射麻止喘液对过敏性哮喘豚鼠的作用

广州中医药大学学报 2000年第1期第17卷 中医药治疗过敏性哮喘

作者：刘琼　梁直英　陈芝喜　周名璐

单位：刘琼　梁直英　周名璐（广州中医药大学第一附属医院内五科，广州　510405）；陈芝喜（广州中医药大学，广州　510405）

关键词：射干麻黄汤/药理学；@射麻止喘液/药理学；@内皮素/血液；@内皮素/分析；哮喘/中药疗法；豚鼠

　　摘要：射麻止喘液(射干、麻黄、桔梗、杏仁、细辛、地龙、半夏、椒目、甘草等中药组成)是广州中医药大学第一附属医院研制的治疗支气管哮喘的有效方剂，为探讨其作用机理，采用放射免疫分析方法，观察经该方治疗后实验性过敏性哮喘豚鼠血浆及肺组织内皮素(ET)水平的变化，并进行组织形态学观察。实验结果显示射麻止喘液可以降低血浆及肺组织ET水平，并可抑制嗜酸性粒细胞的浸润，提示射麻止喘液具有抗炎作用。

　　中图分类号：R562.25　文献标识码：A

　　文章编号：1007-3213(2000)01-0024-03

Effect of Shemazhichuan Liquid for Allergic Asthma in Guinea Pigs

LIU Qiong,LIANG ZhiYing,ZHOU Minglu

　　(The First Affiliated Hospital of Guangzhou University of TCM,Guangzhou 510405,China)

　　CHENG ZhiXi

　　(Guangzhou University of TCM,Guangzhou 510405,China)

　　Abstract:To study the antiasthmatic mechanism of Shemazhichuan(SMZC) liquid,radioimmunoassay was applied to detect the endothelin(ET) level of blood and lung tissues in guinea pigs with allergic asthma.It was found that the ET level was decreased both in blood and in lung tissues and the eosinophilic infiltration was inhibited,suggesting that SMZC Liquid exerts an antiinflammatory effect.

　　Key words:SHEGAN MAHUANG DECOCTION/pharmacology;@SHEMAZHICHUAN LIQUID/pharmacology;@ENDOTHELIN/blood;@ENDOTHELIN/analysis;ASTHMA/TCD therapy;GUINEA PIGS

　　支气管哮喘是由多种炎症细胞特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞参与的慢性气道炎症 ，在易感者中，此类炎症可引起反复发作的喘息、气促、胸闷或咳嗽，多在夜间或凌晨发生。近年来，世界各国均报道支气管哮喘的发病率、疾病的严重程度、病死率均逐年上升，引起医学专家和卫生官员的极大关注。由于西药的毒副作用，目前已经有越来越多的患者转向中医药的治疗。

　　多数医家认为“风痰壅阻”是哮喘发作期的主要病机，本科以祛风化痰解痉为主要治疗大法，根据临床经验拟定的射麻止喘液，经过临床观察，有较好的疗效。本文通过实验研究对其疗效和机理进行探讨。

　　1　材料和方法

　　1.1　动物　健康白化豚鼠48只，雌雄各半，体重(250±50)g，由第一军医大学动物中心提供。

　　1.2　试剂及仪器　　射麻止喘液是由射干、麻黄、桔梗、杏仁、细辛、地龙、半夏、椒目、甘草等9味中药组成的纯中药制剂，由广州中医药大学制剂室提供，制备成含生药3.5kg/L，为高剂量；稀释5倍后，含生药0.7kg/L，为低剂量。卵蛋白：上海化学试剂公司生产，批号970612。地塞米松：广州市侨光制药厂生产，批号980112。内皮素(ET)试剂盒由解放军总医院东亚免疫技术研究所提供。雾化器：PA18067型(美国)。

　　1.3　观察方法

　　1.3.1　动物模型的制作　参照国际上常用的方法^［1］并加以改进。用10%卵蛋白生理盐水1mL腹腔注射，2周后用恒压喷入1%卵蛋白生理盐水20s，将致敏豚鼠在雾室中放置30s，以豚鼠腹肌明显收缩为阳性，连续诱喘3d，3d后分组给药。

　　1.3.2　分组　48只豚鼠随机分成5组，正常对照组8只，其余每组各10只。正常对照组：给予0.9%生理盐水1mL腹腔注射，2周后用同样的方法雾化吸入生理盐水；哮喘模型组：予生理盐水10mL/kg灌胃，连续8d；地塞米松组：予地塞米松1.0mg/(kg·d)腹腔注射，连续8d；射麻止喘液低剂量组(下称射麻低组)：予射麻止喘液7g/(kg·d)灌胃，连续8d；射麻止喘液高剂量组(下称射麻高组)：予射麻止喘液35g/(kg·d)灌胃，连续8d。

