p53蛋白和PCNA在胃癌中的表达及临床意义

癌症 1999年第4期第18卷 论著摘要

作者：陈映波　林奕中　张昌卿　吴雪强　周志伟　陈功　万德森　潘志忠

单位：中山医科大学肿瘤医院(广州，510060)

关键词：胃癌；p53蛋白；PCNA

　　中图分类号：R735.2　　文献标识码：A

　　文章编号：1000－467X(1999)04－0466－01

　　国内外有关p53蛋白和PCNA与胃癌生物学行为及预后关系报道较多,但尚存在较大争论。本研究旨在进一步明确它们之间的关系。

　　1　材料和方法

　　1.1　临床资料

　　本组110例均经病理证实为胃癌。其中70例为石蜡包埋标本,取自1983年～1988年资料完整病例;新鲜标本40例,为1995年～1996年胃癌手术切除标本。其中男57例，女53例；年龄24～73岁，中位年龄46岁；肿瘤部位：胃窦64例，胃体30例，胃底贲门17例，全胃4例；Borrmann分型：I型6例，II型53例，III型40例，Ⅳ型11例；侵犯深度：粘膜及粘膜下层2例，肌层23例，浆膜层74例，浆膜外11例；淋巴结转移：无转移23例，有转移87例；组织分型：分化型腺癌32例，低分化腺癌38例，粘液腺癌14例，印戒细胞癌13例，乳头状腺癌5例，其它8例。

　　1.2　方法

　　所有标本切片厚5μm,分别作HE和p53、PCNA单抗LSAB法免疫组化染色。用LSAB免疫组化方法检测癌组织中的p53蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。抗p53抗体(D0－7)和PCNA抗体(PCIO)购自丹麦DaKO公司。表达强度判断标准分四级,多个高倍视野(×400)计数500个肿瘤细胞,没有阳性细胞为(－),阳性细胞＜30％为(＋),阳性细胞30～70％为(＋＋),阳性细胞＞70％为(＋＋＋)。

　　1.3　统计方法

　　多因素线性回归和多因素Cox回归逐步筛选因子法在SPSSforWindows中完成。

　　2　结果

　　2.1　估计阳性标准

　　镜下观察阳性反应于细胞核内显红棕色颗粒为阳性。本组胃癌组织p53蛋白阳性率为47.27％(52/110),PCNA阳性率为95.45％(105/110)。

　　2.2　统计分析结果

　　p53蛋白及PCNA分别与下列8个因子筛选分析：性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、侵犯深度、Borrmann分型、组织分型、淋巴结转移。预后则与p53蛋白、PCNA及上述8个因子筛选分析。

　　多因素线性回归分析结果提示p53蛋白与上述8个胃癌临床病理指标无关。而PCNA关系见表1。

表1　PCNA与胃癌各临床病理指标多因素线性回归分析结果

　　胃癌预后多因素Coxl回归分析结果见表2。

表2　胃癌预后的多因素Cox回归分析结果

　　3　讨论　　p53基因的发现和研究是分子肿瘤学发展中最动人心的事件之一。野生型p53蛋白半衰期短，而突变型p53蛋白半衰期长，能稳定在较高水平上，故可用免疫组化方法检测突变型p53蛋白。PCNA是在细胞周期S期广泛表达的一种核蛋白。目前研究细胞增殖状态方法有多种，但均有其局限性。本文应用免疫组化链菌素亲生物素过氧化物酶(LSAB)法检测胃癌组织中p53蛋白和PCNA的表达情况，其阳性率分别为47.27％和95.45％,与多数文献^[1～3]结果相仿。而且方法简单，结果肯定，可对常规石蜡切片进行回顾性研究。

　　p53基因的作用机制目前尚未清楚。国内外学者广泛地研究p53蛋白在多种恶性肿瘤中的表达和意义。目前胃癌组织中p53蛋白的高表达与胃癌生物学行为关系虽有报道，但其意义仍有较多争论。最近IchiyoshiY等^[2]报道p53蛋白高表达与淋巴结转移、侵犯深度、肿瘤部位相关。但目前大部分学者^[1,3,4,5]认为胃癌组织中p53蛋白的高表达与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、侵犯深度、组织分型、淋巴结转移和Borrmann分型等无关。本文110例资料多因素线性回归分析结果也未显示p53蛋白高表达与上述胃癌生物学行为指标有关。

　　PCNA表达阳性说明该细胞正处于增殖状态。近年一些学者发现PCNA表达与某些恶性肿瘤有密切关系。目前虽有少数学者认为其与胃癌生物学行为无关，但多数学者^[6～8]都认为PCNA表达指数高者与淋巴结转移、侵犯深度、组织分型有关。我们资料（表1）显示其与肿瘤部位有关，近端肿瘤PCNA指数高于远端肿瘤的PCNA指数（P＜0.05)。由此看来，PCNA的表达情况与胃癌生物学行为关系尚有待进一步研究。胃癌的预后与肿瘤侵犯深度、组织分型、淋巴结转移和Borrmann分型有关已为学者接受，本文结果也再次支持这一观点。PCNA是近年发展的原位检测细胞增殖活性的新型探针，表达于细胞周期的G1期，S期达高峰，G2～M期下降，其量的变化与DNA合成一致，能反映细胞的增殖活性。一般认为高表达者肿瘤恶性度高、预后差。本资料多因素Cox回归分析结果（表2）显示PCNA表达指数高者预后差（P＜0.05),而p53蛋白高表达与预后无关(P＞0.05)。国外学者^[4,5,7,8]多支持此观点。作者认为PCNA表达指数可作为判断胃癌预后指标之一。

　　致谢：病理科吴秋良副教授、中心实验室冯凯涛老师对本研究给予热情帮助，卫生学院柳青教授为本文进行资料统计分析，特此致谢。

　　基金项目：广东省卫生厅科研基金资助

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收稿日期：1998－10－15；修回日期：1999－02－04