大肠癌患者促胃液素检测的临床意义

世界华人消化杂志 1998年第8期第0卷 Original Articles

作者：何渝军　何双梧　谢　斌

单位：第三军医大学大坪医院野战外科研究所普外科　重庆市　400042

关键词：大肠/病理学；促胃液素/血液；肠肿瘤/血液；肠粘膜

Clinical significance of measurement of gastrin levels in patients with colorectal carcinoma

HE Yu-Jun, HE Shuang-Wu and XIE Bin

　　Department of General Surgery, Daping Hospital and Research Institute of Surgery, The Third Military Medical University, Chongqing 400042, China

　　Subject headings　intestine, large/pathology; gastrin/blood; intestinal neoplasms/blood; intestinal mucosa

　　Abstract

　　AIM　To study the clinical significance of gastrin (Gas) levels in serum and cancer cells in patients with colorectal carcinoma.

　　METHODS　Gas contents in serum, cancer cells, cancer-adjacent mucosa cells (CAMC) were measured by radioimmunoassay in 35 patients with colorectal carcinoma.

　　RESULTS　Before and after operation, there was no significant correlation between the patients with colorectal carcinoma and the control (P＞0.05) in the serum Gas levels. After radical operation the Gas levels in serum were obviously lower than before operation (29 ng/ L±5 ng/ L vs 35 ng/ L±12 ng/ L, t=2.772, P＜0.01)， especially in highly and moderately differentiated adenocarcinoma (36 ng/ L±16 ng/ L vs 28 ng/ L±5 ng/ L, 38 ng/ L±7 ng/ L vs 27 ng/ L±3 ng/ L, t=2.152 and 2.356, P＜0.05). The Gas levels in cancer cells were obviously higher than that in CAMC (213ag/ cell±72ag/ cell vs 147ag/ cell±36ag/ cell, 139ag/ cell±32ag/ cell; t=4.891 and 5.613, P＜0.01) and normal mucosas cells (136ag/ cell±46ag/ cell, t=2.534, P＜0.05). The Gas levels in highly differentiated adenocarcinoma were obviously higher than that in poorly differentiated and mucinous adenocarcinoma (241ag/ cell±78ag/ cell vs 161ag/ cell±46ag/ cell, t=2.505, P＜0.05).

　　CONCLUSION　The colorectal carcinoma cells secrete Gas through autocrine. The elevation of Gas in colorectal carcinoma serves as a marker of well differentiation.

　　主题词　大肠/病理学；促胃液素/血液；肠肿瘤/血液；肠粘膜

　　中国图书资料分类号　R 735.340.43

　　摘　要

　　目的　研究大肠癌患者血清及癌细胞内促胃液素(Gas)水平及临床意义.

　　方法　采用RIA法检测35例大肠癌患者血清和癌细胞及癌旁粘膜细胞内Gas水平.

　　结果　大肠癌患者术前、术后血清Gas水平与对照组无显著差异(P＞0.05)，根治术后明显低于术前(29 ng/ L±5 ng/ L vs 35 ng/ L±12 ng/ L，t=2.772，P＜0.01)，在高分化(36 ng/ L±16 ng/ L vs 28 ng/ L±5 ng/ L)和中分化腺癌组中(38 ng/ L±7 ng/ L vs 27 ng/ L±3 ng/ L)差异显著(t=2.152和2.356，P＜0.05). 大肠癌细胞内Gas水平明显高于癌旁3 cm和6 cm粘膜(213ag/ 细胞±72ag/ 细胞 vs 147ag/ 细胞±36ag/ 细胞，139ag/ 细胞±32ag/ 细胞；t=4.891和5.613，P＜0.01)和正常粘膜(136ag/ 细胞±46ag/ 细胞；t=2.534，P＜0.05)，高分化腺癌明显高于低分化和粘液腺癌(241ag/ 细胞±78ag/ 细胞 vs 161ag/ 细胞±46ag/ 细胞，t=2.505，P＜0.05).

　　结论　大肠癌细胞可通过自分泌方式分泌Gas，Gas升高是大肠癌分化良好的标志.

　　0　引言

　　促胃液素(Gas)不仅能调节胃酸分泌，促进正常胃肠粘膜的生长，而且对部分胃肠肿瘤的发生、发展也有促进作用. 我们应用RIA法对35例大肠癌患者血清及癌细胞内Gas进行测定，以探讨Gas的作用及临床意义.

