细菌性急性感染性腹泻病病原菌抗力及其消毒

中国消毒学杂志 1999年第3期第16卷 综述

作者：陈春田

单位：沈阳军区军事医学科学院研究所，沈阳　110031

关键词：急性感染性腹泻；消毒；细菌抗力

　　急性感染性腹泻病是在临床上引起以急性腹泻为主要症状的传染病总称。其对人群健康危害甚大，是各国防治的重点疾病之一。近年来，对其病原菌抗力及预防消毒措施研究报道较多。现将有关情况综述于下。

　　1流行概况

　　急性感染性腹泻病流行范围广，病原体种类多，仅主要细菌致病菌即有志贺菌、致病性大肠杆菌、沙门菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌、耶尔森菌、金黄色葡萄球菌、空肠弯曲菌、类志贺单胞菌、气单胞菌、变形杆菌等。对郑州地区本病病原体调查发现，以致病性大肠杆菌居首位，其次为志贺菌和空肠弯曲菌^〔1〕。病人有的是由单一病原体感染，有的是混和感染^〔2〕。我国每年约有8.3亿人次患急性感染性腹泻病，发病高峰在6～8月，以散发为主，时有暴发。

　　2 病原菌抗力

　　2.1 对热的抗力

　　细菌病原菌多数对热敏感，其抗力低于病毒、真菌、酵母菌和细菌芽胞。以湿热80℃作用5～10min，即可将其杀灭^〔3〕。60℃作用持续30min，能杀灭水中的耶尔森菌，62.8℃牛奶中杀灭该菌90%的D值为0.7～17.0s^〔4〕。60℃作用15min，能杀灭水中的空肠弯曲菌。用巴斯德消毒法(60℃，30min)处理牛奶中的空肠弯曲菌，可使其全部死亡^〔5〕。55℃杀灭亲水性气单胞菌的D值为0.17min，Z值(缩短原作用时间90%所需升高的温度)为5.11℃^〔6〕。虽然多数病原菌对热敏感，但一些菌产生的毒素却耐高温。比如，类志贺邻单胞菌超过44℃不能生长，而其所产生的毒素可耐100℃^〔7〕。

　　2.2 对电离辐射的抗力

　　电离辐射对大肠杆菌、副伤寒杆菌、鼠伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌杀死90％的剂量（D₁₀）分别为0.085、0.19、0.2～1.3、0.18kGy^〔8〕，互相间相差较大。γ射线对伤寒杆菌的D₁₀值，在空气中或氮气中分别为0.00394±0.00029kGy和0.00561±0.00035kGy^〔9〕。对牛肉载体上耶尔森菌的D₁₀值为0.014～0.23kGy，是肉汤培养液中耶尔森菌的2倍^〔4〕。随温度升高，D₁₀值下降。当温度从49℃升至55℃，电离辐射对空肠弯曲菌的D₁₀值迅速从0.205kGy降至0.0212kGy^〔10〕。在相同条件下，空肠弯曲菌对电离辐射比沙门菌更为敏感。用2.5kGy剂量照射，前者数量减少10个对数级，后者只减少5个对数级^〔11〕。

　　2.3 对微波和紫外线的抗力

　　以650W微波作用4～5min，可杀灭葡萄球菌^〔12〕。500W微波炉内处理1.3kg饭票，照射2min可将全部痢疾杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌和金黄色葡萄球菌杀　灭^〔13〕。

　　紫外线杀灭金黄色葡萄球菌的剂量　为2180μW^．s/cm²～4950μW^．s/cm^2〔14〕。一般，革兰阴性菌对紫外线较革兰阳性球菌敏感。254nm紫外线杀灭99.9％的空肠弯曲菌、耶尔森菌O:3群和大肠杆菌的剂量分别是1.8、2.7和5.0μW^．s/cm^2〔15〕。

　　2.4 对化学消毒剂的抗力

　　化学消毒剂种类多，性质各异。因此，只能具体说一特定菌对某一消毒剂的抗力。Puente等测定了二氧化氯对海水中副溶血弧菌的抑菌和杀菌有效氯浓度，分别为47mg/L和285～2850mg/L，他认为二氧化氯可有效控制海水中副溶血弧菌的污染^〔16〕。刘希真等从腹泻病人粪便中分离出7种肠杆菌：弗氏志贺菌、小肠结肠炎耶尔森菌、大肠杆菌、哈夫尼亚菌、产气肠杆菌、迟缓爱德华菌、变形杆菌．经检测，二氯异氰尿酸钠对它们最小抑菌有效氯浓度为75～150mg/L。同时，选择弗氏志贺菌进行的载体杀菌试验。结果，200mg/L有效氯溶液对其杀灭时间，从2min至30min不等^〔17〕。

