输卵管性不孕与沙眼衣原体、淋病双球菌及解脲脲原体感染的关系
中华妇产科杂志 1998年第6期第0卷 论著摘要
作者:陆静 梁占光 韩字研
单位:610031 成都市第三人民医院妇产科(陆静);华西医科大学附属第二医院妇产科(梁占光,韩字研)
国内针对沙眼衣原体(CT)、解脲脲原体(UU)对不孕影响的研究大多数是基于血清学或对宫颈感染的调查,而输卵管感染是导致不孕的一个重要原因,本研究应用多聚酶链反应(PCR)法对不孕妇女输卵管的CT、UU和淋病双球菌(NGH)的感染情况进行分析。
一、资料和方法
1.研究对象:123例,来源于华西医科大学附属第二医院1995年9月至1996年3月因原发和继发不孕接受手术治疗的病人(不孕组)。符合以下标准:夫妇有正常性生活,未采取任何避孕措施而未妊娠至少两年以上,男方精液检查正常,手术证实为盆腔结核者除外。年龄22~38岁,平均28.2岁,按术中发现,病变为单纯输卵管与卵巢或周围其他组织粘连42例,输卵管阻塞或积水65例,子宫内膜异位症合并上述两种病变之一的16例。123例均进行了输卵管CT、NGH的检测,其中66例进行了UU的检测。正常妊娠对照源于同期60例足月妊娠行剖宫产的妇女(对照组),年龄21~32岁,平均26.9岁,均作了输卵管CT、NGH检测,其中34例作了UU检测。
2.标本采集:在不孕病人行分离粘连手术中及正常孕妇剖宫产术中,分别用一个棉拭子插入左右侧输卵管伞端约0.5 cm,旋转数秒后抽出,置入装有1ml无菌生理盐水的离心管中充分洗涤后挤干,拭子弃去,浸出液于4℃保存备检。
3.CT、NGH及UU DNA的检测:采用PCR法,(1)标本处理及其DNA的制备:将浸出液室温下12 000 r/min离心15分钟,弃去上清液,加入50 μl裂解液(内含0.38 mg/ml的蛋白酶K)混匀,60℃30分钟,100℃水浴15分钟,14 000 r/min离心2分钟后分别取3μl上清液作为CT、NGH和UU的PCR反应模板。(2)引物设计:PCR试剂盒由上海第二医科大学生化室提供,CT PCR引物对扩增产生410 bp片段产物,NGH PCR引物对扩增产生390bp片段产物,UU PCR引物对扩增产生450bp片段产物。(3)DNA扩增:按说明书的要求配制反应体系,扩增仪为上海复旦生物实验技术研制所生产的FR-800型。94℃预变性5分钟,94℃变性1分钟,54℃退火30秒,72℃延伸60秒,循环40次。(4)结果观察:取10μl~15μl扩增物经2.5%琼脂糖凝胶电泳,紫外灯下观察有无特异性扩增带。同时设置阳性和阴性对照。
4.统计学处理:采用χ2检验、配对资料检验和确切概率法。
二、结果
1.两组输卵管的CT、NGH及UU阳性率:不孕组的CT、NGH和UU阳性率均显著高于对照组(P<0.05,见附表)。
2.不孕组CT、NGH及UU的合并感染情况:不孕组中CT和NGH合并感染10例(8.1%),UU和NGH合并感染3例(4.6%),经配对计数资料的χ2检验,NGH与CT及UU的感染间均有显著相关性(P<0.05)。CT和UU合并感染2例(3.0%),两者的感染间无显著相关性(P>0.05)。CT、NGH和UU三者合并感染者1例(1.5%)。
三、讨论
1.女性生殖道感染与不孕: 女性生殖道的急性和慢性感染所造成的生殖腔道的炎症、粘连与阻塞,是引起不孕的主要原因,可由多种微生物所引起,常见的有CT、NGH和UU。CT寄生于宿主细胞内引起变态反应[1],常可导致反复感染,引起输卵管进行性损害、粘连、阻塞和积水,从而导致不孕,从盆腔炎病人输卵管检出CT的频度为5%~30%[2]。UU通过其特殊结构紧密地粘附于易感宿主细胞膜受体上,使宿主细胞受损[3]。有报道,阻塞性不孕病人的腹腔液UU培养阳性率10.1%,高于正常对照组的6.1%[4]。NGH同CT一样,均能引起急性输卵管炎、输卵管纤维变性及瘢痕化而致不孕。本研究中,不孕组输卵管的CT、NGH和UU阳性率,均显著高于正常妊娠妇女(P<0.05)。提示,输卵管的CT、NGH或UU感染是导致不孕的因素之一。
2.生殖道的合并感染: 生殖道的感染常为多种微生物的合并感染[2,5],感染NGH妇女的宫颈中CT分离率为31%~63%,而感染CT妇女中NGH分离率为18%~42%[5]。UU感染也可合并CT或NGH感染[3]。本研究中,不孕组CT与NGH合并感染10例(8.1%),UU和NGH合并感染3例(4.6%),NGH与CT及UU感染间均有显著相关性(P<0.05)。提示,输卵管的NGH感染可能增加了CT和UU感染的危险性。由此可见,对不孕患者行生殖道CT、NGH 及UU的全面检查,应做为一项重要的病因诊断参考依据,因病施治,全面提高不孕防治工作的效率。
附表 两组输卵管CT、NGH及UU检出情况
组别 |
总例数 |
CT阳性 |
NGH阳性 |
UU阳性 |
例数 |
阳性率(%) |
例数 |
阳性率(%) |
例数 |
阳性率(%) |
不孕组 |
123 |
18 |
14.6 |
19 |
15.4 |
11 |
16.7 |
对照组 |
60 |
2 |
3.3 |
3 |
5.0 |
0 |
0 |
不孕组与对照组分别检测了66和34例
参考文献
1 李豫峰.沙眼衣原体生殖道感染与不孕.国外医学计划生育分册,1995,14:80-82.
2 Soper DE,Brockwell NJ,Dalton HP,et al.Observations concerning the microbial etiology of acute salpingitis. Am J Obstet Gynecol,1994,170:1008-1017.
3 王荷英.性传播疾病中的支原体感染.中国医学论坛报,1995,10(感染专刊):9.
4 Henry-Suchet J,Catalan F,Loffredo V,et al.Chlamydia trachomatis associated with chronic inflammation in abdominal specimens from women selected for tuboplasty.Fertil Steril,1981,36:599-605.
5 李振英.女性生殖器官沙眼衣原体感染.实用妇产科杂志,1988,4:130-132.
(收稿:1997-07-23 修回:1998-03-18)