C-fos基因在肝硬化、肝癌中的表达及意义

中华实验外科杂志 1999年第6期第16卷 肝癌外科

作者：施宝民　杨镇

单位：430030　武汉，同济医科大学附属同济医院外科

　　关键词： 癌，肝细胞；肝硬化；C-fos

　　【摘要】　目的　探讨C-fos基因在正常肝、硬化肝、肝癌组织中表达及肝组织癌变的机理。方法　收集肝癌切除标本和肝硬化门脉高压者肝活检组织各20例，正常对照10例，肝癌病例中乙肝阳性者16例，肝硬化中肝炎后肝硬化15例，血吸虫性肝硬化5例。应用SP免疫组化法计算其阳性率、阳性细胞指数、强阳性表达率。结果　肝癌和硬化肝组织的阳性率、阳性细胞指数均显著高于对照肝，而肝癌和肝硬化组却差异无显著性。阳性切片中，强阳性表达，肝癌显著高于肝硬化组。肝癌中乙肝阳性者阳性细胞指数与阴性者差异无显著性。肝硬化中肝炎性肝硬化和血吸虫性肝硬化亦差异无显著性。结论　C-fos作为一种早期应答基因，在肝组织由正常到硬化和癌变中有一个渐进性的量变过程。肝炎病毒和血吸虫都同样引起C-fos基因高表达，而后者正是肝组织癌变中的早期行为。

The expression of C-fos gene in liver cirrhosis and carcinoma and its roles in carcinogenesis

SHI Baomin, YANG Zhen.

　　Department of Surgery, Tongji Hospital, Tongji Medical University, Wuhan 430030

　　【Abstract】　Objective　To investigate the mechanism of liver carcinogenesis by comparing the different expression of C-fos in cirrhosis and carcinoma.Methods Twenty specimens each for cirrhosis and carcinoma tissues and 10 specimens as control were collected and studied immunohistochemically using C-fos antibody. The positive rate, index of positive cells and highly positive rate were calculated and compared statistically.Results There was no significant difference in positive rate between carcinoma group and cirrhosis group, while the positive rate in the both groups differed significantly from that in normal controls. For index of positive cells, no difference was found between HBsAg positive and negative patients with HCC or between posthepatitis and schistosome cirrhosis.Conclusion As an early immediate response gene, C-fos has an inclination of increasing in the course of liver cirrhosis and carcinogenesis.

　　【Key words】 Liver carcinoma Cirrhosis C-fos

　　肝硬化目前被认为是一种癌前病变，但其具体机制却不十分明了。现将一组病例的c-fos表达报道如下。

　　材料与方法

　　1. 标本　取自本院外科手术切除的肝癌及肝硬化活检组织各20例，其中肝炎性肝硬化15例，血吸虫性肝硬化5例；肝癌中乙肝阳性者16例；对照组为正常肝组织10例，均无肝硬化病史。

　　2. 方法　标本经过福马林浸泡、脱水、浸蜡、包埋、连续切片，每片厚4μm，免疫组化染色，抗体为单克隆c-fos抗血清，工作浓度为1∶50(中山生物制品公司)，方法采用S-P法。DAB显色，棕褐色颗粒为阳性，同时设阴性对照片和阳性对照片。计算染色阳性病例的百分率，阳性切片中阳性细胞指数(为100个细胞中阳性细胞的个数)，阳性切片中强阳性细胞在阳性细胞的比率；染色为浓染粗大颗粒为强阳性，染色颗粒细小、稀疏、染色略高于背景为弱阳性，强阳性细胞占1/3以上为强阳性切片，计算强阳性切片的比率。

　　3. 统计学处理　以上数据均行χ²检验。

　　结果

　　肝硬化组阳性例数为14例(70%)，其中肝炎性11例(11/15)，血吸虫性3例(3/5)；肝癌组阳性病例15例(75%)，其中乙肝阳性者11例(11/16)，阴性者3例(3/4)；正常组有3例(30%)阳性；肝硬化组和肝癌组差异无显著性，两组内部两部分差异无显著性，而两组均与正常组差异有显著性(P＜0.05)。阳性细胞指数结果同以上百分率结果类似。

　　在14例肝硬化病例中，有4例强阳性切片，10例弱阳性；在15例肝癌病例中，有10例强阳性切片，5例弱阳性，两者之间差异有显著性(P＜0.05)。

　　讨论

　　肝细胞的生长有两种方式：再生性生长和直接增生^［1］。正常肝组织存在着正常增生，这就是正常肝脏也有阳性表达的原因。肝硬化的主要病理变化是肝脏的纤维化和假小叶的增生，很多研究表明，增生结节内有大量C-fos的表达。肝炎性和血吸虫性肝硬化在表达上差异无显著性，说明两者至少在C-fos致增生方面机理相同。乙肝病毒致肝癌的机理有以下几个方面：(1)肝炎病毒基因整合、插入导致肝细胞基因突变而致癌；(2)促转录蛋白作用。乙肝病毒含有X基因，能编码一个17000X多肽，该肽具有激活C-myc、C-fos等原癌基因转录的作用，X基因转染肝细胞能导致完全恶化。(3)肝细胞坏死增生突变。慢性肝炎的病程中反复发生肝细胞的变性、坏死和增生，反复增生形成增生灶和增生结节，使DNA复制出现错误增加，易发基因突变^［2］。可见，乙肝病毒先是导致C-fos基因表达促进增生出现肝硬化、继而诱导肝癌的发生。

　　本研究结果表明，肝癌期C-fos表达强阳者远多于肝硬化期，可以看出：从正常肝到肝硬化、到肝癌有一个C-Fos逐渐增多的趋势。实际上，该基因参与了肝硬化和癌变的全过程。

　　参考文献

　　1　Columbano A, Shinozuka H. Liver regeneration versus direct hyperplasia. FASEB J, 1996, 10:1118-1128.

　　2 王洛权，阚秀，吴秉铨，等.肝炎病毒和肝癌变的分子病理学进展.中华病理学杂志，1995，24：393-395.

(收稿：1998-12-11　修回：1999-06-10)