皮质激素与环孢素对哮喘患者外周血单个核细胞的抑制作用

中华结核和呼吸感染 1999年第8期第22卷 论著摘要

作者：李怀臣　王春霞　陈效库　姚秀云　高鲁芳

单位：250021 济南，山东省立医院呼吸科(李怀臣、王春霞、姚秀云、高鲁芳)；肥城矿务局中心医院内科(陈效库)

　　为了探讨激素抵抗型哮喘(SR)^［1］产生的机制，寻找其治疗的有效方法，我们应用酶联免疫吸附试验(ELISA)，观察环孢素A（CsA）和地塞米松（Dex）对激素敏感型哮喘（SS）和SR患者外周血单个核细胞（PBMC）在植物血凝素(PHA)刺激下，合成可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）、白细胞介素4和5（IL-4、IL-5）的功能调节。

　　对象与方法　所有哮喘患者均来自山东省立医院门诊和呼吸科病房，诊断均符合中华医学会制定的诊断标准^［2］。口服泼尼松（20 mg/d）10天后，一秒钟用力呼气容积占预计值百分比（FEV₁占预计值%）改善低于15％者为SR型，＞30％者为SS型，SR型哮喘18例，男10例，女8例，年龄43±15岁，病程(10±6)年，FEV₁占预计值%为(57±9)％。SS型哮喘22例，男12例，女10例，年龄41±15岁，病程(12±7)年。FEV₁占预计值%为(53±9)％。经卡方和组间t检验两组患者在年龄、性别、病程和基础病情中差异无显著性（P＞0.05）。

　　PBMC的分离和培养：无菌抽取患者空腹静脉血10 ml，肝素抗凝，等体积Hank液稀释、混匀，用淋巴细胞分离液（上海试剂二厂）分离获取PBMC，用Hank液洗2遍，将细胞浓度调至2×10⁶/ml，分别接种在含有PHA(美国Sigma公司)、PHA+Dex、PHA+CsA(瑞士Sandoz公司)的RPMI 1640培养基中。37℃ 5%CO₂孵箱中培养48小时，离心取上清液，-80℃保存待测sIL-2R、IL-4，IL-5。用ELISA法检测sIL-2R(北京邦定公司)、IL-4(美国原装进口)、IL-5(深圳晶美公司)含量。

表1　SS型和SR型哮喘患者的PBMC在PHA的刺激下合成

　　sIL-2R、IL-4、IL-5水平比较(±s)

表2　Dex和CsA对SS型哮喘患者PBMC合成sIL-2R、IL-4、

　　IL-5的抑制作用比较(±s)

　　注：与对照组比较P＜0.05；与PHA+Dex组比较^△P＞0.05

表3　Dex和CsA对SR型哮喘患者PBMC合成sIL-2R、IL-4、IL-5

　　的抑制作用比较(±s)

　　注：与PHA组比较^△P＞0.05，P＜0.05；与PHA+Dex组比较^＃P＜0.05　　统计学处理：所有数据均以±s表示，检验方法为组间t检验。

　　结果　(1)SS型和SR型哮喘患者PBMC合成sIL-2R、IL-4、IL-5水平比较：两组患者的PBMC在PHA的刺激下合成sIL-2R、IL-4、IL-5细胞因子差异无显著性（P＞0.05，表1)。(2)Dex和CsA对SS型哮喘患者PBMC合成sIL-2R、IL-4、IL-5的抑制作用比较：10^-6 mol/L Dex和CsA均能抑制SS型哮喘患者合成sIL-2R、IL-4、IL-5细胞因子，二者的抑制作用差异无显著性(P＞0.05，表2)。(3)Dex和CsA对SR型哮喘患者PBMC合成sIL-2R、IL-4、IL-5的抑制作用比较：10^-6 mol/L Dex不能显著抑制SR型哮喘患者的PBMC合成这些细胞因子（P＞0.05）；10^-6 mol/L CsA则能显著抑制其合成（P＜0.05，表3)。

　　讨论　近年的研究表明，T淋巴细胞在哮喘发病的多个环节中发挥重要作用，sIL-2R作为T淋巴细胞活化的标志之一，与哮喘患者的FEV₁占预计值%呈反比^［3］，IL-4通过调节B淋巴细胞合成IgE^［4］,IL-5通过EOS的作用而造成气道上皮的损伤，引起哮喘的发作。

　　我们的试验结果表明，SS型和SR型哮喘的PBMC在PHA（100 mg/L）的刺激下合成sIL-2R、IL-4、IL-5，差异无显著性（P＞0.05）。Dex和CsA均能强力抑制SS型哮喘患者PBMC合成这些细胞因子，但对于SR型哮喘患者的PBMC合成这些细胞因子的抑制作用，二者差异有显著性。10^-6 mol/L Dex不能抑制SR型哮喘患者的PBMC合成这些细胞因子，可能与SR型哮喘患者的PBMC的细胞内糖皮质激素受体减少或缺陷有关，因此，不能抑制淋巴细胞的活化和合成IL-4、IL-5，这可能是产生激素抵抗的机制。CsA能强力抑制SR型患者PBMC合成sIL-2R、IL-4，IL-5。与文献中报道CsA治疗SR型哮喘结果相符^［5］。CsA有希望成为治疗SR型哮喘的有效药物。

　　参考文献

　　1　Carmichae J，Paterson IC，Diaz P，et al Corticosteroid resistance in chronic asthma.Br Med J，1981,282,1419-1422.

　　2　中华医学会呼吸病学会哮喘学组.支气管哮喘的定义、诊断、严重程度分级及疗效判断标准. 中华结核和呼吸杂志，1993，16（哮喘增刊）：5-12.

　　3　Alexander AG, Barnes NC, Kay AB, et al. Clinical response to cyclosporin A in chronic serve asthma is associated with reduction in serum soluble interleukin-2 receptor concentration. Eur Respir J,1995,8:574-578.

　　4　De Vries JE, Gauchat JF, Aversa GG, et al. Regulation of IgE synthesis by cytokines. Curr Opin Immunol, 1991,3:851-858.

　　5　Corrigan CJ, Brown PH, Barnes NC, et al. Glucocorticoid resistance in chronic asthma. glucocorticoid pharmacokinetics, glucocorticoid receptor characteristics , and inhibition of peripheral blood T cell proliferation by glucocorticoids in vitro. Am Rev Respir Dis, 1991,144:1016-1025.

收稿：1999-02-01

　　修回：1999-04-09