NO、cAMP在哮喘豚鼠发病机理中的作用

中国免疫学杂志 1999年第3期第15卷 分子与细胞免疫学

作者：楼兰花　别晓东　王健民

单位：浙江中医学院分子医学研究所，杭州310009

　　中国图书分类号　R969.4　　一氧化氮(NO)可通过环核苷酸水平变化而产生多种生理效应^［1］，同时NO又可作为一种免疫调节因子影响机体免疫功能^［2］，免疫活性细胞的激活及其释放炎性介质与哮喘密切相关^［3］。本文通过对过敏性哮喘豚鼠肺泡灌洗液(BALF)中NO，嗜酸性粒细胞(EC)及肺组织cAMP，过氧化脂质(LPO)等测定，以说明NO，cAMP在哮喘豚鼠发病中的作用。

　　1　材料与方法

　　1.1　材料　DHP雄性豚鼠，体重250±27 g。

　　1.2　方法　过敏性哮喘豚鼠模型建立参照文献［3］。实验过程及观察指标,哮喘豚鼠用20%乌拉担(1 g/kg)腹腔注射麻醉，抽取肺泡灌洗液，经离心后置-30℃保存待测NO；沉淀的细胞用含5%胎牛血清生理盐水定量悬浮细胞，计算细胞数及涂片，HE染色作嗜酸性细胞分类计数；取相同部位肺组织切片，肺组织cAMP提取测定，提取方法采用本所建立的提取细胞内环核苷酸方法(专利号870106203.8),用放射免疫分析法测定；用硫代巴比妥酸(TBA)显色方法测定肺组织LPO，在532 nm处测OD值，以四乙氧基丙烷为标准计算每克组织LPO含量;用亚硝酸盐测定法，测定肺泡灌洗液中NO。

　　2　结果

　　2.1　过敏性哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中EC数及NO含量的变化　结果表明哮喘豚鼠BALF中细胞总数与对照组比较无显著差异，但EC百分率，EC数及NO含量较对照组含量显著升高，见表1。哮喘豚鼠肺组织cAMP水平较对照组显著降低，而LPO含量较对照组显著升高，见表2。

　　2.2　过敏性哮喘豚鼠肺组织血管，气管周围炎症细胞浸润及其形态的变化　哮喘豚鼠肺组织切片显示血管，支气管周围炎症细胞浸润较对照组显著增多，支气管粘膜下层有大量EC浸润脱颗粒现象，同时见到肺泡壁变薄、壁断裂、肺泡腔扩大等现象较对照组有明显改变。

表1　过敏性哮喘豚鼠BALFKNO含量和EC数的变化(n=8)

　　Tab.1 The change of NO and EC in BALF in allergic asthmatic guinea pigs (n=8)

　　note:compared with control group.1)P＜0.01,2)P＜0.01,3)P＜0.05

表2　过敏性哮喘豚鼠肺组织cAMP水平和LPO含量变化(n=8)

　　Tab.2 The change of cAMP and LPO in allergic asthmatic guinea pigs lung tissue (n=8)

　　note:compared with control group 1)P＜0.05,2)P＜0.01

　　3　讨论

　　NO具有炎症作用和细胞毒作用。NO也可通过激活鸟苷酸环化酶，导致细胞内cGMP增加^［1］。cAMP与cGMP是细胞内信息传递过程中一对作用相反而又相互制约的物质，其作用结果与二者比值有关。肺组织cAMP降低，结合NO升高则会促进免疫细胞活化及其释放多种活性介质，cAMP、cGMP除了与免疫功能有关外，与交感，副交感神经关系密切，其作用通过神经末梢释放递质，例如5-羟色胺，NO等，这些物质会使腺体分泌增加，平滑肌收缩，引起气道高反应。以上说明NO与cAMP是参与气道炎症引起气道高反应的重要机制之一。NO、cAMP在哮喘豚鼠发病机理中的作用　本文为浙江省教委课题(95-8)

　　别晓东　浙江医科大学第二附院，杭州310009

　　作者简介：楼兰花，女，53岁，副主任技师，从事变态反应方面的研究

　　4　参考文献

　　1　陈　修.心血管药理学.第2版.北京：人民卫生出版社，1996：124-128

　　2　Geller D A， Nussler A K, Di Silvio M et al. Pro Natl Acad Sci USA,1993;90(2):522

　　3 刘朝晖，徐　军，钟南山.内皮素肿瘤坏死因子在哮喘发病中的作用.中华结核和呼吸杂志，1995：18(6)：366

〔收稿1997-11-30　修回1998-05-20〕