清热理气方对螺杆菌感染性胃炎的作用

广州中医药大学学报 2000年第1期第17卷 实验研究

作者：卞兆祥　劳绍贤　王继德　黄志新　杜标炎　杜群 苏俊芳

单位：卞兆祥　劳绍贤（广州中医药大学脾胃研究所，广州　510405）；王继德　黄志新　杜标炎　杜群 苏俊芳（第一军医大学南方医院消化研究所，广州　510515）

关键词：@清热理气方/药理学；清热解毒药/治疗应用；理气药/治疗应用；胃炎/中药疗法；炎症/中药疗法；螺杆菌，幽门/药物作用；小鼠

　　摘要：为检验清热理气方(蒲公英60g、黄连10g、黄芩10g、枳壳10g、佛手12g、炙甘草6g)对实验性猫胃螺杆菌胃炎的治疗作用。采用复制Balb/c猫胃螺杆菌胃炎模型，以清热理气方大、中、小剂量(分别为26.6g/kg、13.3g/kg、6.65g/kg)给药，以三联疗法(灭滴灵2.6mg、四环素1.3mg、丽珠得乐1.3mg)为阳性对照组，以生理盐水为阴性对照。每组12只，给药4周，末次给药4周后观察结果。结果：以猫胃螺杆菌根除为指标，清热理气方作用不如三联疗法；以重度炎症改善为指标，大剂量组优于三联疗法组，差别有显著性(P＜0.05)。结论：清热理气方一方面可以根除猫胃螺杆菌，同时对炎症的某些环节可能有比根除猫胃螺杆菌更为重要的作用。

　　中图分类号：R573.3　文献标识码：A

　　文章编号：1007-3213(2000)01-0060-04

An Experimental Study of Heat Clearing and Qi Regulating Prescription for Helicobacter felis Gastritis in Balb/c Mice

BIAN Zhaoxiang,LAO Shaoxian,HUANG Zhixin,DU Biaoyan,DU Qun,SU Junfang

　　(Pi-Wei Institute,Guangzhou University of TCM,Guangzhou 510405,China)

　　WANG Jide

　　(Institute of Digestive Diseases,First Affiliated Hospital of Military Medical University,Guangzhou 510515,China)

　　Abstract:To study the effecacy of heat clearing and Qi regulating prescription(HCQRP)for helicobacter felis(HF) gastritis in Balb/c mice,sixty model Balb/c mice were randomly allocated to five groups:three HCQRP groups(in 26.6g/kg,13.3g/kg and 6.65g/kg respectively) and triple therapy control group(with metronidazole,tetracycline and bismuth)and saline control group.All mice were medicated for four weeks and effects were observed on 4th week after the last administration.Results showed that HF eradication ratio was lower in HCQRP groups than that in triple therapy control group,and high-grade inflammation in large dosage of HCQRP group was much improved as compared with triple therapy control group(P＜0.05).It is concluded that the mechanism of HCQRP on HF gastritis is related not only to the eradication of HF but also to the improvement of inflammation.

　　Key words:@HEAT CLEARING AND QI REGULATING PRESCRIPTION/pharmacology;ANTIPYRETIC-DETOXICATE DRUGS/ther.use;QI-REGULATING DRUGS/ther.use;GASTRITIS/TCD ther.;INFLAMMATION/TCD ther；HELICOBACTER PYLORI/drug effects;MICE

　　清热理气方(由蒲公英、黄连、黄芩、枳壳、佛手、炙甘草组成)是广州中医药大学脾胃研究所用于治疗幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,HP)阳性胃炎的临床科研方，在临床研究的同时，以实验性猫胃螺杆菌(Helicobacter Felis,HF)胃炎模型为对象检测其治疗效果。现将结果报告如下。

　　1　材料与方法

　　1.1　实验材料

　　1.1.1　药品　清热理气方组成：蒲公英60g、黄连10g、黄芩10g、枳壳10g、佛手12g、炙甘草6g，药材由广州市药材公司提供，经本校中药鉴定教研室鉴定。常法制备成含生药量1kg/L的水煎液，用前以蒸馏水配成所需浓度。四环素片剂，广东江门制药厂生产，粤卫药准字号(1994)第604087；丽珠得乐，珠海经济特区丽珠制药厂生产，(92)卫药准字X-94字。甲硝唑注射液，中外合资广东彼迪药业有限公司生产，粤卫药准字(1992)第615085号。

　　1.1.2　动物　Balb/c小鼠60只，体重(16±3)g，购自中山医科大学实验动物中心。

　　1.2　方法

　　1.2.1　HF动物模型的制备^［1］采用先清除胃内杂菌再给予灌服HF菌液的方法进行。实验组Balb/c小鼠先禁食禁水18～24h，灌胃HF菌液0.25mL/次(每mL含10¹⁰菌落形成单位)，隔日1次，共4次，4周后可制成HF感染的胃炎模型供实验用。实验过程中动物的饮水及饲料经消毒处理。

