川芎嗪对肺癌患者外周血单个核细胞分泌IL-4、IL-6的影响

山东医药 2000年第18期第40卷 临床研究

作者：张春玲　肖伟

单位：张春玲（青岛医院第二附属医院　山东青岛266042）；肖伟（山东医科大学附属医院）

　　川芎嗪（TTMP）是活血行气中药川芎的主要有效成分，在治疗心血管疾病方面有肯定的疗效，而且毒副反应小。研究发现TTMP对正常小鼠和肿瘤小鼠脾淋巴细胞增殖反应有双向调节作用^［1］。本试验旨在探讨TTMP对正常人和肺癌病人PBMC分泌IL-4、IL-6的影响，以进一步了解其抗肿瘤作用的机理。

　　1　资料与方法

　　1.1　一般资料　选择17例健康成年人作为正常对照组，男13例，女4例；年龄42～70岁，中位数58岁；无心脑肝肾疾病。另取14例肺癌患者，男10例，女4例；年龄50～75岁，中位数61岁。病理证实为小细胞肺癌2例，鳞癌6例，腺癌5例，细支气管肺泡癌1例。按TNM分期标准^［2］，Ⅱb2例，Ⅲa7例，Ⅲb3例，Ⅳ2例。均为初诊患者，未接受过有关治疗。川芎嗪（TTMP）由北京第四制药厂生产。RPMI-1640为日本Nissiui制药株式会社产品。IL-4、IL-6试剂盒为美国Gemzyme公司产品。

　　1.2　方法　①标本的采集：清晨空腹抽取肝素抗凝静脉血10ml，分离PBMC，制备淋巴细胞悬液（浓度为1×107／ml），即于24孔培养板中，分别加入100μl细胞悬液。用药组每孔加入1ml药液100μl，使其终浓度为100μg／ml；对照组加入RPMI-1640100μl。两组均设3复孔，置CO₂培养箱中孵育72小时，收集上清液放于－70℃冻存待测。②上清液IL-4、IL-6的测定：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）。分别记录其在紫外分光光度计40pcm处的吸光度，以标准品的浓度为横坐标，以相应的吸光度值为纵坐标，制作标准曲线；然后以待测上清液样品的吸光度值在标准曲线上查出相当的浓度值。按计量资料进行统计学处理，采用t检验。

　　2　结果

　　2.1　正常人和肺癌患者PBMC分泌IL-4、IL-6测定　见表1。

　　表1　　两组PBMC上清液中IL-4与IL-6浓度对比分析（x±s）

　　2.2　TTMP对正常人及肺癌患者PBMC分泌IL-4、IL-6的影响　见表2。

表2　TTMP对PBMC分泌IL-4、IL-6的影响（x±s）

　　注：与正常组比较，^?P＜0.05，^??P＜0.01

　　3　讨论

　　Th₁、Th₂细胞为CD^＋₄的Th细胞的两个功能性亚群。Th1主要分泌IL-2，IF-N-r。Th2主要分泌IL-4、IL-6、IL-k等。因此，通常将IL-2、IL-N-r代表Th₁亚群，IL-4、IL-6代表Th₂亚群。由表1可见，肺癌患者PBMC分泌IL-4、IL-6明显高于正常对照组，P值分别＜0.05和＜0.01，说明肺癌患者PBMCTh₂类细胞因子占优势状态，这与Asselin-Paturel-C等^［3］的最新研究一致。研究资料表明，肺癌患者体内Th₂强势状态将引起宿主抗肿瘤细胞免疫发生偏离，抑制多种抗肿瘤免疫应答，保护肿瘤细胞免受特异性CTL的杀伤，促进肿瘤细胞的生长作用^［4］。因此，促进Th₁／Th₂逆转是目前抗肿瘤免疫治疗的研究热点。本试验用活血化瘀中药TTMP与肺癌患者PBMC共培养后，发现其IL-4、IL-6的浓度明显低于对照组（P＜0.05和0.01）。证明TTMP有促Th₁／Th₂逆转作用。由此看来，TTMP通过抑制Th₂来调节机体细胞免疫功能是其增强机体抗肿瘤作用机理之一。参考文献

　　1，刘锦蓉，强文安，毕松梅．川芎嗪对小鼠脾淋巴细胞增强反应的影响。华西医科大学学报，1995，26（2）：177～180.

　　2，吴怀中.肿瘤最新TNM分类和分期.中华肿瘤杂志，1998，20（5）：398.

　　3，Asselin-Paturel-C，Echakir-H，Carayol-G，et al.Quanti-tative analysis of Th1，Ths urel TGF-betal.Cytokine expression in tumor，TIL and PBC of non-smal cell lung Cancer patients.Int J Cancer，1998，11（1）：1～12.

　　4，张国安，刘小明，康德智，等.脑胶质瘤患者白细胞介素6和血小板促生长因子的变化.中华医学检验杂志，1996，19：1.

（2000-06-05收稿）