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末梢血快速测定幽门螺杆菌IgG抗体

末梢血快速测定幽门螺杆菌IgG抗体

世界华消化杂志 1999年第9期第7卷 临床经验

作者:杨燕 侯淑萍 孙军强

单位:中国民解放军空军86513部队医院 天津市 300074

关键词:螺杆菌,幽门;抗体,细菌/ 分析;胃炎;胃溃疡

  中国图书馆分类号 R 573.2

  Subject headings helicobacter pylori; antibody, bacterial/ analysis; gastritis; stomach ulcer

  目前用于Hp诊断的方法很多,如创伤性的有快速尿素酶试验(RUT)、组织病理切片染色、分离培养、聚合酶链反应(PCR)及其相关技术. 非创伤性的有血清学、尿素呼气试验. 下面是我院引用美国Bioage公司原料加工制成非创伤性的采用末梢血(40 μL)快速检测幽门螺杆Hp-IgG抗体.

  1 材料和方法

  1.1 材料 1998-04/ 10因上消化道症状来我院胃肠门诊就诊,并行内镜检查的胃炎或消化性溃疡患者150例,其中男102例,年龄17岁~77岁,平均47岁. 女48例,年龄21岁~76岁,平均49岁. 全部病例既往均未进行过系统的杀灭Hp的治疗,并且1 mo内未服用过抗生素及铋剂等影响检测结果的药物.

  1.2 方法

  1.2.1 Hp-IgG检测卡 引进美国Bioage公司原料加工而成的Hp-IgG检测卡,用毛细管吸取被检患者(无名指、耳垂均无冻伤等外部炎症)末梢血40 μL加入测试卡上,5min后于“视窗”中观察结果. 被检血样中的Hp-IgG抗体与试验卡中的Hp高分子量的菌体蛋白抗原、染料结合,形成抗原-抗体附合物并被测试区的抗该复合物的抗体捕捉结合呈现红线. 如标本中无Hp抗体则测试区只结合反应区内的兰色素而形成兰线,即“视窗”内如果同时显示红线和兰线为阳性,只显示兰线为阴性. 没有任何标志出现者为失效,应重新更换测试卡测试.

  1.2.2 间接ELISA法 抽取静脉血2 mL,待凝固后离心分离血清备用. 试剂盒由广东珠海丽珠集团、丽珠试剂厂生产,经过加样、水浴、冲洗后测得,用酶标仪于450 mm处读数,吸光度小于临界值为阴性,大于临界值为阳性.

  1.2.3 快速尿素酶法(RUT) 试剂盒由福建三强生物化工公司出品. 内镜于胃窦、胃体部各取粘膜活检并放入检测井中,加入检测试剂后5min~10min内观察结果. 出现红颜色为阳性,无色为阴性.

  1.2.4 组织涂片染色法 内镜活检标本(与尿素酶法活检部位相同)于玻片上制成涂片,革兰染色,油镜下观察. 见到革兰染色阳性的“S”形或“海鸥”形的典型的弯曲菌样细菌为阳性,否则为阴性.

  2 结果

  按照4种方法各自的阳性标准,Hp感染的检出情况如表1. 按照目前公认的满足条件,制订本研究的Hp阳性诊断标准为:①涂片见大量典型的“S”形或“海鸥”形的弯曲样细菌者;②涂片见少量典型的弯曲样细菌+RUT或ELISA法阳性者;③RUT和ELISA法同时阳性者,与Hp阳性标准比较,4种方法的检出准确性见表2.

表1 Hp感染的检出情况            (n)

方法 测试卡 ELISA RUI 涂片
Hp(+) 108 110 102 108
Hp(-)  42  40  48  42
合计 150 150 150 150

  表2 Hp感染检出的准确性

方法 阳性 假阳性 阴性 假阴性 敏感性(%) 特异性(%)
测试卡  99 6 40  5  95.6 87.1
ELISA  99 7 39  5  95.6 83.9
RUT  91 0 47 12   88.4a  79.5a
涂片 104 1 45  0 100.0 96.8

  aP<0.05(U>1.9600),vs 涂片、试条、ELISA法.  测试卡检测 Hp感染的阳性预测值为94%,阴性预测值为90%,与涂片法比较符合率为92%,与ELISA法比较符合率为99%.

  3 讨论

  测试卡测定Hp-IgG所用抗原是直接从培养的Hp中分离提取的多种高分子量的菌体蛋白,与其他弯曲菌,如空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌、大肠杆菌等均无交叉反应. 对血液中Hp抗体测定的敏感度和特异度皆高,分别为95.6%与87.1%,证实此法对中国群中Hp测定的敏感度和特异度均很高,它具有耗时少(5min),准确度高、价廉、患者痛苦极小,与其他快速测定Hp抗体的方法比较,有用血量少(40 μL)省时(全过程只需5min~10min)敏感度高(95.6%),特异度(87.1%)高,因此在临床上对卫生设备简陋地处边远地方的小医院应用适合,尤其适合少年儿童、体弱多病的老年患者. 可作为筛选检查及大规模的Hp感染的流行病学调查和Hp根除后的定期随访.

  通讯作者 杨燕

收稿日期 1999-05-08


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