胃癌根治术对单细胞入血转移的影响
世界华人消化杂志 1998年第7期第6卷 研究原著
作者：赵增顺 王少文 焦喜林 陈金辉
单位：白求恩国际和平医院普外科 河北省石家庄市 050082
关键词：胃肿瘤/外科学；腺癌/外科学；胃肿瘤/病理学；腺癌/病理学；肿瘤转移；胃切除术
influence of radical gastrectomy on single cancer cells to blood metastases
zHAO Zeng-Shun, WANG Shao-Wen, JIAO Xi-Lin and CHEN Jin-Hui
department of Surgery, Bethune International Peace Hospital, Shijiazhuang050082, Hebei Province, China
subject headings stomach neoplasms/surgery; stomach neoplasms/pathology; adenocarcinoma/surgery; adenocarcinoma/pathology; neoplasms metastasis; gastrectomy
Abstract
aIM The cancer cells in the portal vein was checked up during operation for gastric cancer to find the relationship between radical gastrectomy and single cells metastases via portal vein.
mETHODS Radical gastrectomy was performed on 126 cases, male 89, female 37, aged 32-78 years. samples were aspirated from portal vein blood during operation and examined: anti-EMA monoantibody was used to mark the cancer deciduous cells in portal vein blood, and ABC immunohistochemical staining was used to show the marked cells.
rESULTS Positive cancer cells were found in 39 (60.0%) of among 65 cases of gastric cancer during radical operation (positive rate 60.0%), but only 13 (27.1%) cases were found to have positive cells among 61 cases in the control group.There was a highly significant difference between the two groups statistically (χ2=28.28，P＜0.005).
cONCLUSION Operation on gastric cancer can highly promote cells of gastric cancer to scatter into the portal vein. So blocking the relative venous confluent channels at first in the radical gastrectomy can reduce the iatrogenic metastases via blood stream.
中国图书资料分类号 R735.205.6 R735.202.61
摘 要
目的 在胃癌手术过程中，对门静脉血进行连续检测，检查是否存在有脱落的癌细胞，以此来证明手术对单细胞血行转移的影响.
方法 胃癌根治手术126例，男89例，女37例. 年龄32岁～78岁.术中抽门静脉血检测有无癌细胞，并观察挤压肿瘤的影响.对所抽取的标本用EMA单抗，ABC免疫法染色，检测癌细胞.
结果 在受检组的65例中有39例阳性(60.0%)，对照组61例中有13例阳性(27.1%).两组间有非常显著性差异(χ2=28.28，P＜0.005).
结论 对肿瘤区的手术操作有促使肿瘤细胞脱落的高度危险性.而首先阻断有关的静脉汇流途径可减少医源性血行转移.
0 引言
胃癌的治疗，临床上仍以手术为首选，而手术的操作过程，有促使癌细胞转移的危险.但就此所致的转移率，其量化因素有多大，经检索近10a国内外文献，尚未见有此类报告.1995-11/1997-11我们对126例胃癌患者术中对门静脉血连续抽样并采用免疫组化方法进行了对照研究.报告如下.
1 对象和方法
1.1 对象 全组126例，男89例，女37例，年龄32岁～78岁，平均63.8岁±1.4岁.术前均经上消化道造影和内镜活检确诊为胃癌，其中胃窦癌34例，胃体癌68例，胃底贲门癌24例.组织学类型：高分化腺癌9例，中分化腺癌26例，低分化腺癌71例，粘液细胞癌20例. dNA含量为异倍体者92例，多倍体者24例. 国际TNM分期：T2N1M0 12例，T2N2M073例，T3N2M0 24例，T3N2M1 17例. 实施手术方法：根治2(R2)98例，根治3(R3)28例.
1.2 方法 经开腹探查证实可行根治性手术.首先选择一支流向门静脉的静脉血管(一般选择结肠中静脉的一个侧支)，并测量插管部位至肝门部的距离，以设定插入导管的深度，采用中国医学科学院肿瘤医院全国大肠癌研究中心提供的静脉导管，将导管插入门静脉主干，一般深度为15cm～20cm.受检患者随机分为两组：阳性抽样组65例：即依照目前各种手术图谱所示的方法步骤进行手术操作，并在对肿瘤区挤压相对较强时分次取门静脉血样本3次，各4mL.阴性对照组61例，即在对肿瘤切除及淋巴结清扫前，首先将网膜动、静脉，胃右动脉及冠状静脉结扎.而后再在对肿瘤挤压相对较强时分次取门静脉血样本，次数及样本量与上述相同.分别将血标本置入备有1mL肝素的试管中.对不同时间取得的标本进行Ficoll离心，吸出界面大细胞成分(包括肿瘤细胞)经PBS液反复处理后，采用EMA单抗(华美生物工程公司上海分公司提供)为探针进行免疫组化染色.阳性标准.根据Dearnalery［1］染色的细胞类型及每次所制作的典型阳性细胞［2］，均经多人读片查正.
统计学处理 对结果进行χ2检验.