　　1.3.3　观察指标及方法　①心脏取血2mL注入含有10%EDTA二钠30μL和抑肽酶40μL试管中，混匀，在4℃中、3000r/min离心10min，取上清-30℃保存，用放射免疫分析法测ET。②取肺组织，吸去血迹，称取0.1g，放入1mol/L醋酸1mL碾磨，100℃水浴煮沸10min匀浆，4℃、3000r/min离心15min，取上清在-30℃中保存，用放射免疫分析法测内皮素(ET)。③将肺组织放入10%福尔马林固定，把固定好的肺组织切成1cm×1cm×0.2cm大小的组织块行HE染色，用光镜观察肺组织嗜酸性粒细胞浸润情况。

　　1.4　统计学处理　采用方差分析进行统计。

　　2　结果

　　2.1　射麻止喘液对哮喘豚鼠血浆、肺组织ET变化的影响　见表1。

表1　豚鼠血浆ET水平(ρ_ET,b)、肺组织

　　ET水平(ρ_ET,L)的变化()

　　*与模型组比P＜0.05，**P＜0.01；△与正常组比P＜0.05，△△P＜0.01

　　2.2　哮喘豚鼠肺组织病理变化　哮喘模型组豚鼠肺组织可见肺泡腔内有大量嗜酸性粒细胞及其他炎性细胞浸润，组织粘膜充血、水肿，而正常肺组织无此特点。经治疗后，地塞米松组、射麻低组、射麻高组哮喘豚鼠肺组织嗜酸性粒细胞及其他炎性细胞浸润明显减少，组织充血、水肿现象有所减轻，见图1～图5。

　　图1　正常组肺组织(HE,10×)　　　　　　　　图2　哮喘模型组肺组织(HE,10×)

　　图3　地塞米组肺组织(HE,10×)　　　　　　　图4　射麻低组肺组织(HE,10×)

5　射麻高组肺组织(HE,10×)

　　3　讨论

　　嗜酸性粒细胞浸润是哮喘的基本病理特征之一，故哮喘又被称为“慢性嗜酸性粒细胞性支气管炎”。嗜酸性粒细胞除释放多种炎症介质外，尚能产生嗜酸性粒细胞阳离子蛋白等多种毒性蛋白，能直接引起支气管平滑肌收缩、血管通透性增高和粘液腺分泌增加^［2］。本实验用卵蛋白作为激发因子，肺组织切片可见哮喘模型组肺组织有大量的嗜酸性粒细胞浸润，符合哮喘慢性炎症过程中的病理改变。用射麻止喘液及地塞米松治疗后，肺组织嗜酸性粒细胞明显减少，组织充血、水肿现象减轻(图1～图5)，可见射麻止喘液能抑制嗜酸性粒细胞浸润。

　　ET是已知最强的收缩血管、气管和支气管平滑肌物质^［3］，又有促进粘膜下腺体分泌和促平滑肌和成纤维细胞增殖的效应。肺本身不仅是ET的靶器官，亦是ET合成和代谢的场所。有研究报导支气管哮喘患者的粘膜上皮和血管内皮细胞都有ET mRNA的高表达^［4］，可以产生和释放ET，抗原、缺氧、内毒素等都可促进ET的合成、释放。此外，ET能促进肺巨噬细胞释放血栓素B₂(TXB₂)和组胺，亦可加重气道炎症。因此，寻找ET抑制剂以抑制气道的收缩及增殖，有可能为哮喘的防治提供新途径。本实验显示，射麻高组与地塞米松组血液、肺组织匀浆中ET水平均比哮喘模型组下降(P＜0.01)，但仍未恢复到正常水平(与正常组比P＜0.05)。说明高剂量的射麻止喘液与地塞米松对过敏性哮喘的作用相仿。

　　射麻止喘液是本科多年临床应用的经验方，该方由麻黄、射干等9味 中药组成，麻黄祛风散寒，宣肺平喘；射干善开痰结，与麻黄共为君药。地龙息风解痉定喘；椒目可即刻平喘，与地龙共为臣药。杏仁疏肺利气，助麻黄止咳平喘；半夏祛痰散结；细辛善开结气，助麻黄祛风散寒；桔梗与杏仁一升一降，解肌肃肺以止咳化痰平喘，共为使药。甘草调和药性。诸药相配祛风化痰，解痉平喘。临床研究表明射麻止喘液用于轻、中度哮喘，可以明显改善症状。本实验研究进一步证实射麻止喘液具有抗炎作用。

　　作者简介：刘琼，女，1971年出生，住院医师，硕士研究生

　　参考文献：

　　［1］刘朝晖，徐军，钟南山.内皮素肿瘤坏死因子在哮喘发病中的作用［J］.中华结核和呼吸杂志，1995(6)：336

　　［2］许辉.嗜酸性粒细胞与支气管哮喘［J］.医师进修杂志，1996(11)：36

　　［3］Yanagiswa M，Kurihara H，Kimmura S,et al.A novel potent vasoconstrictor peptide produced by vascular endothlial cells［J］.Nature,1988,332:411

　　［4］徐军，钟南山.内皮素与呼吸系统［J］.中华结核和呼吸杂志，1994(6)：134

收稿日期：1999-08-12