　　Wang报告，在pH值为7.0，温度为24～26℃条件下，几种消毒剂对空肠弯曲菌作用1min的最低杀菌浓度分别是：次氯酸钠溶液（含5mg/L有效氯）、0.15%酚溶液、碘伏溶液（10mg/L有效碘）、季铵盐溶液（1∶50000）、70.0%乙醇溶液，0.125%戊二醛溶液^〔18〕。Shiraishi等发现，临床分离到的普通变形杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、粘质沙雷杆菌等，对葡糖酸氯己定和氯苄烷铵的抗力，随着聚乙烯吡咯烷酮－碘(PVP-I)使用量的增加而下降^〔19〕。临床标本中分离到的抗甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)，用0.05%氯苄烷铵将其全部杀灭所需时间为40s，同浓度的碘伏只需20s，而氯己定则需2min～20min不等^〔20〕。

　　在含有机物的模拟水体中，用6mg/L过氧乙酸溶液作用15min，可使埃尔托弧菌全部死亡，但同浓度的漂白粉作用72h，仍可检出该菌^〔21〕。

　　3 预防消毒措施

　　急性感染性腹泻病病原菌主要通过粪-口途径引发感染。高危因素有:喝生水，吃不洁瓜果，吃不洁冷饮，饭前便后不洗手，水源卫生差。因此，消毒的重点为手、饮水和餐具。

　　3.1 手的消毒

　　使用消毒纸巾或消毒液直接擦拭手，效果比流水洗手好^〔22〕。用含氯己定、乙醇、增效剂、甘油所配复方的消毒纸巾擦手1～2min，对手上自然菌的消除率可达97.54％^〔23〕。以由氯己定、乙醇和增效剂组成的速干型皮肤消毒剂作用10～30s，可将染于手上的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌杀灭99.99％^〔24〕。氯溴异氰尿酸和酸性增效剂配制的擦手消毒液，适合供水困难时用于手的消毒^〔25〕。其它如过氧化氢、醇类、PVP-I等消毒剂，也可直接用于手的消毒。

　　3.2 饮水消毒

　　水源受污染，是急性感染性腹泻病暴发流行的一个重要原因。市政供水有统一消毒措施，只要没有二次污染，可符合卫生标准。野外个人饮水消毒则较困难。目前报道的药剂有个人饮水消毒片(主要为氯、溴或碘制剂)、饮水消毒双层丸、个人饮水消毒管等^〔26〕。目前，较有前景的饮水消毒剂是稳定型与固体二元包装型二氧化氯^{〔27，28〕}。此外，接触型消毒剂碘化树脂、聚卤树脂、活性炭吸附银等^〔29〕，具有作用快、效果好、无异味等优点。

　　3.3 餐具消毒

　　餐具既能被病人或带菌者污染，也易被一些生物和非生物媒介污染，而导至本病的传播。餐具主要采用热力消毒和化学消毒剂浸泡消毒。热力方法主要有煮沸或用蒸汽。陈义山报告，煮沸1min或蒸汽作用15min的消毒效果，优于用含有效氯200～250mg/L的漂白粉精片溶液、次氯酸钠溶液或84消毒液（含次氯酸钠与表面活性剂复方消毒剂）浸泡5min的效果^〔30〕。目前餐具加热消毒存在的主要问题是，多数单位并不每餐一消毒；碗、盘、盆叠放过多、过紧，中间餐具常达不到消毒要求；消毒后再污染^{〔31，32〕}等。常用餐具消毒剂有含氯消毒液、碘伏、过氧乙酸等。其它如氯己定、苯扎溴铵（新洁尔灭）、高锰酸钾、臭氧、过氧戊二酸、二氧化氯等也有用于餐具消毒者^〔33〕。当前市售的餐具消毒柜多采用远红外线加热消毒，一般作用30～40min即可达到消毒要求^〔34,35〕。

