华中科大成功构建血吸虫DNA疫苗
华中科技大学同济医学院石佑恩教授将DNA疫苗技术应用于血吸虫病疫苗研究,最近成功构建出了近期内可迅速应用于动物的血吸虫DNA疫苗。国家卫生部和全国血吸虫病专家咨询委员会组织评审,并对国内现有的10多种各类型的血吸虫疫苗进行双盲测试表明:该DNA疫苗的免疫保护效果列前三名。
石教授等1996年开始承担了卫生部总理基金资助重点项目“日本血吸虫DNA疫苗的构建及其保护性免疫的研究”,开始研制兽用血吸虫DNA疫苗。他们采用RT-PCR克隆的方法,构建了三种单价DNA疫苗,对其鉴定和表达进行了验证,并在疫苗的免疫保护效果、保护机制、保护增效研究等方面做了一系列卓有成效的工作。
构建出血吸虫
DNA疫苗后,研究人员对疫苗进行了酶切分析、PCR扩增和核苷酸序列测定,结果证明DNA疫苗的构建是成功的。他们将疫苗经肌肉或皮内注射给小鼠,进行组织切片测定,结果证实,该疫苗在肌细胞、朗罕细胞内均能表达。
科研人员随后采用不同免疫剂量、次数、不同注射部位、末次免疫后不同时间攻击等多种免疫方式,进行了多次动物实验,取得了较好的抗血吸虫攻击感染的免疫力,即,血吸虫DNA疫苗在小鼠体内能诱导免疫保护力。统计学处理结果证实,各实验组的减虫率为35.6%至44.4%,肝脏减卵率为39.64%至69.06%,与对照组(未免疫小鼠)相比,均有显著性差异(均为P<0.01);肌肉或皮内一次注射与三次注射相比,各实验组之间无显著性差异(P>0.05)。
为提高疫苗的免疫效果,石佑恩等进一步研制出了混合DNA疫苗(Cocktail疫苗)和多价DNA疫苗(采用多肽接头连接的方法构建)。动物实验证实,这两种疫苗的保护力优于单价DNA疫苗(P<0.01或P<0.05)。
科研人员还对血吸虫疫苗的免疫保护机制进行了研究。初步发现,CD8+淋巴细胞和细胞因子IL-2、TNF、TNF-γ等在免疫调控中起重要作用。
2001.08.30