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大肠癌患者外周血树突状细胞免疫功能研究

大肠癌患者外周血树突状细胞免疫功能研究

世界华消化杂志 1999年第5期第0卷 研究快报

作者:李明松 袁爱力 张万岱 陈学清 张亚历 周殿元

单位:第一军医大学南方医院消化科 广东省广州市 510515

关键词:结直肠肿瘤/ 免疫学;免疫,细胞;树突状细胞

  Subject headings colorectal neoplasms/ immunology; immunity, cellular; dendritic cells

  中国图书馆分类号 R 735.34

  本实验检测大肠癌患者外周血树突状细胞(DC)表面HLA-DR及B7表达水平,并进一步探讨DC表面HLA-DR及B7表达水平与DC免疫功能的相关性及其在肿瘤逃避宿主免疫监视中的作用及机制.

  1 材料和方法

  1.1 材料 1996/ 1997本院病理确诊Duke c期大肠癌患者11例,男8例,女3例,年龄30岁~65岁,平均49岁,均未接受任何抗肿瘤治疗.健康10例(本校学员),男女各5例,年龄20岁~24岁,平均21岁.

  1.2 方法 参照Thomas方法[1]分离及纯化DC及T细胞. fITC荧光素标记的抗CD83 mAb特异性地显示DC,台盼蓝染色检测DC成活率.以FITC标记的抗HLA-DR及B7 mAb按间接免疫荧光法通过FCM检测肝癌患者及正常DC表面HLA-DR及B7表达水平(荧光值,VOF)[2].检测肝癌及正常DC诱导自体T淋巴细胞增殖反应. 检测正常DC表面HLA-DR及B7被抗HLA-DR mAb及抗B7 mAb封闭(抗体与其配体结合处于饱和状态)后其诱导自体T淋巴细胞增殖能力.

  2 结果

  从大肠癌及正常外周血中分离出的DC经抗CD83 mAb以间接免疫法特异性染色显示DC的纯度达80%,台盼蓝染色显示其活力在90%以上.大肠癌患者DC表面HLA-DR及B7表达水平(VOF,8.6±1.3及7.9±1.1)均明显低于对照组(VOF,12±1.1及13±0.9),两者相差显著(P<0.05).对照组及大肠癌患者DC诱导自体混合T淋巴细胞增殖能力(cpm)分别为11766±110及6870±90,两者相差非常显著(P<0.01).正常DC表面HLA-DR及B7被抗HLA-DR mAb及抗B7 mAb封闭后其免疫诱导能力明显下降(cpm,由11766±110降至5908±85),两者相差非常显著(P<0.01).

  3 讨论

  宿主对肿瘤的攻击依赖于宿主高效而特异的抗肿瘤免疫,尤其是T细胞免疫.然而要启动高效而特异的抗肿瘤免疫,宿主抗原递呈细胞,主要是DC,必须具备良好的免疫功能,尤其是DC表面HLA及B7等免疫分子的表达水平. dC表面HLA及B7等免疫分子的正常表达是DC识别、捕捉抗原性物质,识别肿瘤细胞及免疫细胞间信息传递的必须条件之一.

  本实验以正常作对照,发现大肠癌患者外周血DC表面HLA-DR及B7表达明显低于正常;大肠癌患者外周血DC表面HLA-DR及B7表达明显低下,其DC诱导免疫能力亦相应低下;封闭正常DC表面的HLA-DR及B7,则该DC免疫诱导能力亦明显下降.提示大肠癌患者的DC表面HLA-DR及B7表达水平与DC免疫能力密切相关,DC表面HLA-DR及B7表达水平低下导致DC免疫功能低下,并进一步影响宿主抗肿瘤免疫功能.同时我们近期的实验还发现,培养大肠癌细胞系LOVO肿瘤细胞上清液能明显抑制大肠癌患者外周血DC表面HLA-DR及B7表达并进一步抑制DC免疫功能,推测大肠癌患者外周血中可能存在源于肿瘤细胞的细胞因子,该类细胞因子可能通过抑制DC表面HLA-DR及B7等免疫分子表达从而抑制DC免疫功能,导致宿主抗肿瘤免疫无能及肿瘤逃避宿主免疫监视.

  通讯作者:李明松

  4 参考文献

  [1] Thomas R, Davis LS, Lipsky PE. Isolation and characterization of human peripheral blood dendritic cells. J Immunol,1993;150:821-834

  [2] 张君和. 单克隆抗体及细胞免疫实验技术. 第1版.昆明:云南科技出版社,1986:115-126

收稿日期:1998-11-09 修回日期:1998-12-30


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