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CD44v6、PCNA在宫颈癌中的表达及与淋巴结转移的相关性分析

CD44v6、PCNA在宫颈癌中的表达及与淋巴结转移的相关性分析

  中国肿瘤临床1999年第26卷第6期

王冬 王占东 魏庆英 高航

   摘 要 目的:研究细胞粘附分子在肿瘤细胞的增殖,浸润、转移过程中的作用,其中CD44分子是较受关注的。方法:采用免疫组化方法,检测CD44变异体单抗(CD44v6单抗)及增殖细胞核抗原(PCNA单抗)在宫颈浸润癌及转移癌中的表达。发现两者在宫颈癌发生及淋巴结转移中呈明显过表达,阳性率分别是78.9%、84.2%。结果:CD44v6与肿瘤转移密切相关,发生淋巴结转移的宫颈原发癌组织同时伴有细胞增殖活性明显增高。结论:两者的协同检测可做为肿瘤转移判定的生物学指标。

   关键词:CD44分子 PCNA 宫颈癌 免疫组织化学

  CD44分子与肿瘤的关系是近年来较受关注的问题,发生转移的癌组织对CD44v6的过表达是研究CD44分子与肿瘤关系的重要线索。本文应用免疫组化方法探讨CD44v6与宫颈癌转移的关系及与PCNA之间的内在联系。

  1 材料与方法

  1.1 资料来源

  共收集我院1995~1997年门诊活检标本13例,手术标本52例。按FIGO分期标准诊断:Ⅰb期28例,Ⅱa期9例,Ⅱb期22例,Ⅲa期6例。手术组限于≤Ⅱb期。发生淋巴结转移者19例。

  1.2 标本制备

  石蜡切片为5μm厚。CD44v6单抗购于Bender公司,S-P.PCNA试剂购于Maxina公司,染色按S-P试剂盒说明书进行。

  1.3 染色特征及结果判定

  CD44v6染色主要分布于细胞膜,呈深黄色,按Kainz[1]标准判定。阳性,>20%肿瘤区域呈强染色,>80%肿瘤区域呈弱染色,但细胞膜染色清晰。阴性,其它染色情况均为阴性。PCNA染色主要分布在细胞核,出现染色颗粒为阳性细胞。Ⅰ级为0~25%、Ⅱ级26%~50%、Ⅲ级51%~75%、Ⅳ>75%,Ⅰ~Ⅱ级为弱表达,Ⅲ~Ⅳ级为强表达。

  1.4 统计方法

  采用卡方检验。

  2 结果

  CD44v6和PCNA的表达与临床观察指标之间的关系见附表。统计结果表明:65例宫颈浸润癌对CD44v6和PCNA总的阳性表达率分别为52.3%(34/65)、64.6%(42/65)。在手术组中发生淋巴结转移之宫颈原发癌组织中CD44v6和PCNA均呈明显过表达,其阳性表达率分别为78.9(15/19)、84.2(16/19),见图1,2;而无淋巴结转移组的宫颈癌组织中其阳性表达率分别为36.3%(12/33)、54.5%(18/33),两组有明显的差异P<0.005、P<0.05。统计结果还表明CD44v6、PCNA的阳性表达与临床分期无关,P>0.5(χ2检验)。

附表 宫颈癌临床观察指标与CD44v6、PCNA表达的关系

观察指标

例数

CD44v6

阳性%

P

PCNA

阳性%

P

+

-

临床分期

65

34

31

>0.5

42

23

>0.5

Ⅰb~Ⅱa

37

18

19

23

14

Ⅱb

22

12

10

16

6

Ⅲa

6

4

2

3

3

淋巴结转移(手术组)

52

19

15

4

<0.005

16

3

<0.05

33

12

21

18

15

图1 CD44v6在宫颈癌发生淋巴结转移的组织中阳性表达

  s-P法×400

图2 PCNA在宫颈癌发生淋巴结转移的组织中阳性表达

  s-P法×400

  3 讨论

  CD44分子是分布极为广泛的细胞表面糖蛋白,CD44分子根据基因外显子表达方式的不同编码两种不同类型的蛋白即标准型CD44s,和变异型CD44v。在不同细胞上CD44分子由于结构的不同而介导不同的功能,其主要作用在于参与细胞与细胞,细胞与间质之间的粘连;介导淋巴细胞归巢及细胞的迁移[2]。CD44v与肿瘤转移的相关性研究在1991年由Günthert[3]用单克隆技术首先在大鼠胰腺癌组织中得到证实,发现CD44v6仅在发生转移的肿瘤细胞株中表达。Matsumura[4]也证实CD44v6在肿瘤组织中特别是在发生转移的原发癌组织中有异常表达。

  在类TR-PCR和免疫组化方法已获得证实,在乳腺癌、结肠癌等组织中有表达且与淋巴结转移有关[5,6]。本文采用免疫组化方法在宫颈浸润癌组织中做CD44v6表达的研究,结果表明在有淋巴结转移组与无淋巴结转移组的宫颈原发癌组织中比较CD44v6表达存在着显著性差异,其转移组呈明显过表达,但与临床分期无关。此结果与Kainz实验结果一致。

  在无淋巴结转移组中,宫颈原发癌组织仍有36.3%的阳性表达,能否认为或证实具有CD44v6阳性表达的肿瘤具有潜在的转移能力或可能早期发生转移,将是新的课题。目前已有动物实验资料证实CD44v6在癌细胞转移至淋巴结的早期阶段有密切关系[3]

  PCNA是反映细胞增殖状态的一个重要指标[7],在正常细胞转化为肿瘤细胞乃至于发生转移的过程中,细胞进入G1期和S期时都有不同程度的PCNA表达。本实验结果表明PCNA的表达率在有淋巴结转移中的原发宫颈组织中明显高于无转移组,说明细胞增殖活性与肿瘤细胞转移密切相关。这与CD44v6表达有相似之处。研究结果还发现无淋巴结转移组中CD44v6阳性表达的12例中PCNA均呈强表达,结果说明这比癌组织细胞核增殖活跃,从而为CD44v6阳性表达的癌细胞转移至淋巴结的早期阶段有密切关系[3]的论点提供了依据。

  作者单位:白求恩医科大学第二临床学院妇产科(长春市 130042)

参考文献

  1 Kainz C. Immunohistochemical detection of adhesion molecule CD44 splice variants in lymph node metastases of cervical cancer. Int J Cancer,1996;69:170

  2 Lesley J. CD44 and its interation with extracellular matrix. Adv Immunol,1993;54:271

  3 GÜ nthert U.A new variant of glycoprotein CD44 confers metastatic potential to rat carcinoma cells.Cell,1991;65:13

  4 Matsumura Y. Significance of CD44 gene products for cancer diagnosis and disease evaluation.Lancet,1992;340:1053

  5 Joensuu H.Glycoprotein CD44 expression and its association with survival in breast cancer. Am J Pathol,1983;143:867

  6 Kazuo T.Expression of CD44 variant exons 8- 10 colorectal cancer and its relationship to metastasis.Jpn J Cancer Res,1995;86:292

  7 Woods AL. The prognostic value of PCNA immunostaining ingastrointestinal lymphomas. J Pathol,1990;16:342


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