30例儿童急性粒细胞白血病M₂亚型细胞遗传学分析

　　苏州医学院学报2000年第20卷第12期

朱晨　何军　何海龙

　　摘 要 目的：了解儿童急性粒细胞白血病(AML)M₂亚型遗传学特征。方法：初步分析30例儿童AML-M₂的染色体核型变化。结果：30例儿童AML-M₂染色体核型中伴t(8;21)(q22;q22)组占46.67%(14/30)，正常核型组占36.67%(11/30)，其它异常核型组占16.66%(5/30)，其中有1例为罕见的伴t(8;21)(q22;q22)的亚四倍体核型。结论：证实了t(8;21)易位染色体为儿童AML-M₂亚型较为特征性的遗传学变化。

　　关键词：急性粒细胞性白血病；核型；M₂；易位t(18;21)

　　急性白血病(AL)的形态学、免疫学及细胞遗传学(MIC)分型对诊断、治疗、预后判断有重要的临床意义，其中细胞遗传学分型对急性粒细胞白血病(AML)亚型的判断具有更重要的价值。为了了解儿童急性粒细胞白血病M₂亚型的染色体核型变化，本文报道30例的研究资料。

　　1　资料与方法

　　1.1　研究对象　1997年6月～1999年12月，我院门诊及住院初治AML患儿61例，其中男39例，女22例，年龄2～10岁。诊断与疗效标准根据1987年全国白血病化疗讨论会制定的标准。

　　1.2　形态学检查　骨髓及血涂片经瑞氏染色后分类计数，常规进行过氧化酶染色。必要时进行非特异性酯酶染色+氟化物抑制试验。按FAB标准确定AML亚型。

　　1.3　细胞遗传学检查　治疗前取肝素抗凝骨髓3ml，直接法及24h培养法制备染色体标本，显带方法大部分用R带，部分用G带，根据国际人类染色体命名法(ISCN，1995年)命名核型。

　　1.4　免疫分型　标本采集同“1.3”项，常规分离单个核细胞，采用活细胞间接免疫荧光标记，流式细胞仪(FCM)(Epics xL型，Coulter公司，USA)检测。单抗采用T系列的CD2、CD3、CD7，B系列的CD10、CD19、CD22，髓系列的CD13、CD14、CD33、CD42b、CD61及干(祖)系列的CD34等。CD42b(SZ-2)及CD61(SZ-21)为江苏省血液研究所研制，其余单抗由法国Immunotch公司提供。二抗为异硫氰酸酯(FITC)标记的羊抗鼠免疫球蛋白。阳性标准：淋系及髓系抗原阳性细胞20%，CD3410%^［1］。

　　1.5　治疗　诱导化疗采用DA(柔红霉素、阿糖胞苷)和HA(高三尖杉酯碱、阿糖胞苷)方案，用法参照全国儿童白血病协作方案(内部资料)。完全缓解(CR)后采用原方案、大剂量MTX、COAP及中剂量Ara-C等方案交替强化，定期鞘内注射MTX预防中枢神经系统白血病。

　　2　结果

　　2.1　形态学分型　按FAB标准，61例AML中共有M₂亚型30例，占49.18%；其他亚型31例，占50.82%。

　　2.2　细胞遗传学特征　经形态学诊断为AML-M₂的30例白血病患儿经染色体核型分型，有异常核型共19例，其中t(8;21)组14例，占M₂亚型的46.67%，其它异常核型组5例，占16.66%，正常核型组11例，占M₂亚型36.67%。有1例为伴t(8;21)的亚四倍体核型，核型为45,X,Y,t(8;21)/90XX,-Y×2,t(8;21)×2/46,XY。

　　2.3　免疫表型分析　对30例儿童M₂白血病进行免疫表型分析，30例患儿均为髓系表达，CD13、CD33、CD34髓系抗原阳性细胞＞20%。

　　3　讨论

　　细胞遗传学分型较形态学及免疫学分型更能反映急性白血病，尤其是急性粒细胞白血病的生物学特征。由于某些AML亚型有较特异性的染色体异常，对AML亚型的细胞遗传学特征研究就具有十分重要的意义^［2］。M₂亚型是儿童AML最常见的类型，许多研究发现t(8;21)易位与M₂相关，一般认为92%t(8;21)染色体变化属于AML中的M₂亚群，另在M₁、M₄中可见，出现频率为12%。本组14例伴t(8;21)染色体畸变者均为M₂，未在其它亚型中发现有此变化，特异性达100%，略高于MIC会议报道^［3］，这可能与本组样本量偏少有关，而在出现频率上基本一致。值得一提的是本文发现了1例亚四倍体的t(8;21)核型，在AML中实属罕见，报道较少，国内外总数低于30例，此病例详细资料已报道^［4］。

　　分子生物学的研究发现，t(8;21)易位导致原位于21号染色体上的AML₁基因和8号染色体上的ETO基因融合，形成AML₁-ETO融合基因转录本。AML₁-ETO是一种转录因子，直接参与M₂的发病机理。因此，检测AML₁-ETO融合基因是对白血病患儿染色体未检测出t(8;21)易位的补充，也能作为M₂患儿缓解、长期生存、微小残留病(MDR)的检测指标。

　　朱晨（苏州大学附属儿童医院，苏州，215003)

　　何军（苏州大学附属儿童医院，苏州，215003)

　　何海龙（苏州大学附属儿童医院，苏州，215003）

　　参考文献

　　1，李建勇，夏学鸣，唐晓文，等.髓系抗原在成人急性淋巴细胞白血病中的临床意义.中华内科杂志，1997，36(2)∶119～120

　　2，李建勇，薛永权，夏学鸣，等.98例成人急性白血病形态学、免疫学和细胞遗传学分型诊断.中华肿瘤杂志，1996，18(2)∶150～153

　　3，Second MIC cooperating study group. MIC working classification of acute myeloid leukemia. Cancer Genet Cytogenent， 1988，80∶1～6

　　4，Yongquan Xue, Jun He, Yang Wang, et al. Secondary near-pentaploidy and/or near-terraploidy characterized by the duplication of 8;21 translocation in the M₂ subtype of acute myeloid leukemia. International Journal of Hematology， 2000，71∶359～361