转移抑制基因Kai1在前列腺癌中的表达

中华泌尿外科杂志 1999年第5期第20卷 论　著

作者：胡卫列　梅骅　李迎秋　何恢绪　李清荣　田野

单位：胡卫列、何恢绪、李清荣、田野(510010 广州，广州军区广州总医院)；梅骅(中山医科大学附属第一医院)；李迎秋(中山大学生物科学院)

　　关键词： 前列腺肿瘤,癌,转移抑制基因

　　【摘要】　目的　了解转移抑制基因Kai1蛋白在前列腺癌(PCa)中的表达。　方法　采用免疫组化LSAB法分别测定5例正常前列腺、10例前列腺增生症（BPH）和34例PCa(均为腺癌，临床C期或D期）新鲜前列腺组织中Kai1蛋白的表达。　结果　Kai1蛋白分布在腺上皮细胞膜的细胞与细胞连接部，正常前列腺和BPH的Kai1蛋白染色连续均匀一致，而在PCa则染色分布不连续，并且染色强度较BPH明显降低，差异有显著性(P＜0.01)。癌细胞Kai1蛋白染色强度与病理分级呈负相关(P＜0.05)，与临床分期无相关(P＞0.05)。　结论　Kai1蛋白表达下降可能预示PCa转移，成为临床判断PCa预后的分子指标。

　　Expression of metastasis suppressor gene Kai1 in human prostatic cancer　HU weilie,MEI Hua,LI Yingqiu,et al.Department of Urology,General Military Hospital of Guangzhou Command of PLA,Guangzhou510010

　　【Abstract】　Objective　To explore the expression of metastasis suppressor gene Kai1 in human prostatic carcinoma(PCa).　Methods　The expression of Kai1 protein in fresh prostate tissues from 5 normal controls, 10 benign prostatic hyperplasia (BPH) patients and 34 PCa patients (adenocarcinoma including C or D clinical stage) was examined by immuno-histochemical LSAB method.　Results　Kai1 protein was uniformly expressed on grandular cell membrane at cell-to-cell borders in normal and BPH prostate, but the staining became not continous in PCa, and the staining was significantly less than in BPH(P＜0.01) and correlated inversely to pathological grade (P＜0.05). No statistical correlation was found between the staining and clinical stage (P＞0.05).　Conclusions　The expression of Kai1 protein may be used as a new prognostic marker which indicates metastasis potential of prostate cancer.

　　【Key words】　Prostatic neoplasmas,Carcinoma,Metastasis suppressor gene

　　Kai1基因是近年来发现的一种新的肿瘤抑制基因^［1］，我们应用免疫组化方法研究34例前列腺癌组织中Kai1蛋白的表达情况，报告如下。

　　材料与方法

　　一、标本来源及处理

　　1996年1月～1998年1月，中山医科大学附属第一医院泌尿外科的34例前列腺癌(PCa)，均经直肠B超引导下穿刺前列腺抽取组织标本，病检确诊。年龄32～89岁，平均68岁。按Jewett-Whitmore-Prout方案进行临床分期^［2］：C期15例，D期19例。按WHO方案进行病理分级^［3］：低分化腺癌15例，中分化腺癌8例，高分化腺癌11例。5例正常前列腺组织来源于尸检。10例前列腺增生(BPH)组织来源于经耻骨上前列腺摘除术。

　　所有新鲜组织标本立即置于-80℃液氮贮存。

　　二、方法

　　将组织标本在低温恒冷切片机中切成6μm厚的切片，丙酮固定10分钟，空气干燥后采用LSAB法进行免疫组化染色^［4］。工作浓度为1:200，DAB显色。PBS替代一抗作为阴性对照。所有组织标本同时切片HE染色，经病理确诊。

　　三、结果判断

　　染色阳性呈棕褐色，分布在腺上皮细胞膜上。每张切片随机选择三个视野，计算阳性腺上皮细胞占腺上皮细胞总数的百分率，并按阳性细胞百分数将染色程度分为：(1)丰富：阳性细胞占50%～，(2)降低：阳性细胞占5%～50%；(3)阴性：阳性细胞占＜5%。

　　四、统计学方法

　　采用卡方检验，P＜0.05、P＜0.01分别为差异有显著性和非常显著性。

　　结　果

　　一、Kai1阳性染色的分布及特点

　　正常前列腺及BPH腺上皮细胞膜阳性染色均匀一致，主要分布在细胞与细胞的连接部，胞核及胞浆几乎无阳性染色，基质有少量阳性染色。

　　PCa细胞膜上阳性染色分布不均,主要分布在细胞与细胞的连接部,但染色间断,周围组织也有少量Kai1阳性染色。本组10例BPH均为染色丰富,34例PCa中21例(62%)染色降低,13例(28%)染色阴性。即在BPH中Kai1为高表达,而在PCa中为低表达甚至无表达,两者差异有非常显著性(P＜0.01)。

