《实用免疫细胞与核酸》 > 第二十二章 聚合酶链反应(PCR)技术的发展和应用

第七节 PCR仪器的发展

PCR温度循环至关重要,PCR扩增仪各参数必须准确。自Perkin –Elmer Cetus公司第一台PCR扩增仪问世以来,现已有几十家不同的厂家在国内外生产和销售PCR扩增仪。在短短的几年间,扩增仪经过几代的发展,不断采用新技术,并且进一步朝方便、实用、高智能化和自动化的方向发展。

为了便于了解和选购适宜的PCR实验设备,现将部分国内外PCR扩增仪列表如下(表22-5);这些仪器主要用变温铝块、变温水浴及变温气流的方式达到热循环的目的,各有其优缺点。国产1109型DNA扩增仪则是用恒温浴机械手移位式。更接近于手工操作。PTC-51A/B体积小,智能化与自动化程序高,可以兼做套式PCR,方便实用。以上各种仪器一般都配有微电脑自动控制温度、时间及循环数,可以达到节 省劳动力的目的。在采用这些仪器作PCR试验之前,一般均应实测管内温度变化循环情况,以了解升、降温时管内因热传导造成的温度滞后情况和实际到达的最高、最低温度,用于修正设计的循环参数。温度滞后受到所用Eppendorf管材料、壁厚及形状(与铝块孔匹配程度)的影响,这对变温铝块式仪器影响更大些。对于配用制冷机式半导体元件致冷的仪器,在使用低于室温的温度来保冷PCR反应后小管时,应注意冷凝水的问题,勿使流入仪器内浸湿半导体元件而损坏仪器。

表22-5 国内外生产的几种DNA扩增仪

仪器型号生产厂家型式特点管数报价
1109型北京新技术所与军科院联合机械臂
变温水浴
电子调温40×0.5ml16400元/台
90A/B型中科院遗传所机械臂
变温水浴
电热 14000元/台
PTC-51A/B型军事医学科学院变温气流电子调兼作套式30×0.5ml12000元/台
DNA Thermal CyclerPerkin –ElmerCetus(美)变温铝块压缩机致冷48×0.5mlUS $ 20000.-
Thermocycler
60
00
180
B..Braun
Biotech
(德)
变温水浴98℃四档电热,自来水冷却60×1.5ml
100×1.5ml
180×1.5ml
DM 30000.-
Automatic temperature Cy-cler Single Block Twin BlockEricomp Inc.(美)变温铝块25~100℃电热,自来水冷却29×1.5ml
58×1.5ml
US $4985.-
US $7980.-
Grant AutogenGrant Instrumant Ltd(美)变温水浴0~99℃电热,自来水冷却或加冷循环器50×1.5ml
or
50×1.5ml
US $250. –plus
US $ 15.-for
Rack(x2)
Techne PHC-1
PHC-2
Techne Ltd.(英)变温铝块0~99℃三档电热500W水冷100W54×0.5ml
54×0.5ml
24×1.5ml
£3383. –
£3997. -
BioOvenBioThrm Corp(美)变温气流
-150℃
115V11A200’s of 4×96plateUS $ 2990. -
Trio-Thermo-block TB-1 Biomertra(德)半导体变温220V3×20管
分别控温
DM12900. -
Micro cycler E Eppendorf(美)变温铝块220V/100V3×29管US