胃癌早期诊断及预警系统的建立

世界华人消化杂志 1999年第2期第0卷 专家述评

作者：闫小君

单位：第四军医大学全军基因诊断技术研究所　陕西省西安市　710033

关键词：胃肿瘤/病因学；胃肿瘤/诊断；基因，肿瘤

　　Subject headings　stomach neoplasms/etiology; stomach neoplasms/diagnosis; gene, neoplasm

　　中国图书资料分类号　R735.2

　　1　胃癌早期诊断的概念

　　1.1　胃癌是一种基因病　和绝大多数肿瘤一样，胃癌也是由多基因参予的一种渐进积累转化性疾病，这种转化过程是一个长期的细胞生物学行为由正常演变为异常的过程，即由量变到质变的过程. 细胞的这种变化首先发生在基因水平上，当变化涉及到基因表达产物的结构和功能时就会造成细胞自身不可逆性的功能和形态改变，最终造成细胞的癌变.

　　1.2　什么是癌症的早期诊断　目前，肿瘤(实体瘤)的诊断手段除病理学诊断外，主要是物理学诊断和以癌标志物为对象的实验室诊断. 病理学检查是对已癌变的细胞进行诊断；物理学检查是对已有明显形态学改变的癌肿进行诊断，而现行的癌标志物诊断的准确性和灵敏性尚难以满足临床要求. 因此，寻找诊断早期胃癌的方法仍是临床的重要课题. 从肿瘤发生发展的过程来讲，所谓肿瘤的早期诊断应该是细胞由正常转化为异常之前的诊断，细胞一旦发生癌变并呈克隆化生长，此时的诊断不管癌组织的大小，从细胞发育生长的角度看均属晚期诊断. 要做到肿瘤的早期诊断，就必需从肿瘤发展的早期阶段——基因水平上的变化入手，只有基因水平的诊断才能达到真正的肿瘤早期诊断.

　　1.3　胃癌基因诊断的意义　基因水平的分析及评估可以实现肿瘤的早期诊断，由于这种早期诊断可以在细胞癌变前实现，所以对于肿瘤的预防和提前介入细胞癌变过程，并进而防止其向恶性发展极为重要. 胃癌的早期诊断应放在基因水平的诊断，这对搞好胃癌的预防和治疗具有重要的临床意义，它能对胃癌的预测、治疗效果分析和制定预防胃癌的有关措施提供依据，对胃癌的综合防治有重大的现实意义.

　　2　胃癌基因诊断的方法及内容

　　2.1　胃癌基因诊断主要涉及3个方面的内容　①相关癌基因变异的检测：这类癌基因参与胃癌的形成，但不具有组织特异性，例如：ras, c-myc, c-met, erb-2, p16,p53等. ②胃癌特异性癌基因变异的检测：这类癌基因的变化对胃癌具有较高的组织特异性，在其他肿瘤组织中很少检测到，是胃癌组织外组织(如外周血)检测的主要目标，例如：ERK癌基因和我们最近研究发现的5个胃癌特异性EST片段. ③相关病因的检测：大量研究表明，幽门螺杆菌(Hp)是胃癌发生的重要协同致病因子，对胃粘膜淋巴瘤来讲则是主要的致病因子. 研究表明，Hp可通过某些环节造成胃粘膜组织癌基因的突变，细胞信号转导异常等导致胃粘膜细胞发生癌前变化，持续性感染则导致癌的发生. 最近我们的研究还发现胃癌的发生与Hp感染的时间和数量呈正相关. 所以对Hp的动态检测并配合病理检查，既是预防胃癌的有效方法，也是胃癌早期诊断的主要内容之一.

