肾癌及膀胱癌患者检测外周血可溶性白介素2受体水平的意义

　　第四军医大学学报1999年第20卷第10期

王禾　刘悦　刘佃成　汤群辉　辛建国　于茂生

　　摘　要　目的: 探讨肾癌及膀胱癌患者外周血中可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)表达及意义.方法： 采用ELISA双抗体夹心法检测24例膀胱癌、15例肾癌，20例正常对照外周血中sIL-2R水平.结果： 肿瘤患者sIL-2R水平显著高于正常(P＜0.001).虽然所有肿瘤患者sIL-2R水平均升高，但其中肿瘤小、病理级别低者，sIL-2R水平表现较低的趋势.结论： 血清sIL-2R能够反映机体抗肿瘤细胞免疫活性水平的高低；测定血清sIL-2R水平可监测早期复发的肿瘤，并可作为肾癌、膀胱癌患者病期及预后判断的重要指标.

　　关键词：可溶性白细胞介素2受体　泌尿系肿瘤　ELISA

　　0　引言

　　可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)是最近几年发现的一种重要的免疫抑制因子，它与白细胞介素2(IL-2)介导的免疫反应及一些疾病病情密切相关^［1］.为探讨肾癌及膀胱癌患者外周血中sIL-2R表达及意义，我们采用两种识别不同表位的小鼠抗人IL-2R单克隆抗体，通过ELISA双抗体夹心法对24例膀胱癌、15例肾癌、20例正常对照进行外周血sIL-2R定量研究.

　　1　材料和方法

　　1.1　材料　膀胱癌患者24例，肾癌患者15例,其中男27例，女12例.均经活检和术后病理证实. 20例正常对照取自本院健康献血员.包被抗体Wu69小鼠mAb，购自武汉生物制品研究所. 抗IL-2R小鼠mAb aM47.1由本校免疫学教研室从澳大利亚引进的杂交瘤制成腹水，并以辣根过氧化物酶标记，标准分泌sIL-2R的HuT-102B2细胞系亦由澳大利亚引进，用做阳性标准品.阴性血清由PBMC-1640培养液制备.

　　1.2　方法　外周血可溶性IL-2受体测定采用ELISA双单克隆抗体夹心法. wu69 McAb包被40孔ELISA板，100 μL/孔，4℃，72 h. pH 7.2 PBS-Tween (0.5 mL/L)洗涤，10 mL/L BSA-PBS封闭，350 μL/孔，37℃，2 h. 将HuT-102B2上清液及PBS1640培养液，癌症患者血清及正常健康对照血清分别加至ELISA板，100μL/孔，37℃，2 h. 洗涤5 min 3次. 每孔加入100 μL HRP标记 AM47.1 mcAb，37℃，2 h. 洗涤，加入ABTS (Sigma)底物液，100 μL/孔，37℃，40 min，每孔加入50 mL NaF (2 g/L)终止反应，测A值(波长410 nm).

　　2　结果

　　39例癌症患者外周血sIL-2R水平A值为0.4333±0.1265 (0.20～0.80)，20例正常对照A值为0.1610±0.0546(0.08～0.22)，经t检验两组sIL-2R水平相差显著(P＜0.001).癌症患者外周血sIL-2R水平明显高于正常对照组.

　　24例膀胱癌患者按其肿瘤大于2 cm及小于2 cm分为两组，两组的A值分别为0.3218±0.0821和0.5724±0.1261,两组间有显著性差异(P＜0.001).肿瘤小于2 cm组A值反而增高.将每组按肿瘤的病理分级排列，小于2 cm组病理Ⅰ级A值为0.32,Ⅱ级为0.44, Ⅲ级为0.45，大于2 cm组A值分别为0.24, 0.33和0.33.随着肿瘤病理分级的上升，sIL-2R水平（A值）有升高的趋势，但各组间差异不显著.

