Ki-67抗原表达与大肠癌转移及预后的关系

　　中国医科大学学报

　　2000年第29卷第1期

侯滨　单吉贤　辛彦　侯晓魁

　　摘　要　目的：探讨大肠癌组织细胞的增殖活性与病理学特点及生存率的关系。方法：应用兔抗人Ki-67多克隆抗体，对107例大肠癌术后标本进行S-P免疫组化检测。结果：大肠癌组织的Ki-67标记指数明显高于正常肠粘膜及癌旁粘膜(P＜0.01)；伴淋巴结转移和远隔脏器转移之大肠癌组织的Ki-67标记指数明显高于无转移者(P＜0.05)；大肠癌Ki-67表达阳性强的病人，术后生存率低于Ki-67表达弱者(P＜0.05)；Ki-67的表达与肿瘤大小、生长方式、浸润深度及组织分化程度无明显相关(P＞0.05)。结论：Ki-67作为代表肿瘤增殖活性的标志，与大肠癌的转移和预后密切相关。

　　关键词：大肠癌　Ki-67抗原　转移　预后

　　Ki-67抗原为原位检测各种良恶性组织中细胞增殖情况的探针。本文应用S-P免疫组化技术对大肠癌Ki-67抗原表达进行观察。探讨细胞增殖状态与大肠癌预后因素的关系，并评价其临床应用价值。

　　1　材料与方法

　　1.1　材料　标本取自本校肿瘤研究所1975～1990年间大肠癌根治术后石蜡包埋组织，其中大肠癌组织107例，癌旁粘膜(2 cm)组织32例，口侧端正常粘膜组织11例。所有病人术前均未经化疗和放疗。术后随访均在5年以上，最长15年8个月。

　　1.2　试剂及方法　兔抗人Ki-67多克隆抗体(A037，DAKO公司)。S-P免疫组化技术。

　　1.3　阳性细胞计数　每张切片上观察5个高倍视野，无选择性计数1 000个癌细胞中阳性细胞数，阳性细胞所占比例＜20%定为Ⅰ级，20%～40%定为Ⅱ级，40%～60%定为Ⅲ级，＞60%定为Ⅳ级^［1］。

　　1.4　统计学处理　配对资料的秩和检验。生存率分析时将资料分成弱级(Ⅰ～Ⅱ级)和强级(Ⅲ～Ⅳ级)，行Logran K检验并绘制生存曲线。

　　2　结果

　　2.1　阳性细胞的染色定位及分布

　　Ki-67抗原阳性产物定位于大肠癌的细胞核内，呈褐色或黄褐色，胞浆一般不着色。部分细胞核分裂时显示出整个细胞的阳性反应。

　　2.2　不同组织部位与Ki-67抗原表达的关系(表1)

表1　不同组织部位的Ki-67抗原表达Table 1　Expression of Ki-67 in different tissues

　　2.3　大肠癌临床病理学特点与Ki-67抗原表达的关系(表2)

表2　大肠癌临床病理特点与Ki-67抗原表达的关系Table 2　Correlation of Ki-67 with colorectal cancer's pathological features

　　2.4　大肠癌Ki-67抗原表达与术后生存率的关系(图1)

图1　大肠癌Ki-67表达与术后生存率的关系(P＜0.05)

　　Figure 1　Correlation between the expression of Ki-67 with

　　the survival rate of colorectal cancer after operation(P＜0.05)

　　3　讨论

　　Ki-67核抗原是细胞增殖相关核蛋白，Ki-67抗原表达可反映肿瘤细胞增殖活性，与DNA流式细胞术所得的周期参数及BrdU标记法的结果均具有高度的相关性^［2］。

　　在正常肠粘膜组织中，Ki-67表达弱而有规律，多集中在肠腺基底部的增殖区细胞核内，表层粘膜上皮为阴性；在癌旁粘膜组织中，表达增强，粘膜上皮增殖活性升高，并出现增殖带上移现象；而在大肠癌细胞中，Ki-67表达明显增多，着色程度有强有弱，分布和数量呈不同程度的异质性，这可能与DNA复制合成存在单个或多个起点有关，起点多者Ki-67的量也多，着色较强。表明癌细胞生长调节失控，DNA复制合成紊乱，同时提示肿瘤增殖细胞群体中并非所有细胞均同步增殖。

　　一般来说，肿瘤分化程度越低或其增殖活性越高，其恶性程度就越高，预后越差。但由于肿瘤的异质性，临床仅依据分化程度尚难以准确预测大肠癌的预后。本研究发现，恶性程度高、预后差的低分化腺癌Ki-67抗原表达(原发病灶Ki-67平均指数为39.145)较高分化腺癌(原发病灶Ki-67平均指数32.547)者高，但无统计学意义(P＞0.05)。说明尚不能依据原位检测大肠癌细胞Ki-67抗原表达来判断肿瘤的恶性程度。一些研究资料也表明Ki-67测定的增殖活性与大肠癌的分化程度无关^［3］。

　　淋巴结是否有转移或远隔脏器是否有转移是临床评估病人预后的重要指标。本研究淋巴结有转移者，Ki-67抗原表达增多，呈显著正相关(P＜0.05)，远隔脏器转移与Ki-67表达也呈显著正相关(P＜0.05)。表明增殖活性高的大肠癌更易向周围淋巴结及远隔脏器转移，提示Ki-67抗原表达高的大肠癌病人预后较差。

　　本实验还发现Ki-67阳性表达与大肠癌的生存率呈显著负相关(P＜0.05)。阳性强级者，术后生存期短，预后差。国外的研究也证实Ki-67与肿瘤预后有一定的联系。日本学者^［4］发现大肠癌组织的Ki-67指数大于癌旁组织和正常组织(P＜0.05)，Dukes’B、C期指数大于A期(P＜0.05)，与预后有关。

　　侯晓魁（辽宁省朝阳市喀左县第一人民医院普外科)

　　侯滨（中国医科大学第一临床学院肿瘤科，沈阳 110001）　单吉贤（中国医科大学第一临床学院肿瘤科，沈阳 110001）　辛彦（中国医科大学第一临床学院肿瘤科，沈阳 110001）　侯晓魁（中国医科大学第一临床学院肿瘤科，沈阳 110001）

　　参考文献

　　1，Hoang C,Polivka M,Maragi JA,et al.Immunohistochemical detection of cell proliferation in gastric carcinomas with the monoclonal antibody Ki-67:a study of 24 cases. Histology ＆ Histopathology,1993,8(1):149-153

　　2，Johannes G,Li Li,Carsten S,et al.Immunobioche-mical and molecular biologic characterization of the proliferation-associated nuclear antigen that is defined by monoclonal antibody Ki-67.Am J Pathol,1991,138(4):867-873

　　3，Hoang C,Poliuka M,Valleur P,et al.Immunohistochemical detection of proliferative cells in colorectal carcinoma and adenomas with monoclonal antibody Ki-67:preliminary data.Virchows Arch(A),1989,414(5):423-427