七、胃癌组织TGFβⅠ和TGF βⅡ型受体表达的临床意义
许洪卫 陈莉 王元和 潭龙益
摘 要 目的：通过检测29份胃癌标本TGFβⅠ和TGF βⅡ型受体的mRNA水平，探讨它们与胃癌浸润和转移的关联性。方法：应用点杂交法和计算机灰度扫描分析组织的mRNA水平。结果：胃癌组的TGFβⅠmRNA灰度均值明显高于癌旁对照组（P<0.001），浸润组或伴有淋巴结转移分别明显高于膨胀组或无淋巴结转移组（P<0.05）；而上述各组的TGF βⅡ型受体mRNA水平变化却与TGFβⅠ相反，并且二者具有明显的负相关性（r=-0.697，P<0.05）。结论：TGFβⅠ和TGF βⅡ型受体可能在胃癌的浸润和转移过程中发挥着某种不同的作用。
关键词 转化生长因子 肿瘤转移 胃肿瘤
转化生长因子（TGF）β家庭是一类属结构相关蛋白的异二聚体多肽，至少包括三种（TGF β1-3），其中TGFβⅠ是人体内的主要形式。TGFβ通过与细胞膜上的TGFβⅠ-Ⅳ型受体结合，发挥其包括导致细胞凋亡在内的各种细胞信号传递作用。TGFβ家庭成员的变化可能与前列腺癌和肝脏血管瘤等肿瘤的临床表现密切相关。本文测定了29例胃癌病人原发灶组织TGFβⅠ和TGF βⅡ型受体的mRNA表达水平，旨在探讨TGFβⅠ和TGF βⅡ型受体与胃癌侵袭性的关系。
1 材料与方法
选择确诊的胃癌病人29例，根据病理报告和手术中探查结果，按肿瘤组织学分化程度、生长方式（Ming法）和淋巴结转移情况分别将其列为分化较差组（指乳头状腺癌和分化管状腺癌，17例）；浸润组（19例）、膨胀组（10例）和有淋巴结转移组（17例）、无淋巴结转移组（12例）。所有病人术前检查未发现心、肝、肺、肾等重要脏器的器质性病变，也未行放疗、化疗或生物治疗。取新鲜胃癌及距癌边缘5cm以上的非肿瘤组织标本，经液氮速冻后置-80℃保存；异硫氰酸胍一步法抽提组织RNA，分别以本院检验科自制探针（含0.7kb人类TGFβⅠ cDNA和人类TGF βⅡ型受体cDNA，均为地高辛标记）作点杂交（dot blot）分析，所得结果经计算机灰度扫描并自动测算出每个斑点的平均灰度值（反映mRNA相对水平）。所有数据以X±s表示，用t检验和秩相关分析进行统计学处理。
2 结果
胃癌组织的TGFβⅠ mRNA灰度均值明显高于癌旁结照组（P<0.001），浸润组或伴有淋巴结转移组分别明显高于膨胀组或无淋巴结转移组(P均<0.05)，但分化较差组与分化较好组间差异无显著性(P>0.05)；胃癌组的TGF βⅡ型受组mRNA水平明显低于对照组(P<0.05)，浸润组、伴有淋巴结转移组及分化较差组均分别明显低于膨胀组、无淋巴结转移组和分化较好组(P均<0.05)。如附图所示，癌组织TGFβⅠ与TGF βⅡ型受体mRNA水平之间具有明显的负相关性 (r=-0.697，P<0.05)。
附图 29份胃癌组织标本TGF βⅡ型受体mRNA（上图）和TGF β1 mRNA（下图）灰度均值与胃癌侵袭性的关系。
（A：浸润型，n=19；B：膨胀型，n=10；C：伴淋巴结转移者，n=17；D：不伴淋巴结转移者，n=12；E：组织分化较差者，n=12；F：组织分化较好者，n=17；G：胃癌原发灶，n=29；H：癌旁正常粘膜，n=21）
△P>0. 05，*P<0.05，**P<0.005，***P<0.001
3 讨论
浸润转移是恶性肿瘤生物学行为的具体反映。细胞外间质许多生物大分子的活性变化或基因突变可导致肿瘤细胞的浸润性生长和远处转移。我们近年的研究也证实，透明质酸和某些整合素（intgrins）可能与胃癌的恶性表型有关。
TGF βⅡ型受体是由567个氨基酸残基组成的跨膜蛋白，它与I型受体和TGF βI型结合形成的复合物，在细胞的信号传递过程中产生系统生物学效应。TGF β1是一个多功能细胞因子，它在许多细胞中具有广泛的但可能互相矛盾的作用。对正常上皮细胞而言，TGF β1发挥着普遍的生长抑制效应，在控制其细胞生长、胚胎发育、免疫调节和细胞凋亡等方面都具有重要作用；但结直肠癌、胃癌等某些肿瘤在其发生发展中过程中，可摆脱TGF β1的抑制甚至被TGF β1刺激而生长。本文发现，浸润型或伴有淋巴结转移胃癌病人的原发灶TGF βⅡ型受体mRNA表达水平，前二者却显著低于后二者；并且癌组织TGF β1与TGF βⅡ型受体mRNA水平之间具有明显的负相关性。提示胃癌组织TGF β1基因的强表达或TGF βⅡ型受体基因的弱表达在胃癌的浸润和淋巴结转移过程中起着某种重要作用，与新近有关报道一致。Tsushima等报道，22例结直肠癌病人癌组织TGF β1 mRNA水平与肿瘤的Dukes分期明显相关；TGF β1的免疫组化表达愈显著，结直肠癌患乾的Dukes分期愈晚，术后存活时间也相应缩短。Renault等发现，人类胃癌标本TGF βⅡ型受体基历的突变率为20%（8/40）。
我们还发现，组织学分化较差者的TGF βⅡ型受体mRNA水平明显低于组织学分化较好者，而TGF β1 mRNA水平与胃癌组织学类型的相关性不明显。但25份胃癌标本免疫组化切片显示，播散型胃癌TGF β1和TGF βⅡ型受体的表达范围宽广、呈弥温性，而肠型胃癌的表达范围较窄且局限性。与本文结果有不尽相同之处，故TGF β1与TGF βⅡ型受体在胃癌组织分化过程中的确切作用有待深入探讨。
总之，组织TGF β1和TGF βⅡ型受体表达水平与胃癌的侵袭性密切相关。全面分析胃镜活检组织或胃癌标本的TGF βI和TGF βⅡ型受体水平，可能有助于评估胃癌的恶性演进状态，对该类病人的综合治疗和预后具有重要的指导意义。