卵巢癌独特型抗体疫苗诱导小鼠细胞免疫体外实验研究

中国免疫学杂志 1999年第11期第15卷 临床免疫学

作者：王建六　钱和年　冯　捷　崔　恒　李小平　付天云

单位：北京医科大学人民医院妇科肿瘤中心，北京 100044

　　中国图书分类号　R737.31

　　卵巢癌是最为棘手的妇科恶性肿瘤，其早期诊断困难，手术后易复发，化疗易耐药，5年生存率仅30%左右，因此，许多学者对卵巢癌的主动免疫治疗和预防进行了深入研究。近年来，对肿瘤独特型抗体的研究表明，抗独特型抗体可以模拟肿瘤抗原与相应的抗体起作用^［1，2］，但在诱导细胞免疫方面研究不多^［3］。本研究用卵巢癌内映象独特型抗体6B11免疫杂交一代小鼠BCF1，观察免疫小鼠淋巴细胞体外对卵巢癌细胞的作用，探讨6B11作为卵巢癌疫苗的可能性。

　　1　材料与方法

　　BCF1小鼠，6～8周龄，6B11抗独特型抗体为本室自行制备^［4］，免疫部位为皮下多点注射；免疫剂量：初次免疫为100μg，加强免疫为50μg和30μg，分别与等量的KLH偶联，初次免疫加完全氟氏佐剂，加强免疫用不全氟氏佐剂，对照组用正常鼠血清IgG，末次免疫后7　d处死小鼠，取脾脏淋巴细胞，作为效应细胞，与卵巢癌细胞SKOV3以100∶1、50∶1和25∶1的比例混合，体外培养，观察效靶细胞的相互作用，用单盲法记数靶细胞活死比。

　　2　结果

　　培养12h，效应细胞向靶细胞趋向运动，24h后，形成以靶细胞为中心的花环，48～72h形成细胞团，靶细胞灰暗，部分细胞内可见颗粒状物质。培养24 h，效靶比为100∶1，50∶1和25∶1的靶细胞活死比分别为1.6∶1，1.75∶1，3.01∶1；培养48 h，则分别为1.5∶1，2.07∶1，3.8∶1；效靶比为100∶1和50∶1时，靶细胞活率明显降低。靶细胞在培养24 、48 、72 h的活死比分别为1.75∶1，2.07∶1及0.62∶1，明显低于对照组的9.75∶1(24 h)。

　　3　讨论

　　6B11免疫小鼠的淋巴细胞对卵巢癌细胞系SKOV3有趋化作用，具体作用机制可能是免疫小鼠T淋巴细胞对免疫原处于致敏状态，当再次与靶细胞接触后，即被激活，活化的淋巴细胞释放淋巴因子，如巨噬细胞趋化因子(KCF)、淋巴细胞趋化因子(LCF)，吸引周围的淋巴细胞移向靶细胞部位，从而形成花环及细胞团。

　　6B11免疫小鼠淋巴细胞对SKOV3有特异性杀伤作用，机理可能是已致敏的T淋巴细胞(CD8⁺T)再次接触靶细胞后直接杀伤靶细胞，也可能是致敏淋巴细胞释放细胞毒性淋巴因子，破坏靶细胞，其真正机制有待研究。因此，6B11有可能作为卵巢癌疫苗用于临床，该方面有待临床观察研究。

　　作者简介：王建六，男，34岁，博士生，副教授，副主任医师；

　　钱和年，女，74岁，博士生导师，教授，主要从事妇科肿瘤的免疫治疗和预防

　　4　参考文献

　　1　Pohl C,Pener C,Schwonzen M et al.CD30-specific Ab1-Ab2-Ab3 internal image antibody network:potential use anti-idiotype vaccine against Hodgkin's lymphoma.Int J Cancer，1993；54:418

　　2　Kosmas C,Epenetos A,Countenary-Luck N.Activation of cellular immunity after intraactivitary monoclonal antibody therapy of ovarian cancer.Cancer,1997;73:3000

　　3　Mittleman A,Chen J J,Liu C C et al.Kinetics of the immune response and regression of metastatic lesions following development of humoral anti-high molecular weight melanoma associated antigen immunity in three patients with advanced malignant melanoma immunized with mouse anti-idiotypic monoclonal antibody MK-23.Cancer Res,1994;54:415

　　4　Qian H N,Wang J L,Feng J et al.Vaccination with anti-idiotypic monoclonal antibody 6B11 on immune competent mice bearing human ovarian carcinoma.C M J,1997;110:259

收稿1999-04-25　修回1999-07-13