　　3　讨论

　　免疫监视功能低下和细胞因子网络及其受体间调节失控在肿瘤发病学中的作用已引起重视^［2］. iL-2是T细胞生长因子，具有维持T细胞增殖，促进自然杀伤细胞活性，诱生LAK细胞及促进B细胞分泌抗体的作用.由于IL-2的功能必须经IL-2R介导，故T细胞表面是否有sIL-2R表达是IL-2发挥作用的关键. sIL-2R是活化淋巴细胞膜上IL-2受体(mIL-2R) α链(p55)成分，可由细胞膜释放进入循环或肿瘤培养上清液中. sIL-2R是一种重要的免疫抑制物质，可与mIL-2R竞争性结合IL-2^［3～5］.现已证实sIL-2R有三种类型，p55蛋白(Tac)与p75蛋白分别为低亲合力受体和中等亲合力受体，p55和p77共同形成高亲合力受体.静止的T细胞表达p75，p55则表达于活化的T细胞. 一般认为IL-2的促T细胞增殖作用由高亲合力受体介导. iL-2与高亲合力受体结合后，所形成的复合物进入细胞内，这种内化作用与T细胞的激活密切相关，而内化作用是由p75介导的. iL-2与低亲合力受体p55结合不能内化. p55和p75所形成的高亲合力受体不是由两个亚基共同组成一个结合部位，而是各自与IL-2的不同部位结合，由于有两个位点与IL-2结合，使其亲合力大大增加.正常血清、尿液中存在有微量的sIL-2R，但在白血病、淋巴瘤、艾滋病及某些实体肿瘤患者中显著增高，并可随病情好转而下降^［3,4］.

　　本实验结果显示癌肿患者血清中sIL-2R水平明显高于对照组，肿瘤小、病情轻者，sIL-2R水平已明显升高，随病情加重继续升高，但到肿瘤晚期则不再升高，甚至下降，这与文献［6,7］报道的结果一致.这一结果支持sIL-2R为机体对肿瘤反应的产物的理论，血清sIL-2R水平增高是癌细胞诱发机体免疫反应的结果.因此，可根据这一特点来检测早期复发的肿瘤，并可作为病期及预后判断的重要指标.

　　关于实体肿瘤患者血清sIL-2R水平升高的机理目前尚不清楚.一般认为，sIL-2R水平与肿瘤所致的免疫反应有关，而非肿瘤本身直接引起.肿瘤可致体内激活的淋巴细胞增多，sIL-2R释放增加，以致血sIL-2R水平升高^［5］.也有人推测sIL-2R水平升高与瘤体内的浸润淋巴细胞增加有关^［8］. sIL-2R水平增高常伴CD4/CD8比值降低和NK细胞活性降低^［9］.这类肿瘤患者血清sIL-2R异常升高，可与mIL-2R竞争性地结合IL-2，中和活化T细胞周围的IL-2，导致机体免疫功能严重降低^［3］，使肿瘤逃避宿主免疫反应.

　　作者简介：王　禾，男，1961-07生，辽宁省抚顺市人，汉族.1983年第四军医大学毕业. 副教授，科主任，博士. 发表论文30篇.电话：(029)3375317

　　作者单位：第四军医大学西京医院泌尿外科，陕西西安 710033

　　参考文献

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　　2 Rovelli F, Lissoni P, Barni S et al. Increased level of soluble IL-2 receptor in advanced solid tumors: a preliminary study. Tumori, 1988; 74(6):633-637

　　3 富　宁，朱　讯. 可溶性IL-2受体及其生物学意义.国外医学免疫学分册，1991; 12(5):225-228

　　4 富　宁, 王　莉, 杨贵贞.单克隆与多克隆双抗体夹心法测定血清可溶性IL-2受体.中国免疫杂志,1991;7(5):278-281

　　5 Marino P, Cugno M, Preatoni A et al. Increased levels of soluble IL -2 receptor in serum of patients with lung cancer. Br J Cancer,1990; 61(3):434-435

　　6 Matsumoto T, Furukawa A, Sumiyoshi Y et al. Serum levels of soluble interleukin-2 receptor in renal cell carcinoma. Urology, 1998; 51(1):145-149

　　7 温儒民, 谢叔良. 可溶性白细胞介素2受体在膀胱癌患者中的表达及其作用机理.中华肿瘤杂志, 1996; 18(3):224-226

　　8 Lai KN, Ho S, Leung JC et al. Soluble interleukin-2 receptor in patients with nasopharyngeal carcinoma. Cancer, 1991;67(8):2180-2185

　　9 Diamantseein T,Osawa H, Mouzaki A et al. Regulation of interleukin-2 receptor expression and receptor release. Mol Immunol, 1986; 23(11):1165-1172