前列腺癌中p53和p16蛋白的表达及其临床病理学意义※

齐鲁肿瘤杂志 1999年第1期第6卷 基础与临床研究

作者：唐卫华　汪筱娟　罗道春　李利　刘文君

单位：唐卫华、汪筱娟、罗道春、刘文君：：济南市(250012)　山东医科大学附属医院病理科； 李利：曹县(274400)　山东曹县人民医院病理科

关键词：p53　p16　前列腺癌　免疫组织化学

　　【摘　要】　目的　探讨抑癌基因在前列腺癌组织中的表达及临床意义。方法　应用免疫组织化学方法，检测25例前列腺癌中p53和p16基因蛋白产物的表达。结果　p53蛋白阳性率为32%(8/25)，明显高于良性前列腺增生(P＜0.05)，并在低分化肿瘤中表达高(P=0.0403)；在临床分期Ⅲ～Ⅳ期癌中表达升高(P＜0.05)。p16的失活率44%(11/25)，也是低分化组高于高分化组(P＜0.05)。并发现4例低分化癌中有p53和p16共同异常。结论　p53和p16基因的异常表达均与前列腺癌的形成和恶性程度有关，但两者之间是否具有协同作用尚待进一步证明。

Expression of p53 and p16 protein in prostatic adenocarcinoma

　　and their clinical pathological significance

　Tang Weihua, Wang Xiaojuan, Luo Daochun, et al.

　　Department. of Pathology,The Affiliated Hospital, Shandong Medical University, Jinan 250012

　　【Abstract】　Objective　To study the expression and significance of antioncogene p53 and p16 in prostatic adenocarcinoma.Methods　Protein products of p53 and p16 were detected in 25 patients with prostatic adenocarcinoma by immunohistochemical method.Results　P53 protein cxpression was higher in low differentiated group than that in high-middlegroup(P＜0.05),higher in late clinical stages than in early, there was no mutation in 15 cases with BPH.P16 protein deletion rate was 44%(11/25), was higher in low differentiated group than that in well differentiated group. (P＜0.05).4 cases with low diferentiated carcinoma showed expression of p53 and deletion of p16.Conclusion　Abnormal p53 and p16 gene was correlated with the malignancy of prostatic adenocarcinoma, whether p53 and p16 gene were cooperated needs to be further studied.

　　【Key Words】　P53　P16　Prostatic adenocarcinoma　Immunohistochemistry

　　应用免疫组织化学方法检测抑癌基因p53和p16蛋白产物在前列腺癌中的表达情况，以了解国人该肿瘤中有无两种基因的改变，及其与肿瘤临床病理特点之间的关系。

　　 1　材料与方法

　　15例良性前列腺增生症(benign prostate hyperplasia, BPH)、25例前列腺癌均为1980年以来山东医科大学附属医院收检的穿刺或手术标本。全部标本经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋、切片，厚5μm。25例前列腺癌中，年龄54～85岁，60～79岁者共21例(84%)。有23例(92%)主要症状为进行性排尿困难，7例伴尿急、尿频，1例伴血尿。查体发现17例(68%)前列腺Ⅲ度肿大，表面呈不规则结节状，质硬、中央沟消失，8例浸润膀胱壁。依据肿瘤组织学分为高分化(9例)、中分化(8例)和低分化(8例)三级。

　　p53蛋白突变型抗体和p16蛋白单克隆抗体均为Sigma公司产品，其余试剂为博士德(武汉)公司即用型SABC法试剂盒，操作步骤按其说明书(略)。阳性对照为该公司提供已知的阳性肿瘤组织切片，阴性对照为PBS代一抗。p53染色以核内出现棕黄色为阳性，p16以胞浆或核内出现棕黄色为阳性。

　　统计处理应用χ²检验和四格表确切概率法。

　　2　结果

　　2.1　p53蛋白在BPH和前列腺癌中的表达　p53蛋白在15例BPH中无表达；25例前列腺癌中8例阳性(32%)，两者比较差异显著(P＜0.05)。

　　p53蛋白表达在低分化组高于中分化和高分化组，高分化9例中2例阳性，中分化8例中1例阳性，低分化8例中5例阳性，总阳性率为32%(8/25)。低分化组阳性率分别与高、中分化比较，前者P＜0.05，后者P＝0.0403。

