慢性萎缩性胃炎幽门螺杆菌检出量与氧自由基关系的研究

临床消化病杂志 1999年第1期第11卷 论著

作者：杨金禄　戴国平　王建维　童新民

单位：浙江省金华市人民医院消化科(金华　321000)

关键词：慢性萎缩性胃炎；幽门螺杆菌；氧自由基；过氧化脂质

　　摘　要　检测71例不同程度感染幽门螺杆菌(HP)的慢性萎缩性胃炎患者(患者组)和70例健康成人(对照组)血浆-一氧化氮(P-NO)、血浆维生素C(P-VC)、血浆维生素E(P-V E)、血浆β-胡萝卜素(P-β-CAR)、血浆过氧化脂质(P-LPO)含量及红细胞超氧化物歧化 酶(E-SOD)、红细胞过氧化氢酶(E-CAT)、红细胞谷胱甘肽过氧化物酶(E-GSH-PX)活性和 红细胞过氧化脂质(E-LPO)含量。结果与对照组比较，患者组的P-VC、P-VE、P-β-CAR 、E-SOD、E-CAT和E-GSH-PX水平均值均显著降低(P＜0.001)，且随H P增多而降低；P-NO、P-LPO和E-LPO平均值均显著升高(P＜0.001)， 且随HP增多而升高。并均呈一定程度的直线回归和相关(P＜0.001)。提 示慢性萎缩性胃炎患者体内的NO代谢异常，氧化和抗氧化平衡严重失调，氧自由基反应和脂 质过氧化反应病理性加剧，且与HP检出量呈正相关。

Studies on Correlation Between Helicobacter Pylori and Nitric Oxide, Oxidation, Lipopero-xidation in Atrophic Gastritis

Yang Jin-lu, Dai Guo-ping Wang Jian-wei, et al

　　Zhejiang Jinhua People's Hospital

　　Abstract To study the correlation between helicobacter pylori and nitric oxide, oxidation, lipoperoxidation in atrophic gastritis. We measured the plasma nitric oxide (P-NO), plasma vitamin C (P-VC), plasma vitamin E (P-VE), plasma β-carotene (P-β-CAR), plasma lipoperroxides (P-LPO) contents and erythrocyte superoxide dismutase (E-SOD), erythrocyte catalase (E-CAT), erythrocyte glutathione peroxidase (E-GSH-PX) activities and erythrocytd lipoperoxides (E-LPO) content in 71 artophic gastritis patients (patient group) and 70 healthy persons (control group). Compared with the control group, the average P-VC, P-VE, P-β-CAR contents and E-SOD, E-CAT, E-GSH-PX activities of patient group decreased clearly, and the average P-NO, P-LPO, E-LPO contnets increased clearly (P＜0.001), with increase of the number of helicobacter pylori. The metabolism of nitric oxide and the balance betwen oxidation and antioxidation in the atrophic gastritis patients were serious imbalanced, oxygen free radical reaction and lipoperoxidation reaction were pathologically exacerbated. Acorrelation was demonstrated among the number of helicobacter pylori, nitric oxide, oxidation, lipoperoxidation.

　　Key words Atrophic gastritis Helicobacter pylori Nitric oxide Li poperoxidation

　　慢性萎缩性胃炎(Atrophic　gastritis,　CAG)与幽门螺杆菌(Helicob acter　pylori,　HP)感染密切相关，但CAG患者HP检出量与氧自由基关系的研究报道甚少， 本文检测71例CAG患者和70例健康成人血浆(Plasma)的一氧化氮(Ntric　Oxide,　NO)、维生 素C(Vitamin　C,VC)、维生素E(Vitamin　E,VE)、β-胡萝卜素(β-Carotene,　β-CAR) 、过氧化脂质(Lipoeroxides,　LPO)含量及红细胞超氧化物歧化酶(Superoxide　dismutase ,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,　CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione　peroxidase,　 GSH-PX)活性及过氧化脂质(Lipoeroxides,　LPO)含量，比较71例CAG患者HP感染程度与上 述各值的直线回归和相关关系，探讨CAG患者体内NO代谢情况，氧化和抗氧化平衡状态及氧 自由基反应和脂质过氧化反应程度及与HP检出量的相关性。

