肺癌组织中肿瘤浸润树突状细胞对预后的影响

中华肿瘤杂志 2000年第2期第22卷 临床研究

作者：龚选举　阎玉虎　吴建平

单位：龚选举（湖北省肿瘤医院病理科，武汉，430070)；阎玉虎（外科)；吴建平（湖北省肿瘤医院病理科，武汉，430070)

　　关键词： 肺肿瘤；肿瘤浸润树突细胞；预后

　　【摘要】　目的　研究肺癌组织中肿瘤浸润树突状细胞(TIDC)的浸润程度对预后的影响。方法将S-100蛋白作为TIDC的特异性标记物，应用SABC免疫学方法检测肺癌组织中TIDC的分布。结果38例肺腺癌中，TIDC显著浸润15例，5年生存率为60.0％；轻度浸润23例，5年生存率21.7%。44例鳞癌中，TIDC显著浸润18例，5年生存率61.1%；轻度浸润26例，5年生存率19.2%。经Log-rank检验，无论肺腺癌和鳞癌，TIDC显著浸润组和轻度浸润组的5年生存率之间差异有显著性。结论　肺癌组织中TIDC显著浸润者的预后明显好于轻度浸润者。

Tumor infiltrating dendritic cells in relation to prognosis of lung cancer

GONG Xuanju, YAN Yuhu, WU Jianping.

　　（ Pathology Department, Hubei Cancer Hospital, Wuhan 430070, China）

　　【Abstract】　Objective　To study the degree of infiltration of dendritic cells in lung cancer in relation to prognosis.Methods　S-100 protein as the marker of tumor-infiltraing dendritic cells (TIDC) was stained immunohistochemically in lung cancer specimens. The degree of infiltration was considered mild and marked according to the criteria reported by Furukawa. The survival rate was obtained by Log-rank test of the data.Result　sIn 15 of 38 adenocarcinomas, whose TIDC infiltration was marked, the five-year survival rate was 60.0%, while in 23 with mild TIDC infiltration, the five-year survival rate was 21.7% (P＜0.01) Quite similar data were obtained from 44 squamous-cell carcinomas. Significantly higer five-year survival rate (61.1%) was observed in those with marked TIDC than those with mild infiltration (19.2%).Conclusion　The degree of TIDC infiltration is positively correlated with the survival rate of lung carcinoma patients.

　　【Subject words】　Lung neoplasms;　Tumor infiltrating dendritric cells;　Prognosis

　　近年来，国外有关肿瘤浸润树突状细胞(tumor infiltrating dendritic cells，TIDC)在肿瘤组织中的浸润程度对肿瘤患者生存与预后影响的研究甚热^［1，2］，国内亦开始涉足这方面的研究^［3］。我们研究了肺癌组织中TIDC浸润的程度及对患者生存与预后的影响，现报告如下。

　　材料与方法

　　材料来源于1979～1993年间湖北省肿瘤医院手术切除的肺癌病例，共82例。其中腺癌38例，鳞癌44例。全部组织切片均为原发肿瘤病理切片。为便于分析比较，选择的病例在治疗方式及临床分期上均一致（T₂N₀M₀）。全部病例均获得随访及生存时间的统计。

　　对肿瘤组织中TIDC的标记采用免疫组织化学的方法，即S-100蛋白阳性的方法进行研究。由于TIDC内也存在S-100蛋白，因此，将S-100蛋白作为TIDC的特异性标记物^［4］。免疫学方法采用SABC法。首先切片脱蜡至水，然后通过3％H₂O₂于室温置5 min，以灭活内源性酶；经血清封闭组织后，依次滴加S-100抗体，室温下2 h；羊抗IgG室温下15 min，链霉亲霉素复合物（SABC）室温下15 min。每步后经PBS液反复冲洗，最后经DBM显色、封片。全部试剂采用武汉博士德生物公司提供的即用型试剂盒。S-100蛋白阳性标记的树突状细胞在肿瘤组织中的浸润程度，是依据Furukawa等^［5］提出的分级标准：0～20个阳性细胞为无～轻度浸润；＞20个为显著浸润(×400，10个高倍视野)。生存曲线是通过Kaplan-Meier方法获得。预后的因素通过Log-rank检验分析。

　　结果

　　1.TIDC的分布：S-100蛋白阳性标记的TIDC主要分布于肿瘤组织内和癌性间质中，散在分布，很少见于周围肺组织。这种细胞同肿瘤细胞紧密接触，呈褐黑色。其形态学上有一个不规则的核，胞浆呈分枝状突起，形似树突状，因此而得名树突状细胞（dendritic cells，DC）。

　　2.TIDC的浸润情况：82例肺癌中，TIDC显著浸润33例，占40.2%，其中腺癌15例，鳞癌18例。无～轻度浸润49例，占59.8%，其中腺癌23例，鳞癌26例。全组38例腺癌中，显著浸润15例，无～轻度浸润23例。其中高分化腺癌17例，显著浸润8例；低分化腺癌21例，显著浸润7例。44例鳞癌中，显著浸润18例，无～轻度浸润26例。其中高分化鳞癌20例，显著浸润9例；低分化鳞癌24例，显著浸润9例。

