介入治疗实验研究中兔VX2肝癌模型制作的改进和CT评价

临床放射学杂志 2000年第10期第19卷 实验研究

作者：邵国良　周康荣　王建华　颜志平　刘嵘

单位：邵国良（200032 复旦大学医学院附属中山医院放射科）；周康荣（200032 复旦大学医学院附属中山医院放射科）；王建华（200032 复旦大学医学院附属中山医院放射科）；颜志平（200032 复旦大学医学院附属中山医院放射科）；刘嵘（200032 复旦大学医学院附属中山医院放射科）

关键词：肝；VX2肿瘤；动物模型；兔；螺旋CT

　　【摘要】　目的　改进兔VX2肝癌模型的制作使之更适合介入治疗学研究，同时探讨瘤灶的CT表现及螺旋CT在检测瘤灶中的作用。　材料与方法　实验动物为新西兰大白兔(80只)，瘤种采用动物自身接种传代保存。取瘤块组织(1～2mm³大小)接种肝脏左叶深部，于接种后7、14天分别行CT平扫、动脉早期、门脉期扫描，少数动物于接种后21天再次CT扫描。　结果　72只(90%)动物接种成功。瘤灶以种植后2周CT显示最清楚和典型，直径1～2cm左右，平扫呈低密度或等密度，动脉早期明显强化，门脉期呈低密度，与周围肝组织分界较清楚。肝动脉造影显示肿瘤富血供。而种植后超过3周的肿瘤大部分发生坏死。

Improvement in Making Rabbit Model Bearing VX2 Liver Tumor for Interventional Experimental Study and CT Evaluation of the Tumor

SHAO Guoliang，ZHOU Kangrong，WANG Jianhua，et al.

　　（Department of Radiology, The Affiliated Zhongshan Hospital, Medical College of Fudan University, Shanghai 200032, P.R.China）

　　【Abstract】　Objective　To improve the preparation of rabbit model bearing VX2 liver tumor for interventional experimental study, and to investigate CT features of the tumor.　Materials and Methods　Eighty New Zealand white rabbits were implanted with VX2 tumor in the deep aspect of the left lobe of liver. CT scanning was performed in the experimental animals 1 and 2 weeks after implantation. The plain, early arterial phase and portal phase images were obtained. Additional CT scan at 3 weeks after implantation was made in some animals.　Results　Seventy-two (90%) rabbits were successfully implanted with VX2 tumor in the liver. On CT scans took at 2 weeks after implantation the tumor demonstrated itself most clear and typical: 1～2cm in diameter, hypodensity or isodensity on plain CT scans, marked enhanced on early arterial phase images, hypodensity on portal phase images, well discernible from the surrounding liver tissue. Hepatic angiography showed that the tumor was hypervascular. Necrosis was seen in most animals at 3 weeks after implantation.　Conclusion　The rabbit model bearing VX2 liver tumor is more suitable for interventional experimental study. Spiral CT is very useful in evaluating tumor.

　　【Key words】　Liver　 VX2 tumor　 Animal model　 Rabbit　 Spiral CT

　　兔VX2肝癌模型是少数建立在大动物身上的肝肿瘤模型，比较适合于需经肝动脉插管的介入治疗实验研究^［1～3］。我们对常用的兔VX2肝癌模型的制作方法进行了一些改进，并采用螺旋CT扫描技术检测瘤灶，筛选实验动物并评估瘤灶变化，以适合及方便介入治疗的实验研究。

　　1　材料与方法

　　新西兰大白兔80只，体重2～3kg，雌雄不限。VX2肿瘤细胞株自美国引进。将瘤细胞接种于兔大腿部皮下成瘤并传代，2周左右瘤体长至1～2cm³后采用外科方法取出肿瘤。将瘤周组织和肿瘤包膜剥脱干净，切开瘤体取靠近周缘的灰白色鱼肉样瘤组织在平皿上剪成1～2mm³大小碎块放入生理盐水中，用18G针头1ml针筒抽吸作为瘤种备用。实验动物采用1%戊巴比妥钠(3ml/kg)静脉麻醉，在上腹部正中作2cm长切口打开腹腔，暴露肝脏，用镊子轻夹肝左叶将其拉出体外，注入备用瘤种，量为0.1～0.2ml(含3～5个左右组织块)，针尖刺入深度1.5～2cm左右，拔针后立即用1cm×1cm大小明胶海绵块压迫，4～6秒钟后将肝脏回纳入腹腔，缝合伤口。种植后1、2、3周(少数)行CT扫描。CT仪为GE Hispeed Advantage螺旋CT机，选用非离子型对比剂优维显(Ultravist，300mg/ml)，对比剂量为7ml，0.3ml/s。将动物麻醉后先行肝脏CT平扫，延迟10～12s、40～50s后分别行动脉早期和门脉期增强扫描，扫描条件为120kV，200mA，FOV14，层厚3mm，间距3mm。