　　1　材料与方法

　　1.1　受检对象

　　1.1.1　患者组：随机选择CAG患者71例，年龄38～61岁，平均年龄48.2±6.5岁，男性45例，女性26例，均经胃镜、病理证实，细菌学检测均检出不同程度的HP(+～+++)。

　　1.1.2　对照组：随机选择健康成人70例，年龄40～60岁，平均年龄49.3±4.8岁，男性45例，女性25例，胃镜诊断正常或轻度浅表性胃炎，HP检测阴性。

　　两组性别、年龄统计学无差异(P＞0.05)，均排除心、脑、肺、肝、肾等疾病及糖尿病、自身免疫性疾病、高血压及肿瘤等。受检前1月内均未抗HP治疗，也未服用 过VC、VE等抗氧化类维生素及萘多酚、银杏叶制剂等抗氧化药物。

　　1.2　检测方法

　　1.2.1　HP检测：距幽门5　cm范围内活检粘膜2块，①尿素酶试验：结果分为阴性、阳性(+～+　++)，②Ginmsa染色，按Monshoy分级法，即0级为无菌，Ⅰ级为认真寻找可见，Ⅱ级为在多数高倍视野下可见，Ⅲ级为很多或成堆。尿素酶试验和Giemsa染色二者均阳性为HP感染。

　　1.2.2　于晨空腹静脉取血，肝素钠抗凝，及时分离血浆和红细胞。P-NO检测采用α-萘胺显色分光光度比色法，结果以nmol/L表示。P-VC和P-VE检测采用亚铁嗪显色比色分析法，结果均以μmol/L表示。P-β-CAR检测采用无水乙醇-石油醚混合抽液比色法，结果以μmol/L表示。E-SOD检测采用邻苯三酚自氧化抑制法，结果以u/g·Hb表示。E-CAT检测采用过氧化氢与乙酸重铬酸钾显色比色法，结果以k/g·Hb表示。E-GSH-P X检测采用改良Hageman氏法，结果以u/g·Hb表示。P-LPO和E-LPO检测采用硫代巴比妥酸 反应产物比色分析法，结果分别以μmol/L和nmol/g·Hb表示。

　　1.3　主要试剂和仪器：主要试剂如α-萘胺、维生素C、维生素E、β-胡萝卜素、邻苯三酚、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、四乙氯基丙烷、硫代巴比妥酸等均为美国Sigma　chemical　company产品，其他试剂均为国产分析纯级试剂。主要仪器为UV-754分光光度计等。

　　1.4　统计学处理：测定数据以表示，检验方法采用t检验、x²检验、直线回归和相关分析等。

　　2　结　　果

　　2.1　患者组与对照组P-NO、P-VC、P-VE、P-β-CAR、E-SOD、E-CAT、E-GSH-PX、P-LPO、E-LPO值及其结果见表1。

表1　患者组与对照组P-NO、P-VC、P-VE、P-β-CAR、E-SOD、E-CAT、E-GSH-PX、P-LPO、E-LPO值的比较()

　^*t检验

　　表1提示，与对照组比较，患者组的P-VC、P-VE、P-β-CAR、E-SOD、E-CAT、E-GSH-PX平均值均显著降低(P＜0.001)，P-NO、P-LPO、E-LPO平均值均显著升高(P＜0.001)。

　　2.2　CAG患者的HP检出量与P-NO、P-VC、P-VE、P-β-CAR、E-SOD、E-CAT、E-GSH-PX、P-LPO、E-LPO值的直线回归和相关结果见表2。

表2　CAG患者HP检出量与P-NO、P-VC、P-VE、P-β-CAR、E-SOD、E-CAT、E-GSH-PX、P-LPO、E-LPO值的直线回归和相关

　　　　　　　^*直线相关系数的显著性检验

　　表2提示，CAG患者的P-VC、P-VE、P-β-CAR、E-SOD、E-CAT、E-GSH-PX值均随HP量的增高而降低，P-NO、P-LPO、E-LPO值均随HP量的增高而升高，并均呈一定程度的直线相关(P＜0.05～0.001)。