2 结果
在阳性受检组的65例中有39例检出阳性细胞. 总的阳性率60.0%；而阴性对照组的61例中，仅有13例检出阳性细胞，总的阳性率为27.1%，两组间有非常显著性差异(P＜0.005).统计结果还表明，肿瘤的分化类型TNM分期肿瘤的所在部位及DNA倍体不同而各有差异.年龄因素则无显著性影响，表1～4.在受检组病期较晚的患者，组织学分化程度差者，特别是粘液细胞癌及DNA异倍体者其阳性率明显高于其他.而在对照组，在各组间则未发现显著性差异.但病期较晚的及粘液细胞癌其阳性率各有所上升.
表1 胃癌组织学类型及阳性结果对比 n(%)
| 分组 |
高分化癌 |
中分化癌 |
低分化癌 |
粘液细胞癌 |
| 受检组 |
1/5(20.0) |
4/13(28.6) |
27/38(69.2)a |
7/9(77.8)a |
| 对照组 |
1/4(25.0) |
1/13( 7.7) |
8/35(22.9) |
3/9(33.3) |
aP＜0.005, vs 高中分化癌.
表2 胃癌TNM分期与阳性结果关系 n(%)
| 分组 |
T2N1M0b |
T2N2M0 |
T3N2M0 |
T3N2M1 |
| 受检组 |
1/5(20.0) |
16/33(44.5) |
22/27(81.5) |
0 |
| 对照组 |
0/6 (0.0) |
1/28(14.2) |
2/10(20.0) |
5/17(29.4) |
bP＜0.01, vs T2N2M0.
表3 胃癌的所在部位与阳性结果关系 n(%)
| 分组 |
胃窦癌 |
胃体癌 |
胃底贲门癌 |
| 受检组 |
9/18(50.0) |
17/32(53.1) |
13/15(86.7) |
| 对照组 |
2/20(10.0) |
6/25(24.0) |
5/16(31.3) |
表4 胃癌DNA倍体与阳性结果关系
| 分组 |
异倍体 |
多倍体 |
| 受检组 |
33/46(71.7)b |
6/19(31.6) |
| 对照组 |
11/52(21.2) |
2/
+
9(22.2) |
bP＜0.01, vs 多倍体.
3 讨论
在胃癌手术中如何防止癌转移种植及扩散，怎样保证无瘤手术的正确实施，一般认为对已侵出浆膜面的癌瘤和切口创缘，必须用纱布妥善地覆盖保护，若瘤体在术中无意地切开或破裂，需用纱垫包裹完善，并及时更换被污染的手套和手术用品，以避免和减少医源性的癌细胞转移和种植.但在对肿瘤患者的手术过程中，是否促使癌细胞转移以及转移量多少，到目前为止，除临床上的一般性定期随访措施外，尚无其他理想的检测手段.为了解消化道癌对全身的影响，临床上广泛采用癌胚抗原(CEA)等来分析和判断预后.手术的影响，尚无系统的研究资料［2］而成为临床学者悬而未解的问题.为说明手术操作与单细胞转移间的关系，我们在术中通过连续检测门静脉血，并采用先进的免疫组化技术对126例胃癌患者进行了系统的对照性研究.结果提示，在受检的65例中，总阳性率为60.0%，这与在骨髓中所检出的微小转移灶的阳性率54.4%［3］基本接近.为说明对肿瘤挤压与单细胞转移的影响，在进行肿瘤切除的操作前，首先将有关血管结扎，而后再进行取样受检(对照组)，所检出的阳性结果与受检组之间有非常显著性差异(P＜0.01).由此证明，在对肿瘤的手术过程中，肿瘤单细胞转移是一个重要的影响因素.通过分组统计还证明，其转移率与患者病期的早晚、肿瘤本身的生物学行为及DNA倍体密切相关.肿瘤单细胞出现越多，证明细胞之间的粘附性越差，越易受外力的影响而分离游走［4］.肿瘤细胞特性既是如此，但在手术中将大部相关回流血途径阻断，再进行肿瘤区的各种操作，可明显减少转移，但由于胃体部的血流丰富，其血流回流途径也并非单一，因此在对肿瘤的操作过程中，仍需轻巧，最大限度的避免直接揉按瘤体，使肿瘤细胞的分离减少到最低限度，以防止医源性血行转移.
4 参考文献
1 Dearnalery d, Sloane J, Ormerod M. Increased detectioin of mamary carcinoma cell in marrow smers using the antisera to epithelial membrane antigen. Br J Cancer,1981;44(1):85-88
2 赵增顺，黎介寿. 消化道恶性肿瘤的骨髓单细胞转移.国外医学肿瘤学分册，1996；23(6)：344-345
3 赵增顺，刘福坤，黎介寿.胃癌骨髓微小转移灶的定量检测及临床意义. 中华消化杂志，1995；15(6)：342-344
4 江希明，郑树，主编. 肿瘤生物学.杭州：浙江科学技术出版社，1990：231-236 赵增顺，男，1952-03-16生，河北省栾城人，汉族. 1979年毕业于第三军医大学.曾拜黎介寿教授为师攻研有关消化道肿瘤课题，副主任/副主任医师，副教授.发表论文50篇，获全军科技进步二等奖1项，三、四等奖各3项.
通讯作者 赵增顺，050082，白求恩国际和平医院普外科.
correspondence to:ZHAO Zeng-Shun, department of Surgery, Bethune International Peace Hospital, Shijiazhuang050082, Hebei Province, China收稿日期 1998-04-08
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