艾滋病实验室检查

2001年12月4日 网易

　　1.HIV感染的实验室检测

　　HIV是一种目前尚不能治愈、病死率高的慢性进行性疾病，WHO推荐：所有HIV检 测应该在受检者知情同意下进行，并必须提供HIV检测前后咨询，提供预防HIV传播 的信息，为检测结果阳性者提供必要的支持和帮助。 HIV感染的诊断基于对受检者血清、血浆或全血进行HIV或其相应标志物的测定，包 括分离HIV、检测HIV抗原、测定核酸和检测HIV抗体。目前我国常规检测方法为血液 中HIV抗体检测。

　　1.1 HIV抗体检测

　　HIV抗体检测方法分为初筛和确认两类。目前常用酶联免疫吸附法或其它初筛方法检 查受检者的血清、血浆或全血。初筛实验发现结果阳性反应者，应该用同一种方法 和另一种实验原理不同的初筛方法加以重复检测。重复实验的结果都为阴性时，报 告为HIV抗体阴性，而结果均为阳性或一阴一阳时，该份标本需要送到HIV抗体确认 实验室，用蛋白印迹法或其它确认方法加以确认。只有由经过卫生部批准的HIV确认 实验室确认的阳性标本，才能报告HIV抗体阳性。对于确认实验结果为HIV抗体可疑 阳性者，建议3个月后复检。如果那时确认的结果还不符合阳性的判定标准，则报告 为HIV抗体阴性。

　　1.2 HIV病原学检查

　　目前HIV病原学检测方法很多，各方法在敏感性和特异性存在差别，在解释实验 结果时须注意。

　　1.2.1 病毒分离 它是确定病毒性疾病病因的最可靠的手段之一，目前对不同感染阶段者HIV分离 率在90%左右。该试验需要在生物安全P3级的实验室中进行，技术要求高、昂贵、耗 时，目前仅限于研究中使用。 1.2.2 P24检测 采用P24检测可使HIV感染的窗口期缩短近1周，在临床上主要用于HIV抗体阳转之前， HIV感染的早期HIV诊断，美国已把它用于献血员的筛查。但是该检测敏感性较低， 阴性结果不能排除感染的可能。

　　1.2.3 HIV核酸检测 包括原位杂交、定性HIV前病毒DNA检测(Proviral DNA)和定 量HIV-RNA检测。HIV核酸检测可用于辅助诊断急性HIV感染、血清学检测结果不确定、 感染HIV的母亲所生育的孩子的感染状况。原位杂交敏感性低，而后两者的敏感性较 高(90%～100%)，但是有存在一定的假阳性，解释实验结果一定要注意。

　　2. 预后及疗效观察实验室指标的检测

　　2.1 CD4+细胞和CD8+细胞计数

　　CD4+ T淋巴细胞正常值为500～1600个/μL，CD4+/CD8+的正常比值为1.5～1.7：1。 目前CD4+细胞的测定已广泛应用于HIV感染者的临床管理中，协助判断感染者的预后、 指导实施抗病毒治疗和疗效观察以及药物预防机会性感染等方面。同时它也是美国 以监测为目的的艾滋病病例的定义。生理状态下，CD4+细胞数存在一定的波动，且 并发的感染或免疫接种也可使之降低。所以应该避免在并发感染治疗后或免疫接种 后4周内检测CD4+细胞数目；当至少有2次CD4+细胞检测均发现CD4+细胞显著降低时， 才能说明CD4+确实发生了显著性变化(即CD4+细胞绝对数比基线水平减少幅度大于 30%，或CD4+细胞百分比下降超过三个百分点，比如CD4+细胞绝对数基线值为500/μ L，CD4+细胞%为20%，在随访中连续两次CD+细胞计数均下降，CD4+细胞绝对数减少至 340/μL，CD4+细胞百分比降低为16%，说明CD4+细胞确实发生了显著性变化)。

　　2.2 病毒载量测定(viral load， VL)

　　病毒载量试验是对感染者体内游离的核酸RNA含量的定量测定，通常检测标本是血浆， 目前常用的方法主要有3种：逆转录聚合酶链反应系统(RT-PCR)、分支DNA信号扩 大系统(branch DNA signal amplified system， bDNA)和核酸序列扩增系统(nucleic acid sequence-based amplification， NASBA)。病毒载量是药物疗效评估和疾病 发展的重要指标，已广泛应用于HIV实验室研究、感染早期检测、感染者预后判断和 抗病毒疗效观察等。当VL测定应用于感染者临床管理时，应该注意坚持使用同一种 检测方法、避免在并发感染治疗后或免疫接种后4周内检测，只有当VL比基线水平高 出3倍以上或VL的对数值增加0.5 以上，才能判定VL发生了显著变化。

　　3. 耐药性监测

　　耐药性监测包括基因型分析和病毒表型分析。前者检测HIV-RNA上是否出现三类 抗病毒药物诱导的基因突变位点以及病毒RNA中编码逆转录酶和蛋白酶基因序列，而 后者是测定在体外某药物对病毒的50%或90%抑制浓度。它们可以用于指导开始用药 时药物的选择和判定治疗失败的原因，指导选择替代方案。还可以用于监测某人群 (急性HIV感染)治疗前HIV耐药株流行情况，为该人群制定推荐的治疗方案提供指 导意见。