L-精氨酸对实验性哮喘治疗作用的研究
中华结核和呼吸感染 2000年第10期第23卷 论著摘要
作者:张铁栓 邵润霞 刘荣西 高元勋
单位:450003 郑州,河南医科大学附属第二医院呼吸科
一氧化氮(NO)具有舒张气道平滑肌缓解哮喘症状和免疫调节作用。但直接吸入NO易造成气道损伤和加重气道炎症[1],L-精氨酸(L-Arg)是产生NO的前体或供体,我们的实验通过雾化吸入L-Arg治疗哮喘动物模型,观察L-Arg对其作用,并探讨其作用机制。
材料与方法 选择健康豚鼠36只,体重(450±25)g ,应用10% 卵清蛋白2 ml注入24只豚鼠腹腔内使其致敏,2周后再吸入5‰卵清蛋白制成哮喘模型。随机分为两组。实验组12只:每日诱发1次,诱发前2 min吸入L-Arg 10 ml(1.0 g/kg),共7 d;空白对照组12只:以同样方法诱发哮喘发作,诱发前2 min吸入雾化生理盐水10 ml;另设置正常对照组12只:按实验程序处理动物,但使用药物均为生理盐水,观察豚鼠的致喘、发作程度和持续时间。三组豚鼠于第8 d心脏穿刺放血处死,留取血浆行右侧支气管肺泡灌洗,收集灌洗液(BALF)行细胞计数和分类;左肺行常规病理与浆细胞染色检查,并分别测定各组豚鼠血浆及BALF中NOˉ2含量。
统计学处理:以±s 表示,用t检验t′ 检验或方差分析进行两样本的差异性检验。
结果 发作程度:实验组哮喘发作的症状明显较空白对照组轻(P<0.001,表1)。
BALF细胞计数:空白对照组为(109 ± 46)×104/ml,实验组为(68±16)×104/ml,正常对照组为(45±13)×104/ml,三组比较差异有显著性(P<0.001及<0.005)。
表1 L-Arg、空白对照组哮喘发作情况比较(±s)
组别 |
鼠数 |
致喘时间
(min) |
哮喘发作
程度(度) |
哮喘持续
时间(min) |
L-Arg组 |
12 |
6.9±2.3 |
1.6±0.7 |
32±8 |
空白对照组 |
12 |
4.8±1.9▲ |
2.4±0.7* |
40±8△ |
注:两组比较▲P<0.001,*P<0.001,△P<0.001 BACF中细胞分类:空白对照组嗜酸细胞为(0.20 ±0.40),L-Arg组为(0.07±0.03),二组比较差异有显著性(P<0.01)。
肺组织学观察:每只动物选3支病变最明显、管经相同、结构相似的支气管行炎症细胞计数,实验组炎症细胞计数为234±69,空白对照组为558±94;另外空白对照组支气管管壁厚度为(65±13) μm,实验组为(48±9) μm,二组比较差异有显著性(P均<0.01);空白对照组支气管管腔内细胞多见团块及粘液阻塞、粘膜水肿及脱落,实验组则少见。
浆细胞染色:空白对照组支气管周围浆细胞数为60±16,实验组为25±6,二组比较差异有显著性(P<0.01)。
血浆NOˉ2中含量测定:各组差异无显著性(P>0.05)。
BALF中的NOˉ2含量测定:实验组为(28.8±6.0)μm/L,空白对照组为(9.3±1.9)μm/L,正常对照组为(6.8±1.3)μm/L,三组比较差异有显著性(P分别<0.01及<0.05)。
讨论 近年来认为,吸入L-Arg对卵清蛋白诱发的实验性哮喘具有治疗作用。其机制可能通过提高内源性NO含量,舒张气道平滑肌[1],调节免疫反应[2],减轻炎症细胞的气道募集,提供非肾上腺素能非胆碱能神经递质[4]等多个环节实现的。强的自由基[5],不适当吸入NO可造成气道损伤,吸入L-Arg可能是一种有前途的治疗支气管哮喘的药物。
参考文献
1.Duppy RM, Shore SA, Drazen JM. Bronchdilator action of inhaled nitric oxide in guinea pigs. I clin Invest,1992,90:421-28.
2.Bult H, Boeck X, Staens GE, et al. Nitric oxide as an inhibitory non-adrenergic non-cholinergic nerotransmitter.Nature, 1990,345:346-346.
3.Kawabe T, Isobek I, Hasegawai I , et al. Immunolsuppressive activity induce by nitric oxide in culture superatant of activated rat alveolar macrophage. Immunology,1992,76:72-78.
(收稿日期:2000-03-21)