　　1.2.2　分组及给药方法　Balb/c小鼠60只，雌雄各半，分清热理气方大、中、小剂量组，三联疗法阳性对照组，生理盐水阴性对照组，每组12只。阳性对照组每天灌服三联药物混悬液，含灭滴灵2.6mg、四环素2.6mg、丽珠得乐1.3mg，1次/d；清热理气方大、中、小剂量组，灌服量分别为：26.6g/kg、13.3g/kg、6.65g/kg，1次/d；阴性对照组给予等体积的生理盐水，给药时间为4周。

　　1.2.3　细菌学检查及病理检查　距末次灌胃4周后，禁食12～24h，断颈处死，无菌操作取出胃，用灭菌PBS洗去胃内容物。从靠近幽门端的不同部位剪取胃粘膜3～4小块，加入HF保存液1mL中，用组织研磨器制成匀浆，用做尿素酶试验、直接涂片检查、细菌培养等细菌学检查。取两块约100mg的胃粘膜标本匀浆，离心上清作细胞因子测定用(结果待发)。尿素酶试验由研究室按文献方法^［2］自行配制。胃粘膜直接涂片检菌法以粘膜匀浆1滴推成涂片，革兰氏染色，光镜检查HF细菌。HF培养以空肠弯曲菌选择性琼脂为基础培养基，作常规培养。用PBS配制的10%甲醛固定胃组织，HE染色以供组织学诊断，观察HF及胃粘膜炎症程度。

　　1.2.4　结果判断　对于HF治疗结果的判断：以快速尿素酶试验、直接涂片检查、细菌培养三者都转为阴性者为根治。炎症程度分级法：即炎细胞浸润累及粘膜浅层1/3以内者为轻度，1/3～2/3者为中度，超过2/3者为重度^［3］。

　　1.2.5　统计处理　各组数据为(均数±标准差)，各组间比较采用Ridit分析法。

　　2　结果

　　2.1　清热理气方对实验性小鼠HF根除的作用

　　表1显示，清热理气方三剂量组对HF的根除作用不如三联疗法组，阴性对照组不经药物治疗，HF不能自动清除。

表1　对HF感染的根除作用

　　2.2　清热理气方对炎症的作用

　　表2显示，炎症改善程度，大、中、小剂量组间比较，差别有显著性(P＜0.05)，说明对炎症程度影响与药物剂量呈依赖关系。而大、中、小剂量组与三联疗法比较，差别无显著性。若以炎症程度减轻1级以上为有效，则大、中、小剂量组及三联疗法组对炎症的有效率分别为100%、83.33%、83.33%、66.66%。以重度炎症的改善为指标，大剂量组与三联疗法组比较，经四格表资料的χ²分析，χ²=1.6，小于χ²_(1)0.05=4.8，P＜0.05，说明大剂量组的抗炎作用强于阳性对照组。

表2　清热理气方对炎症程度的影响　N/例

　　大、中、小三剂量组组间比较，χ²=7.009，P＜0.05；大、中、小三剂量总和与阳性对照组比较，χ²=2.088，P＞0.053　讨论

　　现已明确HP感染是慢性胃炎的致病菌，与胃溃疡及十二指肠溃疡发病密切相关，是胃癌发病的高危因素^［4～6］。根除HP可以治疗慢性浅表性胃炎，能够加速消化性溃疡的愈合，减少溃疡的复发，同时部分病例报道还可以治疗胃粘膜组织相关性淋巴瘤^［7～9］。但是，由于目前抗HP治疗中所采用的治疗方案本身存在诸如抗生菌耐药及治疗失败等问题，限制了方案的实施^［10］。因此，寻找安全有效且易于接受的治疗方法是其治疗学研究的方向。

　　本研究所根据多年脾胃病研究的经验及有关HP实验研究的结果拟定清热理气方药，用于临床，效果良好(研究结果待发)。方中以蒲公英为主药，清胃和中，佐以黄连，清热和胃，以枳壳、佛手为臣药，理气和胃，以麦冬防热邪伤阴，炙甘草和中缓急为使药，诸药相合，共奏清热理气和胃之功 。从本研究结果看，对实验性HP感染胃炎的治疗作用，以HF根除率为指标，清热理气方不如三联疗法，但以炎症改善为指标，三剂量组间比较，差异有显著性，说明对炎症程度的影响与药物剂量呈剂量依赖关系，中药三个剂量组总和与三联疗法组比较差别无显著性，但大剂量组与三联疗法组比较差别有显著性。清热理气方一方面可以根除HP，同时对炎症也有治疗作用，但是两者之间并不平行，这一现象值得探讨。结论是否提示清热理气方除了针对HF之外，还可能作用于炎症的病理过程，有待深入研究。有资料表明HP感染所致的免疫炎症反应如某些细胞因子的释放等是HP致病因素的重要环节^{［11，12］}，因此，是否可以从炎症发生的主要环节进行HP相关疾病的治疗研究，值得进一步探讨。

　　基金项目：广东省中医药管理局课题(97163)及广东省科委资助课题(974239)

　　作者简介：卞兆祥，男，1966年出生，副教授，医学博士；

　　参考文献：

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收稿日期：1999-06-16