　　1　对象和方法

　　1.1　对象　我院普外科1996-08/ 1997-04行大肠癌根治术的患者35例，排除消化性溃疡、恶性贫血、内分泌疾病及其他恶性肿瘤，肝肾功能正常，无长期服用H₂受体阻滞剂及胃肠手术病史. 其中男19例，女16例，平均年龄57.4岁. 正常血清对照组为同期住院手术患者30例，男13例，女17例，平均年龄50.6岁，其中疝10例，乳腺良性肿瘤12例，肛旁脓肿8例. 正常大肠粘膜组6例，男4例，女2例，平均年龄43.5岁，其中直肠内脱垂3例，乙状结肠扭转1例，意外死亡2例. 以上病例均经病理学检查确诊.

　　1.2　方法　术前及术后10 d～14 d抽取患者清晨空腹血2 mL，4℃下4000 r/ min离心10min，取血清封口后置-30℃保存待测. 切取手术切除的肿瘤组织，癌旁3 cm及6 cm处大肠粘膜各3 g，一半放入盛有PRMI1640液的无菌瓶中，立即送实验室，另一半送病理检查. 采用Sirinek et al^［1］方法，用胰蛋白酶与胶原酶将组织制成细胞悬液，调整细胞浓度为5×10⁹/ L，经光镜、透射电镜及角蛋白免疫组化法鉴定，证实95%以上为大肠癌细胞. 取1 mL细胞悬液加入沸生理盐水2 mL煮20min，匀浆后，10 000 r/ min离心30min，取上清液-30℃保存待测. 用RIA法测定血清及癌细胞内Gas含量，Gas放射免疫药盒购自北京免疫试剂研究所，检测具有生物学活性的17肽Gas，具体操作按药盒说明书进行. 用FJ-2008自动免疫计数器及数据处理机测定并打印出结果.

　　统计学处理　结果以±s表示，采用t检验和方差分析.

　　2　结果

　　大肠癌患者术前血清Gas为35 ng/ L±12 ng/ L，较对照组(31 ng/ L±7 ng/ L)增高，但无统计学意义(P＞0.05). 根治术后Gas为29 ng/ L±5 ng/ L，明显低于术前(P＜0.01). 对照组术后为30 ng/ L±6 ng/ L，与术前比无显著差异(P＞0.05). 在高分化和中分化腺癌中，术后血清Gas较术前明显下降(P＜0.05)，在低分化和粘液腺癌及各Duke＇s分期中无显著性差异(P＞0.05，表1).

　　大肠癌细胞内Gas水平显著高于癌旁3 cm和6 cm处粘膜细胞内Gas(P＜0.01)，亦高于正常粘膜细胞内Gas水平(P＜0.05). 癌旁3，6 cm与正常粘膜比无显著性差异(P＞0.05，表2). 高分化腺癌细胞内Gas显著高于低分化和粘液腺癌(P＜0.05)，高分化较中分化腺癌、中分化较低分化和粘液腺癌细胞内Gas均有所升高，但无统计学意义(P＞0.05). 各Duke＇s分期及癌旁粘膜细胞内Gas水平无显著差异(P＞0.05，表3).

表1　大肠癌患者血清Gas水平(ng/ L， ±s)

　　^aP＜0.05，vs 术前.

表2　大肠癌和癌旁粘膜细胞内Gas水平(ag/ 细胞，±s)

　　^aP＜0.05，vs 正常粘膜；^bP＜0.01，vs 癌旁3 cm和6 cm.

表3　不同类型和分期大肠癌细胞内Gas水平(ag/ 细胞，±s)

　　^aP＜0.05，vs 低分化和粘液腺癌.

　　3　讨论

　　近年研究发现Gas与消化道肿瘤的生长有密切关系. Gas对50%胃肠肿瘤和大部分培养的结肠癌细胞具有促增殖作用^［2］. 应用PCR等方法在人结肠正常粘膜和肿瘤组织中均能检测到Gas mRNA^［3］. Hoosein et al^［4］在结肠癌HCT116和CBS细胞株的培养基中检测每72 h Gas浓度为10ag/ 细胞～15ag/ 细胞，说明结肠癌细胞能分泌Gas，刺激癌细胞生长. 目前认为Gas是一种自分泌生长因子，它可通过自分泌、旁分泌及神经内分泌方式发挥作用. Graham^［2］分析Gas可能有两种作用模式：肿瘤细胞内合成的Gas mRNA，翻译成Gas前体，一部分Gas前体直接作用于胞质内的结合位点而发挥作用. 另一部分Gas前体或成熟的Gas分泌到胞外与细胞表面的Gas受体结合，然后传递有丝分裂信号到胞核而促进细胞增殖.