　　3.TIDC浸润与生存的关系：依据TIDC浸润的程度分为两组：无～轻度浸润组和显著浸润组。38例腺癌中，无～轻度浸润23例，存活最长5年，最短1年，平均存活3年，5年生存率21.7%；显著浸润15例，存活最长8年，最短2年，平均4.1年，5年生存率60.0％（χ²=6.50，P=0.01)。44例鳞癌中，无～轻度浸润26例，存活最长6年，最短1年，平均3.1年，5年生存率19.2%；显著浸润18例，存活最长9年，最短2年，平均4.8年，5年生存率61.1%(χ²=6.50，P=0.01)。我们对肺腺癌和鳞癌这两种不同的病理类型瘤组织内TIDC浸润对生存的影响进行了比较，结果显示，无论是显著浸润组或无～轻度浸润组，在鳞癌和腺癌二者之间差异均无显著性（显著浸润组：χ²=0.08，P=0.78；无～轻度浸润组：χ²=0.00，P=0.98）。

　　讨论

　　DC是目前已知功能最强的抗原提呈细胞。自从Steinman 70年代首次报道以来，DC的研究一直受到免疫学界的关注。90年代以后，由于DC的体外大量扩增获得成功，从而使DC的研究逐步成为免疫学中一个不断升温的热点^［3］。较多的研究发现，大部分实体瘤内的DC浸润程度与患者的预后有关。瘤内浸润的DC数量多，则患者的预后好；反之，则预后差。提示瘤内DC与肿瘤的发生、发展有密切关系。Tsujitani等^［6］研究了210例胃腺癌患者，结果表明，TIDC显著浸润的82例患者，5年生存率为60.4%；而轻度浸润的128例患者，5年生存率为18.8%。类似的结果也见于对结、直肠腺癌及食管癌的研究^［4］。Furukawa等^［5］研究了40例肺腺癌组织内TIDC的浸润情况，结果显示，显著浸润的22例患者，5年生存率为86.4%；而无～轻度浸润的18例患者，5年生存率为38.9%。本研究的结果显示，38例腺癌中，显著浸润15例，5年生存率为60％；无～轻度浸润23例，5年生存率为21.7%，经Log-rank检验，二者差异有显著性。44例鳞癌中，显著浸润的18例5年生存率为61.1％；无～轻度浸润的26例5年生存率为19.2%，经log-rank检验，二者差异有显著性。同时，本研究还对不同分化的肺腺癌和鳞癌组织中TIDC浸润的情况及对生存与预后的影响进行了分析。结果显示，38例肺腺癌中，高分化腺癌17例，其中显著浸润8例，5年生存率为62.5%；无～轻度浸润9例，5年生存率为33.3%。Log-rank检验，χ²=1.85，P=0.17，二者差异无显著性。而低分化腺癌21例中，显著浸润7例，5年生存率57.1%；无～轻度浸润14例，5年生存率为14.2%。Log-rank检验，χ²=4.68，P=0.03，二者差异有显著性。44例鳞癌中，高分化20例，其中显著浸润9例，5年生存率为66.7%；无～轻度浸润11例，5年生存率为27.3%。Log-rank检验，χ²＝2.98，P=0.08，二者差异无显著性。而低分化鳞癌24例中，显著浸润9例，5年生存率为55.6%；无～轻度浸润15例，5年生存率为13.3%。Log-rank检验，χ²=4.63，P=0.03，二者差异有显著性。因此，从本组研究结果看，TIDC显著浸润的肺腺癌和鳞癌病例，其生存和预后明显好于无～轻度浸润的病例。这点与Furukawa等^［5］的报道相一致。同时TIDC在不同分化的肺癌组织内浸润的程度对生存及预后亦有影响，TIDC在低分化癌中浸润的程度与预后有明显关系，而对高分化癌则影响不大。

　　关于DC参与肿瘤免疫的机理，据目前研究的资料提示，DC不能直接杀伤肿瘤细胞，但其最大特点是能够显著刺激初始型T细胞增殖。在机体的细胞免疫和体液免疫中起重要的调控作用^［3］。

　　关于实体瘤中TIDC的浸润程度及其对患者生存与预后影响的报道国内甚少。我们研究了82例肺腺癌和鳞癌中TIDC浸润对肺癌患者生存与预后的关系，结果表明，瘤组织内TIDC显著浸润的病例，其生存与预后要比轻度浸润者好，低分化癌尤为明显。在影响肿瘤患者预后的诸多因素中，TIDC的浸润是一个重要因素。

　　参考文献：

　　［1］　Schuler G, Steinman RM.Dendritic cells as adjuvants for immune-mediated resistance to tumor.J Exp Med, 1997,186：1183-1188.

　　［2］　Adema GJ,Hartgers F,Verstraten R,et al.A dendritic-cell-derived c-c chemokine that preferentially attracts naive T cell. Nature, 1997,387:713-718.

　　［3］　曹雪涛.树突状细胞的基础与临床研究新进展.中国免疫学杂志，1998,3：161-168.

　　［4］　王正昕.肿瘤浸润性树突状细胞的研究进展.国外医学免疫学分册, 1998,6：326-329.

　　［5］　Furukawa T,Watanabe S,Kodama T,et al.T-zone histiocytes in adenocarcinoma of the lung in relation to postoperative prognosis. Cancer, 1985,56:2651-2657.

　　［6］　Tsujitani S,Kakeji Y,Watanabe A,et al. Infiltration of dendritic cells in relation to tumor invasion and lymph node metastasis in human gastric cancer. Cancer, 1990,66:2012-2016.

收稿日期：1999-05-11