冷开水洗净揩干使用 2皮肤消毒后留有色素可用水洗清 |
| （双氧水）
Hydrogen preoxide |
高效 |
过氧化氢能破坏蛋白质的基础分子结构从而具有抑菌与杀菌作用 |
1 3％－6％溶液用于烯酸树脂制成的外科体内埋植物的消毒 210％－25％溶液用于不耐热的塑料制品消毒 |
1使用前用无菌生理盐水冲洗 2 易氧化分解降低浓度应存于阴凉处不宜用金属器皿盛装 |
| 消毒灵 |
高效 |
同漂白粉 |
1 0.5％溶液用于针筒针 头 输液 输血器的消毒浸泡1h 2 1％溶液用于胃管肛管导尿管等消毒，浸泡1h
3 1％溶液用于体温计消毒，第一次浸泡5min第二次浸泡30min |
消毒后物品，使用前需用无菌生理盐水冲洗 |
注：高效 可杀灭一切微生物。
中效 可杀灭细菌繁殖体、结核杆菌、病毒、不能杀灭芽胞。
低效 可杀灭细菌繁殖体、真菌，不能杀灭芽孢和病毒
附：几种常用去污渍法
（1）陈旧血渍：浸入过氧化氢溶液中，然后洗净。
（2）龙胆紫污渍酒精或草酸擦拭。
（3）凡士林或石蜡油污渍：将污渍折夹在吸水纸中，然后用熨斗熨烙以吸污。
（4）墨水污渍：新鲜污渍用肥皂、清水洗、不能洗净时再用稀盐酸或草酸溶液洗.。也可用氨水或双氧水褪色。
（5）铁锈污渍：浸入1％热草酸后用清水洗，也可用热醋酸浸洗。
（6）蛋白银污渍：可用盐酸及氨水擦洗。
（7）高锰酸钾污渍：可用1％维生素C溶液洗涤，或0.2%～0.5%过氧乙酸水溶液浸泡清洗。