　　关于大肠癌患者血清Gas水平还有争议，Khalturin et al^［5］报道大肠癌患者术前血清Gas水平明显高于对照组，根治术后明显降低，与肿瘤分期及2 a生存率呈负相关. 但Penman et al^［6］发现大肠癌患者术前Gas水平和对照组无差异，肿瘤切除术后血清Gas也不降低. 我们的检测结果发现，大肠癌患者术前血清Gas高于对照组，但无统计学意义，根治术后血清Gas水平较术前明显降低，特别在高分化和中分化腺癌中差异显著. 大肠癌细胞内Gas明显高于癌旁粘膜和正常粘膜，高分化腺癌细胞内Gas水平明显高于低分化和粘液腺癌，高分化较中分化及中分化较低分化腺癌均有所增高. 这些结果说明部分大肠癌细胞分泌产生Gas后，可能主要通过自分泌方式发挥作用，其分泌产生的Gas大部分就地产生，就地灭活，仅有部分Gas入血. 根治术后，因消除Gas来源而使其含量下降. 血清Gas受胃肠手术、药物、幽门螺杆菌感染及Gas自身的不稳定等因素影响，不能完全代表组织细胞内Gas水平. 在分化良好的癌细胞因具有较为完善的肽加工酶和辅助因子，使成熟的Gas增加，而分化不良的癌细胞内Gas前体加工成熟不完全，使Gas前体积蓄而成熟Gas产生不足. 我们认为大肠癌细胞内Gas水平增高是其分化良好的标志.

　　目前国外已应用Gas受体拮抗剂丙谷胺治疗胃肠肿瘤，能降低大肠癌肝转移切除后的复发^［7］. 我们发现高分化腺癌患者血清及癌细胞内Gas含量明显升高，推测其可能对Gas较敏感，故选择高分化腺癌及高促胃液素血症大肠癌患者进行抗Gas治疗可能有良好效果. 随着Gas与大肠癌关系研究的不断深入，寻找安全、高效的抗Gas药物，将为大肠癌的治疗开辟一条新的非细胞毒性的辅助治疗途径.

　　何渝军，男，1969-06-01生，江西省万安县人，汉族. 1998年第三军医大学普外专业硕士毕业，主要从事胃肠激素与大肠癌关系的研究.

　　通讯作者　何渝军，400042，第三军医大学大坪医院野战外科研究所普外科，重庆市渝中区长江支路10号.

　　Correspondence to:HE Yu-Jun, Department of General Surgery, Daping Hospital and Research Institute of Surgery, The Third Military Medical University, 10 Changjiangzhilu, Yuzhong District, Chongqing 400042, China

　　Tel. +86·23·68757248

　　收稿日期　1998-01-20

　　4　参考文献

　　1　Sirinek KR, Levine BA, Moyer MP. Pentagastrin stimulates in vitro growth of normal and maligant human colon eithelial cells. Am J Surg, 1985;149(1):35-39

　　2 Baldwin GS. The role of gastrin and cholecystokinin in normal and neoplastic gastrointestional growth. J Gastroenterol Hepatol, 1995;10(3):215-223

　　3 Finley GG, Koski RA, Melhem MF, Pipas JM, Meisler AI. Expression of the gastrin gene in the normal human colon and colorectal adenocarcinoma. Cancer Res, 1993;53(15):2919-2926

　　4 Hoosein NM, Kiener PA, Curry RC, Brattain MG. Evidence of autocrine growth stimulation of cultured colon tumor cells by gastrin/ cholecystokinin like peptite. Exp Cell Res, 1990;186(1):15-21

　　5 Khalturin VIu, Gamaiunoua VB, Mel＇nikov RA, Bershtein LM. Features of blood gastrin in patients with colorectal cancer: possible prognostic significance. Vopr Onkol, 1994;40(1-3):50-53

　　6 Penman ID, El-Omar E, Ardill JE, McGregor JR, Galloway DJ, O＇Dwyer PJ et al. Plasma gastrin concentration are normal in patients with colorectal neoplasia and unaltered following tumor resection. Gastroenterology, 1994;106(5):1263-1270

　　7 Kameyama M, Nakamori S, Imaoka S, Yasuda T, Nakano H, Ohigashi H et al. Adjuvant chemo-endocrine chemotherapy with gastrin antagonist after resection of liver metastasis in colorectal cancer. Gan To Kagaku Ryoho, 1994;21(13):2169-2171