　　介入治疗在DSA机下进行，选用2F～3F导管经股动脉切开插管途径实施。

　　2　结果

　　本组80例，种植成功72例(90%)。瘤灶均位于肝左叶，呈单一团块。肿瘤种植灶在1周左右时较小，CT难以显示。2周时瘤灶直径达1～2cm，平扫呈低密度或等密度；动脉期扫描呈明显强化，大多数强化不均匀；门脉期瘤灶呈低密度，与周围肝组织分界清楚。当肿瘤有坏死时CT上表现为明显低密度。3周左右的瘤灶半数以上出现坏死，且坏死明显。血管造影显示瘤灶多数由左肝动脉供血，肿瘤血管丰富，少数有右肝动脉参与供血。经左肝动脉注入碘油，瘤灶内可见碘油沉积(图1、2)。

图1　螺旋CT增强扫描(动脉早期)示左肝叶内明显强化之瘤灶

图2　血管造影显示瘤灶血供丰富，呈明显对比剂浓染结节

　　3　讨论

　　以往肝癌模型大多建立在鼠身上，但由于鼠身体小，血管细，在介入治疗研究中行选择性肝动脉插管困难，且难以用常规影像检查手段进行检测。兔模型是一种比较适合介入治疗研究的动物模型，其VX2肿瘤是得到广泛承认的兔可移植性肿瘤，由Shop病毒在兔皮肤诱发的鳞癌经数十次传代而建立，并富血供^［3，4］。采用肿瘤细胞或悬液直接种植成功率达100%，但较费事、费力。而采用腿部皮下接种成瘤并传代作为瘤种进行肝脏接种虽然成功率不及前者，但较简单、经济，本组成功率为90%。也有学者采用脾脏接种成瘤作为瘤种再进行肝脏种植。兔肝脏的左叶体积明显大于右叶，左肝动脉较粗大，大多数从腹腔动脉直接发出，而右肝动脉较细小，变异多，故我们选择肝左叶种植肿瘤，有利于肝动脉超选择性插管及灌注药物，减少药物、栓塞材料进入胃动脉。我们在肝脏种植肿瘤时进针较深，拔针后立即用明胶海绵块压迫穿刺点，一方面减少瘤块逆出使腹腔种植；另一方面尽量使肿瘤种植在肝叶深部。我们在实验中发现，位于深部的肿瘤在增强CT扫描上强化较肝叶表面的肿瘤明显，碘油易于沉积，推测可能与瘤灶靠近较大血管支易于获得血供有关。

　　采用螺旋CT扫描检测兔VX2肝癌病灶，病灶显示清晰，对瘤灶的变化可进行动态观测，避免了实验动物必须开腹或处死才能观测瘤灶^［2］。同时对我们筛选合格的实验动物有帮助。我们经过反复摸索得出用7ml的对比剂，0.3ml/s，延迟10～12s、40～45s分别行动脉早期和门脉期扫描瘤灶显示较为清晰。在CT平扫上瘤灶呈低密度，少数为等密度，当有坏死时为明显低密度；动脉早期扫描瘤灶呈明显强化；门脉期扫描瘤灶呈较低密度，与周围肝组织的界限较清楚，与人肝细胞性肝癌CT表现相似。在肿瘤的种植时间上以2周左右的瘤灶显示清晰，表现典型。1周左右的瘤灶常较小，难以观测到。而3周以上的瘤灶大多出现明显的坏死。实验中我们还观测到通过动物自身多次传代的肿瘤会较早出现坏死且坏死明显，可能与反复传代肿瘤恶性程度增加有关。对此，我们在介入治疗的实验研究中根据CT表现选择荷瘤动物，剔除肿瘤坏死明显，不利于碘油沉积的动物，以使介入治疗疗效的评判和对比更具客观性。

　　本课题为“九五”国家医学科技攻关项目(96-907-03-01)

　　参考文献

　　［1］Okada M, Kudo S, Miyazaki O,et al. Antitumoral efficacy and pharmacokinetic properties of pirarubicn upon hepatic intra-arterial injection in the rabbit VX2 tumor model. Br J Cancer, 1995, 71:518

　　［2］Mugitani T, Taniguchi H, Takada A,et al. TNP-470 inhibits collateralization to complement the anti-tumor effect of hepatic artery ligation. Br J Cancer, 1998, 77:638

　　［3］王迎选，杨立，田嘉禾，等.兔VX2肝癌肝动脉插管栓塞术.中华放射学杂志，1992，26：716

　　［4］Chamberlain M, Gray B, Heggle J,et al. Hepatic metastases a physiological approach to treatment. Br J Surg, 1983, 70:596

(收稿：2000-03-14)