　　3　讨　　论

　　一氧化氮(Nitric　oxide,NO)作为自由基及传递和调节介质，在炎症和组织细胞的损伤和增殖，胃肠运动的调节和粘膜保护等生理功能与病理生理过程中起着重要作用。当机体内NO生成失衡，过多或过少，均会诱发疾病^［1～3］。本文CAG患者体内NO生成过多和代谢失常，氧化和抗氧化平衡严重失调，氧自由基反应及脂质过氧化反应明显增加，分析原因 ，可能是CAG患者进食的局限性及自身消化功能的紊乱，VC、VE等体内合成不足，需靠外界 摄入，故其摄入抗氧化类维生素的量可能严重不足；另一方面，因HP感染致不同程度的急、 慢性炎症，多形核嗜中性粒细胞等在吞噬HP时产生大量的、·OH、HO₂、H₂O₂等活性氧，释放至细胞介质及体液内^［4～6］，导致体内氧化和抗氧化平衡失调及 一系列自由基反应加剧，为清除高浓度的、·OH等，CAG患者动用体内大量的抗氧 化剂和抗氧化酶，结果导致P-VC、P-VE、P-β-CAR、E-SOD、E-CAT、E-GSH-PX平均活性显著降低。高浓度的、·OH等能氧化、损伤、破坏SOD、CAT、GSH-PX的巯基 (-SH)结构，而VC、VE和β-CAR含量显著减少，不能有效保护-SH，以及自由基对DNA和酶 蛋白的损伤，使SOD、CAT、GSH-PX的活性减弱或丧失及合成和再生减少^［5，6］。H P代谢产物之一NO₂是生物膜脂质过氧化作用的强催化剂，使多不饱和脂肪酸(PUFAS)过氧化，、·OH等对PUFAS的直接攻击，使体内脂质过氧化反应明显加剧，更多的PUFAS 被过氧化，加上分解LPO的GSH-PX活性减弱或丧失，合成和再生受损^{［1，2，7］}， 导致P-LPO和E-LPO含量显著升高。至于P-NO显著升高，可能与HP感染及其代谢产物有关 。

　　CAG患者由于HP感染，消除自由基的能力下降^［8］，抗氧化类维生素不足及炎症时产生NO等大量自由基严重破坏了体内氧化和抗氧化平衡，加快了氧化和过氧化进程及损伤程 度，可能使CAG病情加剧，因此，治疗CAG在清除HP同时，应添加VC、VE等抗氧化剂和抗氧化 药物，以缓解患者的病情。

　　参考文献

　　1　Snyder　SH.　Nitric　oside:　First　in　a　newclass　neurotransmitese?　Science,1992,257(5)∶494.

　　2　Nguyen　T,　Saberg　HD.　DNA　damage　and　mutation　in　human　cells　esposed　to　nitric　oxide　in　vitro.　Pro　Natl　Acad　Sci　USA,1992,89(10)∶3030.

　　3　张忠兵.一氧化氮与某些临床疾病.中华内科杂志，1994，33(3)∶204.

　　4　袁受力.自由基与消化道肿瘤.中华消化杂志，1991，11(3)∶125.

　　5　陈瑷，周玫，主编.自由基医学.北京：人民军医出版社，1991，64∶279.

　　6　方允中，李文杰，主编.自由基与酶-基础理论及其在生物学和医学中的应用.北京：科学出版社，1989，177-213.

　　7　周君富，张小岗，钟雪娟.急性颅脑损伤与脑脊液和血浆过氧化脂质关系的探讨.中华创伤杂志，1991，7∶1.

　　8　陈军贤，陈强，许幼如，等.幽门螺杆菌感染患者胃液和血液抗坏血酸及脂质过氧化物的变化.中华消化杂志，1995，15(3)∶138.

(1998　07　31收稿)