　　前列腺癌TNM分期中Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ期的阳性例数分别为2/15、3/4及3/6，总的阳性率为32%(8/25)。Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期比较差异显著，P＜0.05。

　　2.2　p16在前列腺癌中的表达　p16蛋白在25例前列腺癌中阳性率为56%(14/25)，其中高分化、中分化及低分化的阳性例数分别为7/9、5/8及2/8，低分化组阳性率与高分化比较差异显著，P＜0.05。

　　2.3　p16和p53蛋白表达之间的关系　p53阳性的病例中有4例表现p16共同阳性，其中2例为高分化癌，中低分化各1例。在p16蛋白阴性(失活)而p53阳性的4例中全部为低分化癌，统计处理p16和p53蛋白之间无相关性。

　　 3　讨论

　　抑癌基因p53的蛋白产物主要生化功能是控制转录因子，其突变后成为肿瘤形成和发展的重要因素^［1］，免疫组化方法即可检测到这种突变型^［2］，以往研究已发现p53蛋白表达与人体多种肿瘤的分化程度，浸润、转移及临床分期相关，但在前列腺组织中研究较少^［3］。本组结果可以看出p53蛋白表达在前列腺癌中明显高于BPH，分化越差表达越高，在晚期肿瘤中表达高于早期阶段。与在人体其他肿瘤中的研究结果相似。进一步提示p53基因突变不仅参与前列腺癌的形成，也对其恶性程度甚至浸润转移能力有影响。p53蛋白的免疫组化检测有助于估计前列腺癌的预后。

　　p16蛋白是多肿瘤抑制基因(MTS₁)的产物，参与细胞周期因子的调节，抑制细胞由G₁期进入S期，故具有抑制肿瘤生长的作用^［4］。其失活将会促进肿瘤生长，已有研究发现p16失活的肿瘤细胞生存时间延长，恶性程度增高、转移能力增强^［5，6］。本组结果显示p16蛋白在高分化组表达明显，而失活多发生在低分化组(P＜0.05)。说明p16蛋白在前列腺癌的形成中起一定作用。研究表明p16基因改变多为纯合子缺失、DNA异常甲基化，两种情况均无蛋白产生，所以免疫组化阳性结果代表了p16基因异常的情况^［7］。也就是说p16基因的异常对前列腺癌的形成和分化均有影响，免疫组化可做为临床较实用手段。

　　本组还发现p53阳性而p16阴性的4例均为低分化前列腺癌，提示两种基因的异常在前列腺癌的形成和发展中可能存在协同作用。也有报道称p53蛋白可通过调节RB蛋白的活性来影响p16的表达^［8］，有关这方面的工作还需要扩大样本量进一步研究。

　　※ 本课题为山东省科委科研基金资助项目

　　参 考 文 献

　　1　Lawrence A.Donehower.Effects of p53 mutation on tumor progression. Bioch Biophys Acta, 1996,1242:71.

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　　3　曹文辉，罗道春，林毓琴，等.前列腺癌p53基因突变的研究.山东医科大学学报,1997,35(3)：188.

　　4　Nishikawa R,Frank BF,Hong Lin, et al. Loss of P16INK4A expression is frequent in high grade gliomas. Cancer Res, 1995,55:1941.

　　5　Reed JA,Loganzo FJR.,Christopher RS.et al. Loss of expression p16/cyclin-dependent kinase inhibitor 2 yumor suppressor gene in melanocytic lesions correlate with invasive stage of tumor progression. Cancer Res, 1995,55:2713.

　　6　Shapiro GI,Rollins BJ.P16INK4A as a human tumor suppressor. Bioch Biophys Acta, 1996,1242:165.

　　7　Geradts J, Kratzkc RA,Gloria A,et al. Immunohistochemical detection of CDKN2/MTS1 product P16IHK4A in archival human solid tumors. Cancer Res, 1995,55:6006.

　　8　Gruis NA,Jane WF,Lin QY, et al. Genetic evidence in melanoma and bladder cancer that p16 and p53 function in peparate-pathway of tumor suppression. Am J Pathol, 1995,146:1199.