幽门螺杆菌对胃粘膜损伤机制的实验研究

中国微生态学杂志 1999年第5期第11卷 论著

作者：郭公新　卓　越　孔心娟

单位：佳木斯大学医学院第一附属医院消化科　154003

关键词：幽门螺杆菌；胃粘膜；损伤

　　摘　要　实验采用HP活菌悬液，制成大鼠HP损伤性胃炎模型，以便观察HP对胃粘膜的损伤机制。结果表明：实验组与对照组比较，胃粘膜损伤指数增高(P＜0.05)，胃壁结合粘液量明显降低(P＜0.01)，胃粘膜PGE₂和SS的含量降低(P＜0.01)。说明幽门螺杆菌对胃粘膜防御系统有明显的损伤作用。

ANIMAL EXPERIMENTAL STUDY ON THE

　　PATHOGENICITY OF HELICOBACTER PYLORI

Guo Gongxin,et al.Department of Gastroenterology,

　　The Affiliated First Hospital of Jiamusi University,Jiamusi,154003

　　Abstract　The aim of the experiment is observing the mechanism of injury of Helicobaeter Pylori(HP) on the gastric mucosa.Rats were dividcd into two groups:cxpcrimcntal group and control group.HP was given to experimental group.The results indicate that:HP can increase the gastric mucosal injurious figure,reduce the gastric mucus Content(GAM),reduce biosynthesis of prostanglandin E₂(PGE₂) and somatostatin (SS) of gastric mucosa.It is showed that HP can significantly injure the protection systemof gastric mucosa.

　　Key words　Helicobacter Pylori Gastric mucosa/injury

　　通过观察胃粘膜的病理学改变，测定胃壁结合粘液量(GAM)，以及胃粘膜前列腺素E₂(PGE₂)和生长抑素(SS)的含量，观察了幽门螺杆菌(HP)对胃粘膜防御系统的影响。

　　1　材料与方法

　　1.1　幽门螺杆菌悬液的配制^［1］　取自我院胃镜室，将尿素酶试验阳性标本直接涂片，Gram's染色HP阳性者，用改良Skirrow培养基于BBL Compy Pouuch培养袋中分离3天～7天，经氧化酶过氧化氢酶阳性证实HP培养阳性者，在原板再次接种繁殖，制成菌浓度＞10¹⁰HP菌悬液。

　　1.2　主要材料　Sprague-Dawley(SD)大鼠100只，雌雄各半，体重200g～250g,随机分为2组，实验组和对照组各50只。给实验组灌服菌浓度＞10¹⁰的菌悬液3ml,对照组灌服等量无菌蒸馏水。常规饲养2个～3个月，经乙醚麻醉处死。

　　前列腺素E₂(PGE2)测定试剂盒由中国医学科学院基础医学研究所药理室提供，生长抑制(SS)测定试剂盒由北京协和医院胃肠实验室提供。

　　1.3　实验步骤

　　1.3.1　病理学检查　实验组及对照组各取10只，剖腹取出胃，并向胃内注入4%甲醛溶液，然后置入该溶液中充分固定，沿大弯剪开展平，在解剖显微镜(7.2×)下按Guth^［2］法计算粘膜损伤指数。

　　1.3.2　胃壁结合粘液量(GAM)测定　实验组及对照组各10只，剖腹取胃。参照Corne和Bolton阿利斯蓝染色法测定胃壁结合粘液量^［3］。

　　1.3.3　胃粘膜PGE₂和SS的测定　实验组及对照组各10只，取胃沿大弯剪开，用纯刀片刮下胃粘膜放于试管中，于液氮中速冻，称重后加生理盐水-无水乙醇1ml，匀浆和离心，上清液加乙酸乙酯提取、离心，提取液用压缩空气吹干，置-20℃冰箱待测。用放免法(RIA)测标本中PGE₂的含量。

　　SS标本处置　加1ml蒸馏水，在沸水液中加热10分钟，加0.1N HC1 0.2ml，依次匀浆和离心，取上清液，置-20℃冰箱待测。用RIA法测标本中SS的含量。

　　1.4　统计学处理　胃粘膜损伤指数及胃壁结合粘液量比较用T检检，其余用方差分析。

　　2　结　果

　　由表1可以看出，实验组与对照组比较，胃粘膜损伤指数增高(48.42±1.10比11.34±0.91，P＜0.05)，胃壁结合粘液量明显降低(2.09±0.19比5.63±0.23，P＜0.01)，胃粘膜PGE₂含量降低(312.39±17.8比963.43±19.63，P＜0.01)，胃粘膜生长抑素(SS)的含量降低(43.26±13.09比96.32±24.00，P＜0.01)。

表1　HP对大鼠胃粘膜的影响实验结果(X±S)

　　注：与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01

　　3　讨　论

　　HP是慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病因素之一，但其确切致病机制尚不清楚。有些学者认为^［4］：HP主要产生大量尿素酶，通过分解尿素产氨损伤细胞，HP还分泌磷酯酶A和G，削弱细胞膜磷酯双层结构。本实验结果显示：实验动物在灌服HP菌悬液后，胃粘膜充血，甚至有出血及条索状糜烂，与以上结论相一致。

　　在胃粘膜的防御体系中，胃粘膜表面连续的胃壁粘液层是重要因素之一。它具有粘滞性和弹性，有防御损伤因子的作用，同时可减慢H⁺在其中的扩散速度，并与上皮细胞分泌的HCO^-₃一起在胃腔与胃粘膜上皮之间形成一个pH梯度，构成粘膜-碳酸盐屏障。本实验表明，HP可明显减少胃粘膜GAM的含量，削弱胃粘液屏障。

　　许多实验已证明，PGE₂和SS在细胞保护中起重要作用。胃粘膜PGE₂对胃粘膜其它防御因素均有加强作用^［5］。本实验表明：HP可明显降低胃粘膜PGE₂和SS的含量，降低胃粘膜的屏障功能。

　　本实验进一步证实，HP对胃粘膜的防御系统有明显的损伤作用，为临床上进一步研究慢性胃炎和消化性溃疡病例抗HP治疗提供了实验基础。

　　参考文献

　　1　郑桂芬，等.幽门螺杆菌相关性胃炎的病理组织改变及其动物模型建立的初步探讨.实用肿瘤学杂志.1994;4：1-3

　　2　Guth PH.Topical aspirin plus HCl gastric lesion in the rat.Gastroenterology.1979;76:88-90

　　3　Cornc ST.A method for the quantitative estimation of gastric barrier mucus.J Physiol.1974;242:116-117

　　4　华杰松.幽门螺杆菌的致病物质及其致病性。国外医学微生物学分册.1993;3：123-124

　　5　穆毅，等.丹参对门脉高压大鼠胃粘膜及肝脏的影响，中华肝脏病杂志.1996;1：26-28

(收稿日期：1999-04-12)