　　2.2　胃癌基因诊断的主要方法　①以PCR技术为主体的基因结构、定性和定量分析：PCR技术可以特异性的放大靶基因并可量化分析. 最近国内外均有较为成熟的定量PCR技术的报道，并且对PCR的定性分析方面亦有诸多的改进，如ELISA法，反向杂交法、荧光法等. 这些方法构成了对靶目标从基因水平上进行定性、定量分析的主体方法，如Hp DNA的定性和量化分析，胃癌高表达或低表达或缺失基因的分析等. ②基因结构分析的方法：如SSCP，RFLP，DNA序列分析等，这对由于基因结构的变化(如点突变或缺失，插入突变)致癌的因素分析非常有意义，如ras，c-myc的点突变等，这种分析粗略的可以用PCR-SSCP和PCR-RFLP等方法完成，准确的突变分析则取决于DNA序列分析. 由于DNA序列分析具有耗时、耗财、复杂等缺点，不适合大面积、大标本的筛选性检测. 最近国外研究机构和公司正致力于发展了快速测序的方法，虽有快速大量测序工作站成功的报道，但均需昂贵的设备，目前急需一种准确性较高，通用性强，且成本低廉的DNA序列分析系统. ③病理检查：内镜检查时取活检组织染色后观察胃粘膜组织变化的情况，以确定是否是癌变还是癌前病变，如果是癌前病变(如化生、不典型增生、慢性萎缩性胃炎等)则需确定其严重程度，并进行基因结构或基因的定性、定量分析.

　　3　胃癌早期诊断及预警系统的建立

　　3.1　胃癌预警系统的含义　胃癌预警系统的含义主要指在胃癌发生前通过一系列的检查和数据分析(如实验室检测报告，病因学分析，病理检查，物理检查等)，来预报被检查者发生胃癌的可能性，胃癌的严重程度，胃癌疗效及预后分析等.

　　3.2　胃癌预警系统的意义　胃癌是我国第一大肿瘤，是严重危害健康的主要疾病之一. 如果建立效果明显的胃癌预警系统，一方面可以大大的提高胃癌患者的生存率，减少治疗费用，另一方面还可以降低胃癌的发生率，有助于人们战胜胃癌和最终征服胃癌.

　　3.3　目前要进行的工作　做好胃癌的预警工作，关键应从胃癌的病因学诊断和早期诊断入手，尤其是早期诊断方面，重要而紧迫的是确定早期诊断的指标和指标变化的程度，如：何种基因发生何种变化，说明哪些问题. 迄今这方面的资料尚不完整，有大量的工作要做. 要建立胃癌早期诊断指标的数据库，需要大量的胃癌基因变化的流行病学资料，并通过整理、归纳、分类、分析等处理，找出基因变化与胃癌发生发展不同阶段(癌前病变、癌)的相互关系及其规律. 这种相互关系及其规律是可以通过大量调查研究和实验结果获取，这需众多的科技工作者协同攻关.

　　3.4　胃癌预警系统建立的条件　我们经大量研究工作现已能提供进行胃癌病因学和基因诊断的部分条件：①Hp CagA及尿素酶金标记试剂盒，ELISA试剂盒和Hp定量PCR试剂盒，能通过检测外周血、胃液和唾液提供Hp感染的种类(毒力株或非毒力株)，活动性或近期感染还是既往感染(检测IgM或IgG)，并可半定量分析病原菌(定量PCR)或其抗体(ELISA，金标)等，这对于病因学分析极为有利. ②各种胃癌相关基因的定性、定量、突变分析等检测手段已健全，并有整套试剂盒供应. 目前已完成了5种新型胃癌基因的定性、定量分析对实现胃癌组织特异性癌基因的检测非常有用，初步结果证明用5种基因组成的多重PCR其诊断效率达到100%(详细结果另文报道)，但尚需进一步验证，100多侯选基因正在研究之中，相信会有特异性好的基因被鉴定.

　　3.5　胃癌预警系统的实施

　　用抗Hp和抗Hp-CagA(滴金法)

　　通讯作者　闫小君，710033，陕西省西安市，第四军医大学全军基因诊断技术研究所.

　　注：^*表示已建成相应的方法，并已进行基础到临床的研究.

收稿日期　1998-09-07