沙眼衣原体感染输卵管性不孕患者输卵管液中肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的测定

　　中华妇产科杂志2000年第35卷第7期

李海燕　梁占光

　　摘　要　目的　探讨沙眼衣原体（CT）感染所致输卵管性不孕患者输卵管液中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）的水平及其意义。方法　用酶联免疫吸附试验法测定22例CT感染输卵管性不孕（A组）、23例非CT感染输卵管性不孕（B组）及19例已生育输卵管正常妇女（对照组）输卵管液中TNF-α和IL-6 的水平。结果　A 组TNF-α的水平为178 ng/L，高于对照组的124 ng/L（P＜0.01）；A组中输卵管阻塞者TNF-α为199 ng/L，高于粘连者的142 ng/L（P＜0.01）。A 组IL-6的水平为681 ng/L，高于B组的264 ng/L及对照组的229 ng/L（P均＜0.01），B组与对照组之间比较差异无显著性（P＞0.05）。结论　无症状输卵管CT感染可使输卵管液中TNF-α和IL-6升高，其中TNF-α与输卵管损伤程度有关。TNF-α越高，损伤越重。

　　　关键词：衣原体，沙眼；输卵管疾病；不育，女(雌)性；肿瘤坏死因子；白细胞介素6

　　沙眼衣原体（chlamydia trachomatis，CT）与输卵管性不孕（tubal factor infertility，TFI）关系密切。本研究检测输卵管液中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）的水平，探讨CT感染TFI的发病机理。

　　资料与方法

　　一、研究对象

　　为1998年10月至12月在我科因TFI作输卵管粘连分离手术的45例患者及19例（对照组，输卵管外观正常）因绝育后复通或妇科良性肿瘤行卵巢囊肿剥出及子宫切除手术者。全部病例均于术中取输卵管液进行CT-DNA聚合酶链反应（ pCR）检测，CT-DNA阳性的22例TFI为A组，阴性的23例TFI为B组，对照组CT-DNA均为阴性。

　　A组及B组平均27岁，不孕时间3年，原发性不孕A组占41%(9/22)，B组占52%(12/23)。对照组平均年龄34岁，包括绝育术后复通、子宫肌瘤、卵巢囊肿及功能失调性子宫出血等患者。

　　二、研究方法

　　1.标本收集及处理： 采用国产定量滤纸（2.5 mm×0.6 mm）取输卵管液^［1］，吸液量为（23.2±0.3）μl。此滤纸片血清蛋白回收率为99.2%～101.8%^［2］。术中将3张滤纸条分别置入输卵管腔中，浸透输卵管液后放入离心管，加入800μl生理盐水。所有标本均在-20℃保存，集中测定。

　　2.CT-DNA、TNF-α、IL-6的检测：CT-DNA采用PCR法，试剂盒由伊利康生物技术有限公司提供，引物扩增产生400 bp片段产物。采用酶联免疫吸附法检测TNF-α及IL-6，试剂盒购于深圳晶美生物工程公司。方法是各取稀释浓度的标准品23.23μl加入800 μl生理盐水中,按前述方法处理后作滤纸片标准品,其余按试剂盒要求操作，拟合标准曲线相关系数分别为0.99及0.95。

　　三、统计学方法

　　TNF-α比较采用单因素方差分析,IL-6用秩和检验，组间比较用q检验。

　　结果

　　一、 输卵管液中CT-DNA的检测结果

　　TFI患者的CT-DNA阳性率（49%）明显高于对照组（14%），差异有极显著性（P＜0.01）。其中输卵管梗阻者26例的CT-DNA阳性率（54%）与19例粘连者（42%）比较，差异无显著性（P＞0.05）。

　　二、输卵管液中TNF-α和IL-6的检测结果

　　A组及B组中TNF-α水平明显高于对照组，差异有显著性（P＜0.01，＜0.05），但A组与B组间差异无显著性（P＞0.05）。A 组IL-6水平明显高于B组及对照组,差异有极显著性（P均＜0.01），但B组与对照组比较，差异无显著性（P＞0.05）。见表1。

表1　3组患者输卵管液中TNF-α、IL-6的水平(ng/L，x±s)

　　三、CT感染TFI患者不同输卵管病变的TNF-α和IL-6水平比较

　　TNF-α在输卵管梗阻者(14例)为（199±30）ng/L，明显高于输卵管粘连者(8例)的（142±48）ng/L（P＜0.01）。而IL-6，输卵管粘连者为（956±810）ng/L，高于输卵管梗阻者的（523±383）ng/L，但差异无显著性（P＞0.05）。讨论

　　一、输卵管液中TNF-α的产生及其作用

　　CT感染时输卵管上皮细胞首先释放TNF-α，再激活局部单核、巨噬细胞产生更多的TNF-α^［3］。Toth等^［1］发现，TNF-α与CT感染输卵管炎损伤有关。本研究也提示TNF-α水平升高与输卵管损伤有关，且水平越高损伤越重。

　　二、输卵管液中IL-6的产生及其作用

　　CT感染时IL-6水平升高。但IL-6在CT感染中所起的作用仍未明确且有争议。本研究提示，IL-6水平在CT感染时明显升高，与CT的亚临床感染或持续性感染状态密切相关。但非CT感染TFI与对照组之间IL-6水平差异无显著性，而该组包括有输卵管损伤的患者，说明IL-6与输卵管损伤无直接联系^［4］。此点有待进一步研究。

　　三、CT感染 TFI局部病变与TNF-α、IL-6的关系

　　本研究表明，TNF-α的产生与输卵管损伤程度有关，而IL-6与TNF-α的趋势相反。有研究表明，IL-6主要参与机体防御反应，与疾病早期有关，TNF-α在高水平时表现为损害效应，与疾病的持续状态有关^［5］。IL-6以剂量依赖方式抑制TNF-α产生^［6］。所以，在输卵管损伤较轻时IL-6水平较高，TNF-α水平较低。随着病程延长，输卵管损伤加重，引起阻塞，IL-6产生相对减少，从而解除了对TNF-α的抑制作用，TNF-α产生增多，输卵管损伤加重。

　　作者单位：李海燕(现在云南省大理医学院妇产科)

　　梁占光（610041 成都，华西医科大学附属第二医院妇产科）

　　参考文献

　　1，Toth M, jeremias J, Ledger WJ, et al. In vivo tumor necrosis factor production in women with salpingitis. Surg Gynecol Obstet, 1992, 174: 359-362.

　　2，苏琼，张莉，王文达.纸片血清标本检测乙型肝炎病毒标志物及丙型肝炎抗体的应用.临床肝胆病杂志，1998,11:228-229.

　　3，Ault KA, Tawfik OW, Smith -King MM, et al. Tumor necrosis factor-alpha response to infection with Chlamydia trachomatis in human fallopian tube organ culture. Am J Obstet Gynecol, 1996, 175:1242-1245.

　　4，Buyalos RP, Funari VA,Azziz R, et al. Elevated interleukin-6 levels in peritoneal fluid of patients with pelvic pathology. Fertil steril,1992,58:302-306.

　　5，Heremans H, van Damme J, Dillen C, et al. Interferon gamma, a mediator of lethal lipopolysaccharide-induced shwartzman-like shock reactions in mice. J Exp med, 1990, 171: 1853-1869.

　　6，Aderka D, Le JM, Vilcek J. IL-6 inhibits lipopolysaccharide-induced tumor necrosis factor production in cultured human monocytes, U937 cells, and in mice. j Immunol, 1989,143: 3517-3523.