　　二、Kai1表达与前列腺癌病理分级及临床分期的关系

　　34例PCa的病理分级：低分化组15例、中分化组8例和高分化组11例。各组Kai1蛋白染色降低分别为4例(26%)、7例(86%)和10例(91%)，染色阴性分别为11例(73%)、1例(12%)和1例(9%)。中分化组与高分化组之间差异无显著性(P＞0.05)，低分化组与中、高分化组之间差异有显著性和非常显著性(P＜0.05,P＜0.01)。

　　34例PCa的临床分期：C期15例、D期19例，两组Kai1蛋白染色降低分别为11例(73%)和10例(53%)，染色阴性分别为4例(27%)和9例(47%)，卡方检验两者差异无显著性(P＞0.05)。

　　讨　论

　　Kai1基因是1995年由Dong等^［1］首先发现的一种新的肿瘤转移抑制基因。人体许多组织都有Kai1蛋白表达，尤其在前列腺中含量丰富。在正常前列腺及前列腺增生组织中Kai1高表达，而所有的转移性前列腺癌组织及部分原发性前列腺癌组织中Kai1表达则降低^［5］。在胰腺癌、非小细胞性肺癌中Kai1表达也降低^［6,7］。本实验结果显示，正常前列腺组织和BPH中Kai1表达丰富，而在前列腺癌中Kai1表达降低或无表达，与国外报道基本一致。

　　按前列腺癌病理分级分析，低分化的前列腺癌组织Kai1表达较中、高分化者明显下降，即恶性程度高的前列腺癌，其Kai1表达明显下降，提示Kai1表达与前列腺癌病理分级之间呈负相关。

　　正常Kai1蛋白位于细胞膜上，参与调节细胞间的粘附^［8］。正常前列腺上皮细胞Kai1蛋白表达丰富，均匀一致分布在细胞与细胞连接处。当前列腺组织发生癌变，尤其是恶性程度增高时，其Kai1蛋白表达明显下降，并且细胞间的Kai1蛋白表达中断，使癌细胞间的粘连降低松散，导致癌细胞容易脱离组织发生转移。提示Kai1表达的下降可以作为判断前列腺癌预后的指标。

　　按前列腺癌临床分期分析，C期与D期前列腺癌Kai1表达差异不明显。而国外报道Kai1表达与前列腺癌临床分期呈负相关^［5］，其原因可能与选择病例不同有关。国外的病例同时包括B期(Kai1高表达)，而本组病例均为晚期。说明Kai1蛋白表达在未转移前列腺癌为高表达，在转移性前列腺癌为低表达或无表达，显示Kai1可作为前列腺癌预后的指标，对临床预测前列腺癌发生转移有一定的指导意义。

　　*本课题受广东省自然科学基金项目赞助

　　参考文献

　　1　Dong JT, Lamb PW, Rinker-schaeffer CW, et al. Kai1, a metastasis suppressor gene for prostate cancer on human chromosome 11p11.2. Science，1995,268∶884-886.

　　2　马乃清, 孔祥田, 邹万忠. 前列腺癌的病理诊断.北京医科大学泌尿外科研究所年报, 1996,21-27.

　　3　陈忠年,沈铭昌,郭慕依.实用外科病理学.第1版.上海:上海医科大学出版社,1997,465-466.

　　4　梁英杰，凌启波.一种快速高敏感的免疫组织化学染色方法-LSAB法.中华病理学杂志, 1993，22∶369-370.

　　5　Dong JT, Suzuki H, Pin SS, et al. Down-regulation of the Kai1 metastasis suppressor gene during the progression of human prostatic cancer infrequently involves gene mutation or allelic loss. Carcer Res， 1996,56∶4387-4390.

　　6　Guo XZ, Friess H, Graber HU, et al. Kai1 expression is up-regulated in early pancreatic cancer and decreased in the presence of metastases. Cancer Res，1996,56∶4876-4880.

　　7　Adachi M, Taki T, Leki Y, et al. Correlation of Kai1/CD82 gene expressison with good prognosis in patients with non-small cell lung cancer. Cancer Res,1996,56∶1751-1755.

　　8　Jean Marx. New clue to prostate cancer spread. Science, 1995,268∶799-800.

(收稿：1998-08-31　修回：1999-01-29)