Bcr/abl嵌合基因表达与慢粒白血病细胞积累

中国病理生理杂志 2000年第10期第16卷 第六届受体和信号转导专业委员会学术会议论文摘要

作者：韩金祥　张长铠

单位：山东省医药生物技术研究中心，山东 济南 250062； 山东大学生命科学院

　　目的和方法：bcr/abl嵌合基因是定位于人9号染色体9q34上的c-abl基因和22号染色体22q11上的bcr基因因t(9:22)易位，使相应断裂的基因发生融合所形成。它是ph染色体的分子基础，在慢粒白血病(CML)发病中起重要作用。Bcr/abl嵌合基因编码具酪氨酸激酶活性的蛋白(P210)。这种蛋白与细胞信号传导蛋白相互作用，扰乱细胞信息传递过程，使CML细胞增殖和分化失控。为了探讨bcr/abl嵌合基因表达致慢粒白血病细胞积累的发病机制，设计并合成针对bcr/abl嵌合基因的反义寡脱氧核苷酸(asODN)及硫代反义寡脱氧核苷酸(s-asODN)，利用MTT法、［³ H］-TdR掺入技术、TR-PCR技术、免疫组织化学技术、电子显镜技术等观察asODN对K562细胞株形态学、DNA变化、bcr/abl嵌合基因转录和表达、细胞存活、细胞DNA合成等的影响。结果：①各种asODN对CML细胞存活都有显著的抑制作用，其硫代asODN效果最好，最大抑制率达64.7%。②各种asODN对CML细胞的DNA合成有是显著的抑制作用，其硫代asODN效果最好，最大抑制率达85.8%。③各种asODN对CML细胞bcr/abl嵌合基因转录有显著的抑制作用， 48 h时，硫代asODN效果最好，s-anti-b3a2和s-anti-myb联合用药几乎完全抑制bcr/abl的转录。④各种asODN对CML细胞的P210表达有显著的抑制作用。⑤各种asODN对CML细胞的形态学有显著的影响，电子显微镜发现有大量的凋亡小体出现。⑥DNA电泳显示：asODN对CML细胞作用后胞内DNA有裂解，电泳有细胞凋亡特征的梯形条带出现，其中联合作用的效果最明显。结论：bcr/abl嵌合基因不但通过P210蛋白使CML细胞信息传导紊乱，细胞生长失控，而且bcr/abl嵌合基因抑制CML细胞的凋亡，通过抑制bcr/abl嵌合基因的表达既能抑制CML细胞的增殖，也能解除CML细胞凋亡的抑制。

　　山东省自然科学基金资助(Z97c01003)