乳腺癌DNA含量与癌基因蛋白表达的关系
临床与实验病理学杂志 1999年第2期第15卷 论著摘要
作者:李新功 姜辉 李爱英 丁洪基
单位:李新功 姜辉 李爱英 丁洪基(山东省胜利石油管理局中心医院病理科,东营 257034)
关键词:乳腺肿瘤;癌基因蛋白质类;DNA分析
中国图书分类号 R737.9;R392.31
文献标识码 A 文章编号 1001-7399(1999)02-0184-02
1 材料和方法
1.1 材料 以1987~1997年收检,进行过c-erbB-2、p53、nm23、PCNA免疫组织化学检查的82例乳腺癌为观察分析对象,其中包括浸润性导管癌63例、浸润性小叶癌4例、髓样癌7例、乳头状癌3例、粘液腺癌5例,均为女性患者。
1.2 方法
1.2.1 DNA图像分析 常规石蜡切片,Feulgen染色,Olympus VANOX显微镜10×40倍视野下选取目标,应用CMIAS-008病理图像分析仪,测量淋巴细胞积分吸光度、乳癌细胞积分吸光度,计算DNA指数(DI,乳癌细胞与淋巴细胞DNA含量的比值),打印DNA倍体直方图,统计各例>5CEE(5倍体超出事件)数量。
1.2.2 免疫组织化学检查 微波修复抗原,S-P法进行免疫组织学标记,检测c-erbB-2、p53、nm23、PCNA。抗体及试剂盒均为Zymed及Maxim产品,购自迈新公司。抗体均为加强型单克隆抗体。阳性细胞<20%为弱阳性,20%~50%为阳性,>50%为强阳性。
2 结果
见表1。nm23阳性61例,其中48例为整倍体肿瘤。
表1 乳腺癌DNA含量与c-erbB-2、p53、nm23、PCNA表达的关系
|
c-erbB-2 |
|
nm23 |
|
p53 |
|
PCNA |
- |
+ |
- |
+ |
- |
+ |
- |
+ |
n |
34 |
48 |
|
21 |
61 |
|
44 |
38 |
|
7 |
75 |
DI |
1.48±0.74 |
2.14±0.46 |
|
2.01±0.72 |
1.71±0.44 |
|
1.82±0.27 |
1.94±0.86 |
|
1.81±0.96 |
2.67±0.48 |
t |
2.945 |
|
|
2.262 |
|
|
0.878 |
|
|
4.096 |
P |
<0.01 |
|
|
<0.05 |
|
|
>0.05 |
|
|
<0.01 |
>5CEE |
12.16±6.25 |
22.93±14.00 |
|
18.16±12.58 |
13.28±11.77 |
|
21.50±11.45 |
26.33±18.52 |
|
10.96±17.36 |
28.18±19.22 |
t |
4.194 |
|
|
1.611 |
|
|
1.441 |
|
|
2.283 |
P |
<0.01 |
|
|
>0.05 |
|
|
>0.05 |
|
|
<0.01 |
3 讨论
随着图像分析技术的开发,细胞核DNA含量测定将逐渐用于临床病理工作〔1,2〕。肿瘤细胞DNA含量常不同于正常细胞〔3〕。细胞DNA含量及分布的异常代表了核染色质数量和结构发生的改变。这种改变不但加速了细胞分裂增殖,同时导致细胞内特异性多肽和蛋白的合成失败,使细胞不能从增殖状态转变为分化状态。
在正常情况c-erbB-2基因处于非激活状态,参与调节正常细胞的生长、分化和分裂。当受某些因素影响激活,则具有肿瘤转化活性。其在乳腺癌中的过度表达与癌的分化、组织学类型、淋巴结转移及预后有关。本组研究发现,c-erbB-2阳性病例较阴性者DNA指数DI及>5CEE值均高,表明DNA分析结果与c-erbB-2检测同样对判别肿瘤恶性程度、病人预后有重要价值。
nm23是新近发现的转移抑制基因〔4〕,有nm23-H1和nm23-H2两个亚型,可通过参与调节细胞内微管系统的状态而抑制癌转移。nm23表达程度与淋巴结转移之间有非常显著的负相关性。本组研究显示,nm23阳性表达的病例,大多为整倍体肿瘤。这对说明nm23表达阳性病例具有相对较好预后的原因有一定意义。
p53是一种重要的抑癌基因,有野生型和突变型〔4〕。正常野生型p53有抑制细胞恶性转化的功能,突变后变为致癌基因,具有促进细胞恶性转化的作用。根据观察,p53蛋白表达与患者年龄、肿瘤体积、淋巴结转移、坏死等无关,与乳腺癌组织分化程度有关,组织学分级越高,其表达越强。DNA图像分析结果未显示p53不同表达之间存在差异。
PCNA又称周期素,是真核细胞DNA合成所必须的核蛋白,参与DNA合成的调节〔3〕,在静止细胞含量很少,在G晚期细胞核中表达开始增加,S期达到高峰,是判断细胞增殖状态的很好标记。乳腺癌组织分化程度越低,PCNA表达程度越高。DNA含量测定作为直接反映细胞内核酸代谢情况的指标,与肿瘤性质、病人预后有关。本组研究显示,DNA指数DI及>5CEE在PCNA阳性病例较阴性病例为高,证明二者在判别细胞增殖情况方面的一致性。
研究表明,DNA含量与c-erbB-2、nm23、PCNA等的表达有重要关系,综合各种检查的结果,对评价乳腺病变,特别是乳腺癌的预后,比单一因素评价,具有更可靠的价值。
参考文献
1 Carey FA. Measurement of nuclear DNA content in histological, and cytological specimens:principles and applications. J Pathol,1994;172:307
2 Takahashi Y, Takenaka A, Ishiguro T et al. Inatratumal DNA heterogeneity correlated with lymph node involvement and surgical staging in epithelia ovarian cancer by flow cytometry. Cancer,1994;73:3011
3 Altomas S, Lipponen P, Syrjanen K. Prognostic value of cell proliferation in breast cancer as detemined by proliferating cell nuclear antigen (PCNA) immunostaining. Anticancer Res,1992;12:1281
4 Leal CB, Schmitt FC, Bento MJ et al. Ductal carcinoma in situ of breast: Histologic caterization and its relationship to ploidy and immunohistochemical expression of hormone receptors, p53,and c-erbB-2 potein. Cancer,1995;75:2123
收稿日期:1998-06-29