16S rDNA序列聚合酶链反应检测胃活检组织中的幽门螺杆菌

　　目前，在幽门螺杆菌（Helicobacter Pylori， Hp）研究领域，胃活检组织中Hp的检测方法很多，本研究目的是为了建立一种不需细菌的Hp检测、分子分型方法，探索此类方法中16S rDNA、VacA、UreA、CagA聚合酶链反应（PCR）对Hp的检测意义及比较它们同临床表现、组织学以及血清学检测结果的相互关系。

　　新鲜的胃活检组织标本源于22例有消化道症状志愿者的胃窦及胃体部。提取活检标本中的全部DNA进行Hp 16S rDNA PCR扩增、Southern印迹分析、 16S rDNA序列分析以及VacA、UrcA PCR、Southren印迹分析。结果显示：通过 16S rDNA PCR及Southern 印迹在22份活检标本中检出17份Hp阳性，而 16S rDNA 序列分析则比Southren印迹分析敏感，在22份不同来源的标本中检测到20份Hp阳性；血清学检测、组织学以及快速尿素酶检测的实验结果是非常吻合的，在上述方法检测阴性的3份标本中（胃体胃炎no： 430，组织学正常标本nos：436、456），16S rDNA分析确定感染有Hp球形体；在9例组织学确定的正常对照中，16S rDNA分析则显示7份活检标本Hp阳性；在13例Hp相关胃炎的患者标本中，418和 430尿素酶阴性，但16S rDNA则证实Hp阳性；16S rDNA分析和 血清学检测在13例Hp相关胃炎的患者中，血清学仅检出1例Hp阳性，而16S rDNA分析则显示7例Hp阳性。以上结果显示，利用PCR技术特别是16S rDNA序列分析技术检测Hp是一种极其敏感的方法，而且无论是Hp野生型还是培养无法检测到的球形体，PCR方法均可以检测到。这种情况在对组织学正常对照的分析中表现得更加明显，在9例标本中发现7例感染有螺杆菌属的细菌。另外，部分16S rDNA测序结果分析显示，在22份活检标本中有6份感染有同参考菌株（ATCC 43504⁺）在V₃和V₄区域不同的Hp菌株。尽管据此可以对Hp进行简单的分类，但是，16S rDNA序列可能对种及亚种的区分并不是足够的，只有同UrcA、CagA和VacA PCR结果相结合才有助于Hp分型。

　　在检测胃活检标本中的Hp中，16S rDNA PCR等方法是高敏感的，但由于该方法在检测组织学和血清学结果Hp阴性的正常对照中所得到的不同结果，使我们有理由相信这些方法用于临床Hp检定并不是十分合适的，目前不太可能取代常规的Hp检测和鉴定方法。

　　（王洪涛摘  张振华校）

国外医学

1999.04.01