PCR温度循环至关重要,PCR扩增仪各参数必须准确。自Perkin –Elmer Cetus公司第一台PCR扩增仪问世以来,现已有几十家不同的厂家在国内外生产和销售PCR扩增仪。在短短的几年间,扩增仪经过几代的发展,不断采用新技术,并且进一步朝方便、实用、高智能化和自动化的方向发展。
为了便于了解和选购适宜的PCR实验设备,现将部分国内外PCR扩增仪列表如下(表22-5);这些仪器主要用变温铝块、变温水浴及变温气流的方式达到热循环的目的,各有其优缺点。国产1109型DNA扩增仪则是用恒温浴机械手移位式。更接近于手工操作。PTC-51A/B体积小,智能化与自动化程序高,可以兼做套式PCR,方便实用。以上各种仪器一般都配有微电脑自动控制温度、时间及循环数,可以达到节 省劳动力的目的。在采用这些仪器作PCR试验之前,一般均应实测管内温度变化循环情况,以了解升、降温时管内因热传导造成的温度滞后情况和实际到达的最高、最低温度,用于修正设计的循环参数。温度滞后受到所用Eppendorf管材料、壁厚及形状(与铝块孔匹配程度)的影响,这对变温铝块式仪器影响更大些。对于配用制冷机式半导体元件致冷的仪器,在使用低于室温的温度来保冷PCR反应后小管时,应注意冷凝水的问题,勿使流入仪器内浸湿半导体元件而损坏仪器。
表22-5 国内外生产的几种DNA扩增仪
仪器型号 | 生产厂家 | 型式 | 特点 | 管数 | 报价 |
1109型 | 北京新技术所与军科院联合 | 机械臂 变温水浴 | 电子调温 | 40×0.5ml | 16400元/台 |
90A/B型 | 中科院遗传所 | 机械臂 变温水浴 | 电热 | 14000元/台 | |
PTC-51A/B型 | 军事医学科学院 | 变温气流 | 电子调兼作套式 | 30×0.5ml | 12000元/台 |
DNA Thermal Cycler | Perkin –ElmerCetus(美) | 变温铝块 | 压缩机致冷 | 48×0.5ml | US $ 20000.- |
Thermocycler 60 00 180 | B..Braun Biotech (德) | 变温水浴98℃四档 | 电热,自来水冷却 | 60×1.5ml 100×1.5ml 180×1.5ml | DM 30000.- |
Automatic temperature Cy-cler Single Block Twin Block | Ericomp Inc.(美) | 变温铝块25~100℃ | 电热,自来水冷却 | 29×1.5ml 58×1.5ml | US $4985.- US $7980.- |
Grant Autogen | Grant Instrumant Ltd(美) | 变温水浴0~99℃ | 电热,自来水冷却或加冷循环器 | 50×1.5ml or 50×1.5ml | US $250. –plus US $ 15.-for Rack(x2) |
Techne PHC-1 PHC-2 | Techne Ltd.(英) | 变温铝块0~99℃三档 | 电热500W水冷100W | 54×0.5ml 54×0.5ml 24×1.5ml | £3383. – £3997. - |
BioOven | BioThrm Corp(美) | 变温气流 -150℃ | 115V11A | 200’s of 4×96plate | US $ 2990. - |
Trio-Thermo-block TB-1 | Biomertra(德) | 半导体变温 | 220V | 3×20管 分别控温 | DM12900. - |
Micro cycler E | Eppendorf(美) | 变温铝块 | 220V/100V | 3×29管 | US |