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卵巢癌血清、腹水中白细胞介素-6测定的临床价值

卵巢癌血清、腹水中白细胞介素-6测定的临床价值

中国免疫学杂志 1999年第3期第15卷 临床免疫学

作者:高 杰 文 杰 李守柔

单位:中国医学科学院北京协和医科大学北京协和医院妇产科,北京100730

关键词:卵巢癌;MTT比色法;白细胞介素-6;血清;腹水

  中国图书分类号 R737.31 R730.3

  摘 要 目的:探讨IL-6在卵巢上皮癌中的临床价值。方法:通过对40例卵巢癌患者血清、腹水中白细胞介素-6(Interleukin 6,IL-6)进行生物活性测定。结果:1、腹水中IL-6水平明显高于血清中IL-6水平(P<0.0001);2、腹水或血清中IL-6水平与卵巢癌分期呈正相关;3、卵巢癌术后残留与IL-6水平呈正相关;4、腹水中IL-6水平影响患者对卡铂化疗敏感性。结论:腹水或血清中IL-6生物活性的测定有可能成为卵巢癌疾病状态的评估及选择化疗药物的根据。

Clinical evaluation of interleukin-6 assay in serum and ascites of ovarian carainoma patients

GAO Jie,WEN Jie,LI Shou-Rou.

  Department of Obstetrics and Gynecology,Peking Union Medical College Hospital,Chinese Acadeny of Medical Science,Beijing 100730.Department of Obstetrics and Gynecology,the Second Clinical Hospiatl,Betheune Medical University,Changchun 130041

  Abstract Objective:To study the clinical evaluation of IL-6 in ovarian epithelial carcinoma.Methods:With 7TD1 cell lines,MTT colovimetric method was applied to assay IL-6 activity in serum and ascites of ovarian carcinoma patients.Results:1.IL-6 activity in ascites is significantly greater than that in serum;2.IL-6 activity in ascites or serum positively correlated with stages of ovarian carcinoma;3.Residue after operation has significant correlation with IL-6 activity;4.IL-6 activity in ascites affected response of patients to chemotherapy.Conclusion:The assay of IL-6 activity in ascites or serum is expected to offer help for evaluating patients and selecting chemical drugs in ovarian epithelial carcinoma.

  Key words Ovarian epithelian carcinoma MTT colorimetric method Interleukin-6 Serum Ascites

  IL-6是一种多功能细胞因子,具有肿瘤生长刺激因子的作用,参与肿瘤转移及促进其恶化,血中IL-6水平升高提示多发性骨髓癌及肾细胞癌患者的预后较差[1,2],但与卵巢癌关系目前尚不十分清楚。本文拟通过对卵巢癌患者腹水和血清中IL-6水平的测定,探讨IL-6在卵巢癌临床诊治中的价值。

  1 材料与方法

  1.1 资料来源 标本均来自1996年至1997年期间我院住院手术卵巢癌患者,组织病理学检查诊断浆液性囊腺癌24例,粘液性囊腺癌13例,未分化癌3例。

  1.2 实验方法

  1.2.1 标本取样 术前无菌抽取静脉血5 ml,不需抗凝,离心2 000 r/min 10 min,取上清液于Eppendorf管中密闭置于-40℃保存。术中取腹水5 ml,离心800 r/min 10 min,取上清液1 ml于Eppendorf管内密闭置于-40℃保存。检测时血清、腹水样品56℃灭活30 min后倍比稀释,血清样品最大稀释倍数为26,腹水样品为212

  1.2.2 检测方法 本实验采用军事医学科学院基础医学研究所建立的IL-6生物活性MTT[3-(4.5-dimethtchiazo/z-yl)-2.5-diphenyltetrazo/iambromide]比色测定法[3]。测定采用7TD1细胞株,此细胞需IL-6存在的情况下才能生长和增殖,且增殖程度与IL-6的浓度在一定范围内密切相关。常规条件下培养1 w,一般传12代,RPMI1640培养液洗涤细胞3次,离心2 000 r/min 10 min,RPMI1640调细胞浓度为1.2×105 ml-1。置96孔培养板上进行细胞培养,每孔分别加各种稀释浓度的样品50 μl及调好细胞数的7TD1细胞50 μl,常规条件培养48 h,加入MTT液20 μl,再培养48 h,而后加入10%SDS 100 μl/孔,37℃放置过夜,在酶联测定仪上测定A-600值,以空白对照管调零点。

  1.3 统计方法 IL-6活性计算采用能引起50%最大生长刺激样孔,测定值定为IL-6浓度为1 U/ml推算所测定样品IL-6值。测定结果经t检验进行显著性分析。

  2 结果

  2.1 卵巢癌患者腹水中IL-6水平为1 942.26±376.51 U/ml,血清中IL-6水平为20.95±4.06 U/ml,两组比较差异显著(P<0.0001)。

  2.2 卵巢癌患者腹水、血清中IL-6水平随分期的增加而升高,与卵巢癌分期呈正相关。Ⅰ~Ⅱ期与Ⅲ期、Ⅰ~Ⅱ期与Ⅳ期、Ⅲ期与Ⅳ期间腹水中IL-6水平相比较差异显著(P<0.005),结果见表1。

表1 卵巢癌患者不同病程腹水、血清中IL-6水平比较(±s,U/ml)

  Tab.1 Comparison of IL-6 levels of ascites & serum in the stages of ovarian carcinoma patients(±s,U/ml)