　　4 急性感染性腹泻病预防中消毒工作面临的挑战

　　4.1 新病原菌出现

　　近20年来，新的急性感染性腹泻病病原菌不断出现，较重要者有：弯曲杆菌(1977)、大肠杆菌O157∶H7(1982)、霍乱弧菌0139等。大肠杆菌O157∶H7过去并未受重视，自1993年在美国发娚黄00人的感染流行，1994年在英国又发生由该菌引起腹泻的暴发流行，1996年在日本于8天内发病8495人后，引起了全球的关注^〔36〕。新出现菌株的抗力不比以往病原菌强，却形成暴发流行，此值得深思并进行深入的调查研究。

　　4.2 抗药菌株的形成

　　抗甲氧西林和庆大霉素的金黄色葡萄球菌引起的院内暴发性腹泻感染已有报道^〔37〕。某些金黄色葡萄球菌对庆大霉素的耐药性质粒，也携带有抗季铵盐类化合物的基因^〔38〕。该菌庆大霉素耐药菌株对季铵盐的抗力，是庆大霉素敏感株的4倍^〔39〕。临床分离的抗甲氧基青霉素的金黄色葡萄球菌，也表现出抗季铵盐的特性^〔40〕。

　　环境条件可影响细菌的抗力。据报道，耶尔森菌、克雷伯肺炎球菌和大肠杆菌的初始生长条件越接近自然水体，其培养物的抗力越大^{〔41，42〕}。此外还发现，以含10mg/L有效氯的次氯酸钠溶液作用于耶尔森菌后，以液体培养基培养的该菌抗力，比固体培养基培养者更强^〔43〕。

　　上述抗力的差异，可能与细胞膜脂质成分和通透性的改变，或与粘液保护层形成有关^〔44〕。如何探知抗力变化的规律，改进消毒措施，是我们面临的又一挑战。

　　（本文经刘希真教授审校，特此致谢。）

　　参考文献

　　〔1〕张怀琛，于连运，周连成，等.感染性腹泻病原谱及流行病学研究.中华流行病学杂志，1991;12(特9):45.

　　〔2〕王永怡，虞爱华.腹泻病防治365问.北京:金盾出版社，1995:12.

　　〔3〕薛广波.热力消毒与灭菌.见:薛广波主编.实用消毒学.北京:人民军医出版社，1993:138.

　　〔4〕Swaminathan B. A review of Yersinia enter- ocolitica. J Appl Bacteriol，1982; 52:151.

　　〔5〕Waterman SC. The heat-sensitivity of Cam- pylobacter jejuni in milk. J Hyg，1982;88(3):529.

　　〔6〕Condon S. Effect of culture age， pre-incubation at low temperature and pH on the thermal resistance of Aeromonas hydrophila. J. Appl Bacteriol, 1992;72:322.

　　〔7〕孙长柱，吴高峰编著.部队腹泻病防治.济南:黄河出版社，1994:3.

　　〔8〕吴德林.电离辐射灭菌.见:薛广波主编.实用消毒学.北京:人民军医出版社，1993:193.

　　〔9〕Kim AY. Mechanism by which gamma irradiation Increase the sensitivity of Salmonella typhimurium ATCC 1402 to heat. Appl Environ Microbiol, 1996;62(5):1759.

　　〔10〕Blankonship LE. Campylobacter jejuni survival in chicken meat as a function of temperature. Appl Environ Microbiol,1982;44(1):88.

　　〔11〕Patterson MF. Sensitivity of Campylobacter spp. to irradiation in poultry meat. J Appl Bacteriol,1995;20:338.

　　〔12〕杨华明.微波用于医院消毒的进展.中国消毒学杂志,1994;11(2):103.

　　〔13〕张锦屏.微波消毒饭票的试验研究.中华流行病学杂志,1984;5:1232.

　　〔14〕薛广波.紫外线消毒.见:薛广波主编.灭菌^．消毒^．防腐^．保藏.北京:人民卫生出版社，1993:217.

　　〔15〕Butler RC. Susceptibility of Campylobacter Jejuni and Yersinia enterocolitica to UV Radiation. Appl Environ Microbiol,1987;52(2):375.

　　〔16〕Puente M, Vega-Villasante F, Hdguin G, et al. Susceptibility of the brine shrimp Artemia and as pathogen Vibrio parathaemolyticus to Chlorine dioxide in contaminated sea-water. J Appl Bacteriol,1992;73:465.

　　〔17〕刘希真，李岩，王振生，等.二氯异氰尿酸钠对肠道杆菌抑制与杀灭效果的试验观察.中国消毒学杂志，1996；13(2):76.

