鼻咽癌家系外周血的EBV转化

中国病理生理杂志 2000年第10期第16卷 第七届肿瘤和第八届免疫专业委员会学术会议论文摘要

作者：曹利　谭国林　周鸣　李桂源

单位：湖南医科大学肿瘤研究所，湖南 长沙 410078

　　目的：作者新近用B95-8来源的EBV转化两个鼻咽癌家系的外周血B淋巴细胞，建立了永生化类淋巴细胞株。此方法简便，转化效率高，先用淋巴细胞分离液分离两个鼻咽癌家系的外周血B淋巴细胞，再用EBV浓缩液和环孢霉素同时作用于淋巴细胞，培养20 d左右可获得永生化的类淋巴细胞株。第一个家系共收集其成员外周血七例，有五个转化成功。第二家系共收集其成员外周血10例，全部转化成功。这一有效的稳定的转化方法为保存鼻咽癌标本资源积累了经验，并为深入研究鼻咽癌发病分子机制提供了有用的材料。方法：在EB病毒转化外周血的过程中，环孢霉素的作用至关重要。环孢霉素是一种能在G₀-G₁期之间选择性地抑制T淋巴细胞RNA聚合酶Ⅱ的免疫抑制剂，须与EBV同时加入才能有效地阻止T淋巴细胞对EBV的应答反应，防止已转化的B淋巴细胞受T淋巴细胞的攻击而退化。结果：EB病毒是一种γ疱疹病毒，人群中约有90%的人感染过EB病毒，多数人无症状感染。EB病毒一般感染B淋巴细胞和口咽部的上皮细胞，通过受体CD21进入宿主细胞后可自行环化以游离体的形式长期存在于宿主细胞核内，形成潜伏感染。体外实验证明EB病毒潜伏感染人外周血B淋巴细胞后可活化B细胞的细胞周期，促进静息期的B细胞转化为永生化大量增埴的类淋巴母细胞系(LCL)。LMP1是EB病毒的致瘤蛋白，LMP1可促进TNF族成员中CD40受体的表达，因此即使B细胞没有受到正常抗原或分裂源等信号的刺激也能活化CD40受体信号传导途径使B细胞大量增埴。另外，LMP1还可诱导BCL-2的表达，BCL-2的高表达阻止了细胞的凋亡，促进了EB病毒感染细胞的永生化。新近的研究证明LMP1还可通过Cyclin D诱导细胞进入细胞周期，促使B细胞增埴，形成类淋巴母细胞系。这些进展提供了EBV转化的理论依据。结论：鼻咽癌家系外周血的EBV转化的成功，为我们提供了永生化的类淋巴母细胞系，从而保存了人类的遗传资源，为探讨其分子发病学机制提供了有利的条件。

　　国家“八六三”高科技项目(102-10-01-05)；△ 国家“八六三”高科技项目负责人