Stage n Levels of IL-6 in ascites Levels of IL-6 in serum
Ⅰ~Ⅱ 16 1 064.27±375.311) 11.97±4.972)
14 1 894.41±342.411) 23.95±3.872)
10 2 868.05±392.251) 33.22±3.202)

  note:1)Compared among the three groups,P<0.005;2)Compared among the three groups,P<0.0052.3 卵巢癌患者术后IL-6水平与肿瘤残留大小呈正相关,无残留与残留<2 cm、无残留与残留>2 cm、残留<2 cm与残留>2 cm等中的腹水、血清中IL-6水平相比较差异显著(P<0.05),见表2。

表2 卵巢癌患者肿瘤术后残留与腹水、血清IL-6水平的变化(±s,U/ml)

  Tab.2 Comparison of IL-6 levels of ascites & serum in the residues of ovarian carcinoma after the operations (±s,U/ml)

Residue(cm) n Levels of IL-6 in ascites Levels of IL-6 in serum
0 14 275.46±199.421) 10.48±4.752)
<2 7 1 533.09±478.401) 20.70±4.082)
>2 19 2 667.83±452.501) 31.69±3.752)

  note:1)Compared among the three groups,P<0.005;2)Compared among the three groups,P<0.005

  3 讨论

  3.1 卵巢癌腹水、血清中IL-6测定的临床意义 卵巢癌是诊断晚、转移早的肿瘤,临床上卵巢癌患者多发生盆腔转移,且出现腹水者多,大量腹水造成患者低蛋白血症,抵抗力下降,形成癌恶病质。有研究认为,IL-6可以增加肿瘤细胞活动性、减少癌细胞之间的粘连结合,并与肿瘤中的血管生成有关,进而促进肿瘤的转移及侵润[4]。本研究结果卵巢癌腹水中IL-6水平明显高于血清中的水平,腹水和血中IL-6水平均与肿瘤的期别成正相关。此外,腹水中IL-6水平高者均有盆、腹腔转移。Jonathan等认为,IL-6水平高低与卵巢癌患者的分期、病程等有关,这是因为高水平IL-6可能影响卵巢癌细胞间的粘连结合力和血管形成,进而促进肿瘤盆、腹腔广泛转移[5]。因此测定腹水或血中IL-6水平可为临床医生了解病情、估计病程提供一个可参考指标,同时研究抑制体内IL-6的生成可望为卵巢癌的治疗提供一个新的途径。

  3.2 IL-6水平与卵巢癌分期、肿瘤术后残留 有学者认为,IL-6等细胞因子可以刺激卵巢癌细胞增殖[6]。本研究也显示,腹水或血清中IL-6水平与肿瘤体积大小及卵巢癌分期之间存在一定相关性。期别高、术后肿瘤组织残留多,则IL-6水平高。卵巢癌术前分期较困难,而准确的术前分期对治疗方案的确定如手术范围、是否术前实施化疗等的选择是十分重要的。因此术前检测IL-6可助于临床医生对卵巢癌的正确分期及决定术前是否选择化疗,从而提高治疗效果。

  3.3 IL-6对卵巢癌化疗的影响 卵巢癌多以铂为一线化疗药物,研究证实上皮性癌细胞产生的IL-6可诱导产生重金属结合蛋白与铂结合,而使癌细胞对铂类化疗药物不敏感[7]。同时IL-6对机体抗肿瘤免疫能力具有一定抑制作用,由于机体免疫降低而影响了肿瘤对化疗的敏感性[8]。本实验中发现,对化疗敏感的5例患者腹水中IL-6水平明显低于3例对化疗不敏感患者的水平,也说明了解患者腹水或血清中IL-6水平可能有益于因而异地选择最佳化疗方案。文 杰 李守柔 白求恩医科大学第二临床学院妇产科,长春130041

  作者简介:高 杰,男,36岁,主治医师,博士研究生;

  李守柔,女,76岁,教授,博士生导师

  4 参考文献

  1 Blay J Y,Negrier M,Combaret V et al. Serum level of interleukin-6 as a prognosis factor in metastatic renal cell carcinoma.Cancer Res,1992;52:3317

  2 Nataille R,Jourdan M,Zhang X G et al.Serum levels of interleukin-6,a potent myeloma cell growth factor as a reflect of disease severity in plasma cell dyscrasias.J Clin Invest,1989;84:2008

  3 彭善云,康新兴,凌世金 et al.白介素6生物活性简易测定法及其临床应用.军事医学科学院院刊,1994;18(1):72

  4 Tamm I,Cardinale I,Kruger J et al.Interleukin-6 decrease cell-cell association and increase motility of ductal breast carcinoma cells.J Exper Med,1989;170:1649

  5 Jonathan S B,Chung C,Kaldi K et al.Serum interleukin-6 levels correlated disease status in patients with ovarian cancer.Am Obstet Gynecol,1991;164:10386 Wu S,Rodabaugh K,Martinez M O et al.Stimulation of ovarian tumor cell proliferation with monocyte products including interleukin-1,interleukin-6,and tumor necrosis factor-alpha.Am J Obster Gynecol,1992;166:997

  7 Holschneider C H,Johnson M T,Knox R M et al.Bullatacin-in vivo and in vitro experience in an ovarian cancer model.Cancer Chemother Pharmacol.1994;34;166

  8 Aoiki Y,Takakuwa K,Kodama S et al.Use of adoptive transfer of tumor infiltrating lymphocytes alone or in combination with cisplatin-obtaining chemotherapy in patients with epithelial ovarian cancer.Cancer Res,1991;51:1934

〔收稿1998-07-29 二次修回1999-01-18〕


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