大肠癌p53蛋白与PCNA表达的预后意义

临床与实验病理学杂志 1999年第3期第15卷 论著摘要

作者：庄小强　赖日权　孙桂华　王晓怀　袁世珍

单位：庄小强　赖日权　孙桂华　王晓怀　袁世珍（广州军区总医院消化科　510010）

关键词：结肠肿瘤；直肠肿瘤；蛋白质p53；增殖细胞核抗原；预后

　　分类号　R735.3　文献标识码　A

　　文章编号　1001-7399(1999)03-0192-01

　　大肠癌是常见的恶性肿瘤之一，近年来发现p53和PCNA在多种肿瘤中均有过度表达，并与肿瘤分化、转移有关。但对大肠癌预后国外仅有少数报道。我们应用免疫组化观察了p53和PCNA在大肠癌中的表达特征及其与预后的关系。探讨该指标对大肠癌表达的意义。

　　1　材料与方法

　　1.1　组织标本　61例大肠癌为广州总医院1976～1992年有5年随访资料的大肠癌手术存档石蜡标本，高、中、低(未)分化和粘液腺癌分别为13、29、12和7例。结肠镜及病理检查未发现明显异常的大肠粘膜活检标本15例。分别作常规HE染色、p53和PCNA免疫组化染色。

　　1.2　免疫组织化学染色　免疫组化染色用LSAB法^〔1〕。鼠抗人p53单抗DO7、鼠抗人PCNA单抗PC 10和LSAB K-9002均为Dako公司产品。p53工作浓度1∶50；PCNA抗体工作浓度1∶50。阳性对照为已知p53和PCNA阳性的乳腺癌标本。用PBS代替一抗作为阴性对照，每例随机计算1 000个分布清晰的上皮细胞，计算其阳性细胞的比率(LI)。

　　2　结果

　　2.1　正常大肠、大肠癌p53和PCNA表达　p53蛋白阳性染色主要位于细胞核，呈棕褐色，p53在正常大肠粘膜未发现阳性表达。大肠癌p53阳性率高达55.7%。PCNA蛋白阳性染色主要位于细胞核，呈棕褐色，正常大肠粘膜阳性12例，阳性指数(PCNA-LI)为15.12%±5.44%。大肠癌PCNA阳性50例，PCNA-LI(46.40%±26.50%)较正常粘膜明显增加(P＜0.05)。

　　2.2　p53和PCNA表达与大肠癌临床、病理特征的关系　p53蛋白和PCNA表达与大肠癌分化程度和Dukes分期有关(P＜0.05)。

　　2.3　大肠癌p53和PCNA的相关关系　经等级相关检验，r_s=0.579，P＜0.001，p53过度表达和细胞增殖有显著相关性。

　　2.4　p53和PCNA表达与大肠癌生存率关系　p53和PCNA在≤25%、25%～65%和＞65%三组阳性表达中，1年、2510120年生存率均未达到显著差异，而第5年生存率＞65%组均明显低于≤25%表达组(P＜0.05)。p53和PCNA-LI与生存期之间有明显负相关。

　　3　讨论

　　在人类肿瘤中抗癌基因p53是最常见的产生突变的基因，尤其频繁发生在大肠癌。本研究提示，正常大肠粘膜p53未见表达，而大肠癌显著表达。p53随分化程度的降低而升高，也与Dukes分期有关。国外学者报道p53蛋白过度表达在大肠癌为42%～67%，而正常大肠粘膜为0，我们的结果与之相符。

　　近年来发现PCNA研究对于大肠癌变过程诊断具有重要意义。PCNA具有DNA多聚酶δ辅助因子的功能，是一种细胞周期相关性核蛋白。在G₁中期浓度增加，S期早期达到高峰，S₂/M期逐渐下降。我们的研究表明正常粘膜PCNA阳性表达指数明显低于大肠癌，而大肠癌中，低(未)分化腺癌及粘液腺癌PCNA-LI显著高于高分化组。Dukes C期及Dukes D期PCNA-LI也明显高于Dukes A期患者。Tanaks等^〔2〕在149例早期大肠癌研究中，表明PCNA在肿瘤分化类型、浸润深度、淋巴结转移方面均提示非常显著差别，与我们结果一致，说明PCNA在评估大肠癌的发生发展中都是一项良好指标。

　　许多研究证实大肠肿瘤以及一些癌前病变其细胞增殖动力有改变。我们以61例大肠癌的p53和PCNA阳性结果进行等级分析表明，p53与PCNA均呈阳性表达者经等级相关检验(r_s=0.579，P＜0.001)，说明p53过度表达和细胞增殖有显著相关性。

　　参考文献

　　1，梁英杰，凌启波. 一种快速高敏感免疫组织化学染色法-LSAB法. 中华病理学杂志，1993；22：369

　　2，Tanaks S, Haruma K, Tatsuta S. Proliferating cell nuclear antigen expression correlates with the metastatic potential of submucosal invasive colorectal carcinoma. Oncology,1995;52:134～140

收稿日期：1998-12-07