　　〔18〕Wang W. Effect of disinfectants on Cam- pylobacter jejuni. Appl Environ Microbiol,1983;45(4):1202.

　　〔19〕Shiraishi T, Nakagawa Y. Review of disinfectant susceptibility of bacteria isolated in hospital to commonly used disinfectants. Postgrad Med J,1993;69(suppl3):s70.

　　〔20〕Yasuda T, Yoshimura S, Katsuno Y, et al. Comparision bactericidal activities of various disinfectants against methicillin-sensitive Staphylococcus aureus and methicillin- resistant S. aureus. Postgrad Med J,1993;69(suppl3):s60.

　　〔21〕张学文，刘宙.过氧乙酸与漂白粉对埃尔托弧菌污染的摸拟水体消毒效果比较.消毒与灭菌,1986;3(3):143.

　　〔22〕姚楚水.手的消毒.中国消毒学杂志,1990;7(4):223.

　　〔23〕王太星，杨华明，蒋莉，等.消毒擦手纸巾的研究.中国消毒学杂志,1991;8(3):151.

　　〔24〕罗承佳，刘琼珍.速干型皮肤喷雾消毒剂的研究.中国消毒学杂志,1994;11(4):240.

　　〔25〕王长德，花秀春，耿京玉，等.擦手速效消毒液试用观察.中国消毒学杂志,1991;8(3):157.

　　〔26〕宋耕福.六种饮水消毒片(丸)稳定性与杀菌效果的比较.中国消毒学杂志,1995;12(1):43.

　　〔27〕蒋兴锦，梁增辉，杨宗芬，等.稳定型二氧化氯活化剂的改进.中国消毒学杂志,1990;7(2):105.

　　〔28〕刘育京，盛淳颖，姚文莉，等.消毒剂氧氯灵的研究.中国消毒学杂志，1992; 9(1):1.

　　〔29〕梁增辉.水的消毒.见:薛广波主编.灭菌^．消毒^．防腐^．保藏.北京:人民卫生出版社，1993:317.

　　〔30〕陈义山.几种餐具消毒实用效果的比较.中国消毒学杂志，1995;12(2):119.

　　〔31〕张映辉.食具煮沸消毒效果观察.中国消毒学杂志，1992;9(3):119.

　　〔32〕王跃进.我国餐具消毒的一些情况.中国消毒学杂志，1992;9(3):176.

　　〔33〕胡仁为.餐具消毒.见:薛广波主编.灭菌^．消毒^．防腐^．保藏.北京:人民卫生出版社，1993:317.

　　〔34〕廖华乐.各类食具消毒柜对乙型肝炎表面抗原的破坏效果.中国消毒学杂志，1995;12(1):60.

　　〔35〕贾静宜.不同方法消毒后的餐饮具细菌污染检测.中国消毒学杂志，1995;12(2):120.

　　〔36〕李升团.大肠杆菌0157∶H7感染的病原学的流行学.解放军预防医学杂志，1997；15(5):387.

　　〔37〕彭向欣.碘伏类消毒剂在临床上的应用.中国消毒学杂志，1992；9(1):40.

　　〔38〕Tennet JM. Cloning and expression of S. aureus Plasmid-Mediated quaternary ammonium resistance in E. coli. Antimicro Agent Chemother,1985;27:79.

　　〔39〕Brumfitt R. Resistance to antiseptics in methicillin and aentamycin resistant Staphylococcus aureus. Lancet，1985;Jun:1442.

　　〔40〕Masaudi SB. Comparative sensitivity to antibiotics and biocides of methicillin-resistant Staphylococcus strainisolated from Saudi Arabia. J Appl Bacteriol,1991;71(4):331.

　　〔41〕Berg JD， Matin A, Roberts PV. Effect of antecedent growth conditionson sensitivity of Escherichia coli to chlorine dioxide. Appl Environ Microbiol, 1982;44:814.

　　〔42〕Harakeh MS, Berg JD, Hoff JC, et al. Susceptibility of che- mostat-grown Yersinia enterocolitica and Klebsiella pneumoniae to chlorine dioxide. Appl Environ Microboil,1985;49(1):69.

　　〔43〕Paz ML. Antimicrobial effect of chlorme on Yersinia enterocolitica. J Appl Microbiol,1993;75:220.

　　〔44〕Hoff JC，Akin EW. Microbial resistance to disinfectants: mechanisms and significance. Environ Health Perspect,1986;69:7.

收稿日期：1998-10-16　修回日期：1998-12-04